使用非极性固定液,根据气液色谱原理,推测苯甲苯,乙酸乙酯,丙

是的。

甲苯，是一种有机化合物，化学式为C7H8，是一种无色、带特殊芳香味的易挥发液体。有强折光性。能与乙醇、 乙醚、丙酮、氯仿、二硫化碳和冰乙酸混溶，极微溶于水。

化学性质活泼，与苯相像。可进行氧化、磺化、硝化和歧化反应，以及侧链氯化反应。甲苯能被氧化成苯甲酸。

甲苯主要由原油经石油化工过程而制得。作为溶剂它用于油类、树脂、天然橡胶和合成橡胶、煤焦油、沥青、醋酸纤维素，也作为溶剂用于纤维素油漆和清漆，以及用为照相制版、墨水的溶剂。甲苯也是航空和汽车汽油的一种成分。

甲苯大量用作溶剂和高辛烷值汽油添加剂，也是有机化工的重要原料，但与同时从煤和石油得到的苯和二甲苯相比，目前的产量相对过剩，因此相当数量的甲苯用于脱烷基制苯或岐化制二甲苯。

甲苯衍生的一系列中间体，广泛用于染料；医药；农药；火炸药；助剂；香料等精细化学品的生产，也用于合成材料工业。

参考资料来源：百度百科-甲苯

根据资料显示，二甲苯在固定剂的分类中，所以二甲苯是固定剂。

二甲苯是一种有机化合物，为无色透明液体，是苯环上两个氢被甲基取代的产物，存在邻、间、对三种异构体，2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，二甲苯在3类致癌物清单中。

a、 分离极性化合物，采用极性固定液。这时样品各组分与固定液分子间作用力主要是定向力和诱导力，各组分出峰次序按极性顺序，极性小的先出峰，极性越大，出峰越慢；

b、分离非极性化合物，应用非极性固定液，样品各组分与固定液分子间作用力是色散力，没有特殊选择性，这时各组分按沸点顺序出峰，沸点低的先出峰。对于沸点相近的异构物的分离，效率很低；

c、 分离非极性和极性化合物的混合物时，可用极性固定液，这时非极性组分先馏出，固定液极性越强，非极性组分越易流出；

d、对于能形成氢键的样品。如醇、酚、胺和水的分离，一般选择极性或氢键型的固定液，这时依组分和固定液分子间形成氢键能力大小进行分离。“相似相容性原则”是选择固定液的一般原则，有时利用现有的固定液不能达到满意的分离结果时，往往采用“混合固定液”，应用两种或两种以上性质各不相同的，按适合比例混合的固定液，使分离有比较满意的选择性，又不致使分析时间延长。然而，在实际工作中选择固定液往往是参考资料或文献介绍的实例来选用固定液的。

混合固定液的处理方法及用量

2008-10-05 19:23

混合固定液的处理方法有三种：

1、分别涂渍于担体后再混合；

2、将固定液混合后再涂渍，注意这时所用的固定液都应溶解在同一个溶剂里；

3、分别涂渍，分别填装入按比例长短的色谱柱，最后再将它们串接起来。 上述三种处理方法，结果基本相同，但对于特殊的分离，有些也会有差异。

常用的固定液涂量为多少合适？

由于固定液含量对分离效率的影响很大。所以它与担体的重量比例，低比例为5％，一般用15％－25％。液体比例再大，则被分析的样品在比较厚的液膜上有扩散现象，有损于分离；液体比例太低时，则由于液膜太薄，担体表面上残余的吸附能力会显示出来，使色谱峰拖尾。由于低比例能促进平衡的建立，可以用较高的载气流速，所以用低的液体比例，再加上少量样品，能缩短分析时间。对硅藻土担体固定液含量可大些15－30％；由于氟担体表面积较小，所以最多只能10％；至于玻璃微球由于表面积特小，固定液含量便只能保持在0、25％左右。

配柱时常用的固定液溶剂有哪些？选用溶剂的原则是什么？

常用的溶剂有：甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、正丁醇、正己烷、石油醚、苯、甲苯和氯仿等等。选用的原则是： 1、溶解性好， 2、不与固定液起化学反应， 3、沸点低， 4、毒性小。

