测定苯酚的方法

检验的话可用溴水或FeCl3溶液

①用溴水

现象：苯酚中加入溴水会生成白色沉淀

原理：溴与苯酚生成白色三溴苯酚 C6H6OH + 3 Br2 =C6H3OHBr3 ↓ + 3HBr

注意：苯酚浓度不能太大，否则会溶解生成的C6H3OHBr3，看不到沉淀产生。

②用FeCl3溶液

现象：苯酚中加入FeCl3溶液会使溶液变成紫色

原理：苯酚与FeCl3生成紫色的[Fe(C6H5O)6]3-络离子FeCl3 + 6 C6H5OH === H3[Fe(C6H5O)6] + 3 HCl

注意：这个现象很明显，注意是溶液变成紫色，不是产生紫色沉淀。

方法提要

氨在碱性溶液中与次氯酸盐生成一氯胺，在亚硝基铁氰化钠催化下与酚生成吲哚酚蓝染料，光度法测定。一氯胺和吲哚酚蓝的形成均与溶液pH值有关。次氯酸与氨在pH为7.5以上主要生成二氯胺当pH降低至5～7和4.5以下，则分别生成二氯胺和三氯胺pH在10.5～11.5之间，生成的一氯胺和吲哚酚蓝都较为稳定，且呈色最深。用光度法直接测定时，需加入柠檬酸防止水中钙、镁离子生成沉淀。

本法最低检测质量为0.25μg。若取10mL水样测定，检测下限为0.025mg/L。

单纯的悬浮物可通过0.45μm滤膜过滤，干扰物较多的水样需经蒸馏后再进行测定。

仪器和装置

分光光度计。

具塞比色管10mL。

试剂

本法所用试