固体固定相及分类，什么是固定液，对固定液有哪些要求

2008-10-05 19:20

指直接装填到色谱柱中作为固定相的具有活性的多孔性固体物质。固体固定相大体可分为三类：

第一类是吸附剂。如：分子筛、硅胶、活性炭、氧化铝等；

第二类是高分子聚合物。如国内的GDX型高分子多孔微球，国外Porapak系列等；

第三类是化学键合固定相。在气相色谱中，通常是将固定液涂敷在载体表面上。采用化学键合固定相分析极性或非极性物质通常都能够得到对称峰，柱效很高，固定相的热稳定性也有所改善。

一般是一种高沸点的有机物的液膜，通过对不同组份的不同分子间的作用，使组份在色谱柱中得到分离。对气相色谱用的固定液，一般有如下几点要求：

1、在操作温度下蒸气压低，热稳定性好，与被分析物理或载气不产生不可逆反应；

2、在操作温度下呈液态，而且粘度愈低愈好。物质在高粘度的固定液中传质速度慢，柱效率因而降低。这决定固定液的最低使用温度；

3、能牢固地附着在载体上，并形成均匀和结构稳定的薄层；

4、被分离的物质必须在其中有一定的溶解度，不然就会很快地被载气带走而不能在两相之间进行分配；

5、对沸点相近而类型不同的物质有分离能力，即保留一种类型化合物的能力大于另一种类型。这种分离能力即是固定液的选择性。

使用担体为何要进行处理？一般处理的方法有哪些以及担体的选择

2008-10-05 19:19

常用的担体表面并非惰性，它具有不同程度的催化作用和吸附性（特别是固定液含量低时和分离极性物质时）造成峰拖尾和柱效下降，保留值改变等影响，因而需要预处理。现将一般处理方法简述如下：

1、酸洗法：用浓盐酸加热处理担体20－30分钟，然后用自来水冲洗至中性，再用甲醇漂洗，烘干备用。此法主要除去担体表面的铁等无机物杂质。

2、碱洗法：用10％的氢氧化钠或5％的氢氧化钾－甲醇溶液浸泡或回流担体，然后用水冲洗至中性，再用甲醇漂洗，烘干备用。碱洗的目的是除去表面的三氧化二铝等酸性作用点，但往往在表面上残留微量的游离碱，它能分解或吸附一些非碱性物质，使用时要注意。

3、硅烷化：用硅烷化试剂和担体表面的硅醇、硅醚基团起反应，除去表面的氢键结合能力，可以改进担体的性能。常用的硅烷化试剂有二甲基二氯硅烷和六甲基二硅胺。

4、釉化：把欲处理的担体在2、3％的碳酸钠－碳酸钾（1：1）水溶液中浸泡一天，烘干后先在870度下煅烧3、5小时，然后升温到980度煅烧约40分钟。经过这样处理，担体表面形成一层玻璃化的釉质，故称“釉化担体”。这种担体的吸附性能小，强度大，当固定液中加入少量的去尾剂后，能分析如醇、酸等极性较强的物质。但对非极性物质柱效能则稍有下降。此外甲醇和甲酸等物质在釉化担体上有一定的不可逆化学吸附，在定量分析时应予以注意。

其他纯化方法：凡是用化学反应来除去活性作用点或用物理复盖以达到纯化担体表面性质的方法都可以使用。十六、常用的担体目数为多少？答：常用的4－6毫米内径的色谱柱：对于较长色谱柱，选用担体目数一般为40－80目；对于较短色谱柱选用担体目数一般为80－100目(每英寸内的筛孔数目为目）

各种担体，名目繁多。在常用硅藻土担体中: 红色担体（如6201、201），可用于非极性或弱极性物质的分离。 白色担体（如101）可用于极性物质或碱性物质。 釉化红色担体（如301）可用于中等极性物质。 硅烷化白色担体可用于强极性氢键型物质如废水测定。 分离酸性物质，如酚类，要用酸洗处理的担体。 分离碱性物质，如乙醇胺，要用碱洗处理的担体。 微量分析要用硅烷化的担体。 有些特殊的情况下要用特殊的担体，如氟担体分离异氰酸酯类。 但是在普通的常量分析中，对担体可以不必过份讲究，甚至如耐火砖粉粒，玻璃珠砂和海沙也可以使用

气相色谱中什么叫担体？对担体有哪些要求以及分类

2008-10-05 19:15

担体是一种多孔性化学惰性固体，在气相色谱中用来支撑固定液。对担体有如下几点要求：

1、表面积较大，一般应在0、5－2米 ／克之间；

2、具有化学惰性和热稳定性；

3、有一定的机械强度，使涂渍和填充过程不引起粉碎；

4、有适当的孔隙结构，利于两相间快速传质；

5、能制成均匀的球状颗粒，利于气相渗透和填充均匀性好；

6、有很好的浸润性，便于固定液的均匀分布。完全满足上述要求的担体是困难的，人们在实践中只能找出性能比较优良的担体。

担体通常分为硅藻土和非硅藻土两大类，每一类又有种种小类。

1、硅藻土类型： （1）白色的：表面积小，疏松，质脆，吸附性能小，经适当处理，可分析强极性组分； （2）红色的：有较大的表面积和较好的机械强度，但吸附性较大。

2、非硅藻土类型：

（1）氟担体：表面惰性好，可用来分析高极性和腐蚀性物质，但装柱不易，柱效率低些。

（2）玻璃微球：表面积小，用它做担体柱温可以大大降低，而分离完全且快速。但涂渍困难，柱效低。

（3）多孔性高聚物小球：机械强度高，热稳定性好，吸附性低，耐腐蚀，分离效率高，是一种性能优良的新型色谱固定相。

（4）炭分子筛：中性，表面积大，强度高，祛寿命长，在微量分析上有无比的优越性。

（5）活性炭：可以单独做为固定相。

（6）沙：主要用于分离金属。

常用担体有：

101担体：为白色硅藻土担体； 102担体：为白色硅藻土担体； celite545：为白色硅藻土担体； 201担体：为红色硅藻土担体； 6201担体：为红色硅藻土担体； C－22保温砖：为红色硅藻土担体； chromosorb：为红色硅藻土担体。

气相色谱分析中柱长、柱内径、柱温、载气流速、固定相、进样等操作条件对分离的影响？

2008-10-05 19:14

操作条件对于色谱分离有很大影响。

1、柱长，柱内径：一般讲，柱管增长，可改善分离能力，短则组分馏出的快些；柱内径小分离效果好，柱内径大处理量大，但柱内径过大，将导致担体不能均匀地分布在色谱柱中。分析用柱管一般内径为3－6毫米，柱长为1－4米。

2、柱温：是一个重要的操作变数，直接影响分离效能和分析速度。选择柱温的根据是混合物的沸点范围，固定液的配比和鉴定器的灵敏度。提高柱温可缩短分析时间；降低柱温可使色谱柱选择性增大，有利于组分的分离和色谱柱稳定性提高，柱寿命延长。一般采用等于或高于数十度于样品的平均沸点的柱温为较合适，对易挥发样用低柱温，不易挥发的样品采用高柱温。

3、载气流速：载气流速是决定色谱分离的重要原因之一。一般讲流速高色谱峰狭，反之则宽些，但流速过高或过低对分离都有不利的影响。流速要求要平稳，常用的流速范围每分钟在10－100亳升之间。

4、固定相：固定相是由固体吸附剂或涂有固定液的担体构成。 （1）固体吸附剂或担体粗细：一般采用40－60目、60－80目、80－100目。当用同等长度的柱子，颗粒细的分离效率就要比粗的好些。 （2）固定液含量：固定液含量对分离效率的影响很大，它与担体的重量比一般用15％－25％。比例过大有损于分离，比例过小会使色谱峰拖尾。

5、进样：一般讲进样快，进样量小，进样温度高其分离效果好。对进液体样，速度要快，汽化温度要高于样品中高沸点组分的沸点值，一次汽化，保证色谱峰形不致展宽、使柱效高。当进样量在一定限度时，色谱峰的半峰宽是不变的。若进样量过多就会造成色谱柱超载。一般讲柱长增加四倍，样品的许可量增加一倍。对于常规分析，液体进样量为1－20微升；气体进样量为0、1－5毫升。

本标准适用于工业废水及地表水中苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、异丙苯、苯乙烯8种苯系物的测定。

本方法选用3％有机皂土／101担体＋2.5％邻苯二甲酸二壬酯／101担体，混合重量比为35:65的串联色谱拄，能同时检出样品中上述8种苯系物。采用液上气相色谱法，最低检出浓度为0.005mg／L。测定范围为0.005～0.1mg／L；二硫化碳萃取的气相色谱法，最低检出浓度为0.05mg／L，测定范围为0.05～12mg／L。

2 试剂和材料

2.1 载气和辅助气体

2.1.1 载气：氮气，纯度99.9％，通过一个装有5A分子筛、活性炭、硅胶的净化管净化。

2.1.2 燃气：氢气，与氮气的净化方法相同。

2.1.3 助燃气：空气，与氮气的净化方法相同。

2.2 配制标准样品和试样预处理时使用的试剂和材料

2.2.1 苯系物：苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、异丙苯、苯乙烯均采用色谱纯标准试剂。

2.2.2 无水硫酸钠(Na2SO4)，分析纯。

2.2.3 氯化钠(NaCl)，分析纯。

2.2.4 氮气，用活性炭加以净化的普氮(99.9％)。

2.2.5 蒸馏水。

2.2.6 二硫化碳(CS2)，分析纯。在色谱上不应有苯系物各组分检出。如若检出应做提纯处理。

2.2.7 苯系物贮备溶液：各取10.0?L苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、异丙苯、苯乙烯色谱纯标准试剂(2.2.1)，分别配成1000mL的水溶液作为贮备液。可在冰箱中保存一周。

2.2.8 气相色谱用标准工作溶液：根据检测器的灵敏度及线性要求，取适量苯系物贮备溶液(2.2.7)用蒸馏水(2.2.5)配制几种浓度的苯系物混合标准溶液。

2.3 制备色谱柱时使用的试剂和材料

2.3.1 色谱柱和填充物：见3.4条“色谱柱”中有关内容。

2.3.2 涂渍固定液所用溶剂：苯、丙酮。

3 仪器

3.1 仪器的型号

带氢焰离子化检测器的气相色谱仪。

3.2 进样器

5mL医用全玻璃注射器，10?L微量注射器。3.3 记录器 与仪器相匹配的记录仪。3.4 色谱柱3.4.1 色谱柱类型：填充柱。3.4.2 色谱柱数量，1支。3.4.3 色谱柱的特性：3.4.3.1 材料：不锈钢或硬质玻璃管。3.4.3.2 长度：3m。3.4.3.3 内径：4mm。3.4.4 填充物：3.4.4.1 载体： a.名称：101白色担体。 b.粒度：60～80目。3.4.4.2 固定液：

a.名称及其化学性质：有机皂土(Bentone)，最高使用温度100℃，邻苯二甲酸二壬酯(DNP)，最高使用温度150℃。

b.液相载荷量：有机皂土为3％；DNP为2.5％。

c.涂渍固定液的方法：静态法。根据担体的重量称取一定量的有机皂土，溶解在苯(2.3.2)中，待完全溶解后倒入担体，使担体全部浸没在溶液中，轻轻摇动容器，让溶剂慢慢均匀挥发，待溶剂全部挥发后即涂渍完毕。DNP用丙酮溶解后，涂渍步骤同有机皂土。

3.4.5 色谱柱的填充方法：不锈钢管柱的一端用玻璃棉和铜网塞住，接真空泵(泵前装有干燥塔)，柱的另一端通过软管接漏斗，将固定相慢慢通过漏斗装入色谱柱内。在装填固定相的同时开动真空泵抽气。固定相在色谱柱内应均匀紧密填充。先将3％有机皂土／101按总重量的35％装入色谱柱，然后将2.5％DNP／101按总重量的65％装入柱内，装填完毕后用玻璃棉和铜网塞住色谱柱的另一端。

3.4.6 色谱柱的老化：将装好的色谱柱DNP一端接在进样口上，另一端不要联接检测器，用较低的载气流速通入氯气，慢慢地(在1h内)将柱箱温度提高至90℃，在此温度老化8h，在老化过程中注入较浓的混合标准溶液。

3.4.7 柱效能和分离度：在给定的条件下，色谱柱总的分离度大于0.7。

3.5 检测器

3.5.1 类型：氢焰离子化检测器。

3.5.2 检测器极化电压＋250V，使用单焰工作。

3.6 试样预处理时使用的仪器

3.6.1 超级恒温水浴。

3.6.2 康氏电动振荡机，振荡次数不小于200次。需在机上自配水槽一个(有进、出水口，并有100mL注射器固定夹)。

3.6.3 100mL医用全玻璃注射器。

3.6.4 封诸100mL注射器(3.6.3)用胶帽若干。

4 样品

4.1 样品的性质

4.1.1 样品名称：工业废水、地表水。

4.1.2 样品状态：液体。

4.1.3 样品的稳定性：水中苯系物易挥发。

4.2 水样采集和贮存方法

4.2.1 水样采集：用玻璃瓶采集样品，样品应充满瓶子，并加盖瓶塞。

4.2.2 水样保存：采集水样后应尽快分析。如不能及时分析，可在4℃冰箱中保存，不得多于14天。

4.3 试样的预处理

4.3.1 液上气相色谱法的预处理方法：称取20.0g氯化钠(2.2.3)，放入100mL注射器(3.6.3)中，加入40mL水样，排出针简内空气，再吸入40mL氮气(2.2.4)然后将注射器用胶帽(3.6.4)封好，置于康氏振荡器水槽(3.6.2)中固定，在35℃恒温下振荡5min，抽取液上空中的气体5mL做色谱分析。当废水中苯系物浓度较高时，可减少进样量。

4.3.2 二硫化碳萃取的富集方法：取调至酸性(pH＜2)的水样放入250mL分液漏斗中，加5mL二硫化碳(2.2.7)，振摇2min，静置分层后，分离出有机相，在规定的色谱条件下，取5?L萃取液做色谱分析。

注意：如用二硫化碳萃取时发生乳化现象，则可在分液漏斗中加入适量无水硫酸钠(2.2.2)破乳，收集萃取液时，在分液漏斗的颈下部塞一块玻璃棉，使萃取液过滤。弃去最初几滴，收集余下的二硫化碳溶液，以备测定。

5 操作步骤

5.1 调整仪器

5.1.1 汽化室温度：200℃。

5.1.2 柱箱温度：恒温，65℃。

5.1.3 裁气流速：流速34mL／min。根据色谱柱的阻力调节柱前压。

5.1.4 检测器：

5.1.4.1 检测室温度：150℃。

5.1.4.2 放大器输入阻抗1010?。

5.1.4.3 辅助气体的调节：氢气流速：36mL／min；空气流速：384mL／min。

5.1.5 记录器：

5.1.5.1 衰减：根据样品中被测组分含量调节记录仪衰减。

5.1.5.2 纸速：300mm／h。

5.2 校准

5.2.1 外标法

5.2.2 标准样品：

5.2.2.1 标准样品的制备：在线性范围内配制一系列浓度的标准溶液。

5.2.2.2 气相色谱法中使用标准样品的条件；

a.标准样品进样体积与试样体积相同；

b.仪器的重复条件：一个样品连续注射进样2次(液上气相色谱法处理的样品需重新恒温振荡)，其峰高相对偏差不大于7％，即认为仪器处于稳定状态。

5.2.5 校准数据的表示：

5.2.5.1 用曲线形式：

a.标度的选择：峰高值的标度为mm。苯系物各组分浓度的标度为mg／L。

b.曲线图的绘制方法：液上气相色谱法：取苯系物混合标准溶液(2.2.8)0.005、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.1mg／L浓度系列，按液上气相色谱法的预处理步骤(4.3.1)操作，并绘制浓度——峰高的校准曲线。

二硫化碳萃取的气相色谱分析方法：取苯系物的色谱标准试剂(2.2.1)用蒸馏水(2.2.5)配成1，2，4，6，8，10，12mg／L浓度系列，按二硫化碳萃取的气相色谱法的预处理步骤(4.3.2)操作，并绘制浓度——峰高的校准曲线。

5.2.5.2 对曲线的校准：在每个工作日，用一个或更多的标准样品对曲线进行校准。

5.3 试验

5.3.1 进样：

5.3.1.1 进样方式：注射器进样。

5.3.1.2 进样量：液上气相色谱法一次进样量为5.0mL，二硫化碳萃取的气相色谱法一次进样量为5.0?L。

5.3.1.3 操作：

a.液上气相色谱法：按预处理步骤(4.3.1)抽取液上空中的气样到已预热到稍高于35℃的5mL注射器(3.2)中，迅速注射至色谱仪中，立即拔出注射器。

b.二硫化碳萃取的气相色谱法：用待分析的萃取液润湿10?L微量注射器(3.2)的针筒及针头，抽取萃取液至针筒中，排出气泡及多余的萃取液，保留5.0?L体积，迅速注射至色谱仪中，立即拔出注射器。

5.4.2.3

检验可能存在的干扰：用另一根色谱柱进行分析，可确定样品色谱峰有无干扰。

5.4.3

定量：

a.

色谱峰的测量：以峰的起点和终点联线作为峰底。从峰高极大值对时间铀作垂线，对应的时即为保留时间。此线从峰顶至峰底间的线段即为峰高。

b.

计算：由色谱峰量出各组分的峰高，然后在各自的校准曲线上查出相应的待测物浓度。

6

结果的表示

6.1

定性结果：根据标准谱图各组分的保留时间确定被测试样中出现的组分数目和组分名称。

6.2

定量结果

6.2.1

含量的表示方法：根据校准曲线查出组分的含量，以mg／L表示。

6.2.2

精密度：见表1。

表

1精密度数据表(8个实验室)

组 分 液上气相色谱法

CV(％) 二硫化碳萃取气相色谱法

cv(％)

0.1C1)

0.5C

0.9C

0.1C

0.5C

0.9C

苯

8.5

4.9

4.1

4.3

4.1

6.6

甲苯

9.3

6.2

5.2

5.1

5.1

7.9

乙苯

8.9

5.6

6.2

5.0

4.3

9.9

对二甲苯

9.4

5.8

6.4

5.9

7.9

7.4

间二甲苯

11.9

5.9

6.0

8.2

4.5

6.5

邻二甲苯

10.6

6.6

5.9

8.1

4.9

4.6

异丙苯

11.8

7.5

6.7

10.5

6.1

6.7

苯乙烯

10.1

6.7

5.2

6.8

6.6

3.5

注：

1)C为方法的浓度上限。液上气相色谱法C＝0.1mg／L，二硫化碳萃取气相色谱法C＝12mg／L。

6.2.3

准确度：见表2。

表

2 准确度数据表(8个实验室)

组 分 加标回收率

(％)

液上气相色谱法

二硫化碳萃取气相色谱法

苯

83.0

88.5

甲苯

89.5

88.6

乙苯

95.5

95.4

对二甲苯

94.2

96.4

间二甲苯

92.4

94.7

邻二甲苯

90.7

92.9

异丙苯

101.7

87.4

苯乙烯

95.8

100.4

6.2.4

最低检出浓度为全程序试剂空白信号值的5倍标准差所对应的浓度。

附录A 二硫化碳的提纯(脱芳烃)方法

(参考件)

在1000mL抽滤瓶中加入200mL欲提纯的二硫化碳，加入50mL浓硫酸。将一装有50mL浓硝酸的分液漏斗置于抽滤瓶上方，紧密连接。上述抽滤瓶置于加热电磁搅拌器上，打开电磁搅拌器，抽真空升温，使硝化温度控制在450±2℃，剧烈搅拌5min，搅拌时滴加硝酸到抽滤瓶中。静置5min，反复进行，共反应半小时。然后将溶液全部转移至500mL分液漏斗中，静置半小时左右，弃去酸层，水洗，加10％碳酸钾溶液中和至pH＝6～8，再水洗至中性，弃去水相，二硫化碳用无水硫酸钠干燥除水备用。

一、实验目的

掌握石蜡切片法中固定、透明与包埋的基本操作步骤及要点。

二、实验材料

党参、秦艽或其它药材的根

三、实验用具及试剂

福尔马林-酒精-醋酸混合固定液(简称FAA)、各级酒精溶液、二甲苯、石蜡（熔点52～54℃）、恒温箱、电热板、解剖针等。

四、实验内容与步骤

1．取材

取培养在花盆中或药用植物园中的党参根或秦艽根，用水冲去附在其上的木屑或泥土，切成5mm长的小段(亦可用带侧根的部分)。

2．固定

FAA固定液中固定24h以上。

3．脱水

将FAA固定液倒出后，转入70%酒精中浸泡1h后，再顺次转入83%和95%酒精中各2h，然后转入纯酒精中2～3h（中间换一次)。

4．透明

等量纯酒精及二甲苯中2h，二甲苯2h(中间换一次)。

5．透蜡

将已经透明的材料和二甲苯一起倒入包埋用的小杯中，此时可把写好的标签投入二甲苯中，然后轻轻倒入溶解的石蜡(熔点为52～54℃)，这样，石蜡就在二甲苯的上层凝固起来。小杯放在35～37℃的熔蜡炉内，使石蜡徐徐溶解到饱和为止，约需l～2d。

6．包埋

先将小杯移入56～60℃的恒温箱内(温度宜较石蜡熔点高3℃)，待石蜡熔化后，倒去含二甲苯的石蜡，换以熔化的纯石蜡，以后每隔lh左右换纯蜡一次，材料在恒温箱中的时间视不同材料而异，约为2～5h，共换纯蜡2～3次，即可进行包埋。

包埋时，先用道林纸摺成适当大小的纸盒，放在已经加热的电热板上。然后右手持解剖执针，左手从温箱中取出盛满石蜡的小杯，随手将温箱关好，迅速把石蜡连同材料和标签一起倒入纸盒中，再用烤热的解剖针轻轻拨动材料使之排列整齐。如发现材料附近有石蜡的凝块，则需用热针熔去，同时使标签上有字的一面朝外，以便识别。稍停，待盒中石蜡凝到不致动摇材料时，就将纸盒轻轻放入冷水中使它迅速凝固。半h后，即可取出贮藏备用。

五、实验注意事项

1．在材料选择和切割时应注意下列问题：

（1）选取新鲜、无病虫害并具代表性的材料；

（2）先作徒手切片或剥离检查，决定适宜的材料，立即固定；

（3）注意按季节和植物生长发育不同阶段取材；

（4）材料大小要适当。

2．固定时应注意的问题：

（1）标签的填写

必须将标签纸贴于标本瓶上，并写上以下内容：编号、采集时间、地点、处理者姓名。另外，在实验记录本上表明编号的详细情况：何种植物的何种器官，是横切还是纵切，用的是何种固定液等等。

（2）固定液的选择

根据所用材料的不同，选择不同的固定液。一般，各种器官，不论是根、茎、叶，还是花和果实，其组织切片均用FAA固定液，而根尖、茎尖、花药等材料的压片（非切片法）用卡诺固定液。

（3）材料体积的影响

对于微小材料可直接投入固定液，对于较大材料，则须将其先解剖成较小材料，再迅速投入固定液。若材料外部超过固定液上线，达不到固定作用时，应须立即放入渗透力很强的固定液中，如醋酸酒精溶液；或利用超声波发生器处理数min。

（4）多毛芽或根茎的固定

对多毛的芽或根茎固定时，须先投入渗透能力很强的醋酸酒精溶液中数分钟，然后再投入其它固定液中固定。必要时配合抽气装置，其意义在于使固定液尽快渗入材料内部，并排除材料内气泡的干扰。

3．脱水时的注意事项

（1）脱水从低浓度开始逐渐替换高浓度酒精，否则发生细胞收缩。

（2）从同浓度（保存液中）酒精开始。例FAA从70%或50%酒精开始。注意要加盖，各级酒精停留时间因材料而定。

4．透明时的注意事项

（1）使用时材料必须脱尽水分，否则发生乳状混浊。

（2）要避免材料收缩

分子式：C8H6O4

分子量：166.13

CAS号：88-99-3

性质：无色单斜晶体.熔点191℃(封闭管).

密度（20/4℃）1.593g/cm3

迅速加热到230℃时,熔融并分解为水和邻苯二甲酸酐.微溶于水和乙醚、溶于甲醇和乙醇,不溶于氯仿和苯.

毒性LD50(mg/kg)：大鼠经口7900.

用途：用于制取染料、聚酯树脂、涤纶、物及增塑剂等.在应用中可用邻苯二甲酸酐代替邻苯二甲酸.邻苯二甲酸是合成树脂、纤维、物等的原料.是重要的有机工业产品.用作气相色谱参比物质及某些金属的分析试剂.

制取：工业上多用邻甲基甲酸、邻二甲苯或萘为原料,经五氧化二钒催化氧化制备.可由邻苯二甲酸酐水解制得,还可由邻二甲苯或邻甲苯酸氧化制得.在铈盐或钍盐存在下,用发烟硫酸氧化萘或电解萘制得.邻苯二甲酸可形成邻苯二甲酸单酯和双酯；它的苯环上也可发生取代反应.由于邻苯二甲酸与邻苯二甲酸酐具有相似的化学性质,工业上往往直接生产邻苯二甲酸酐.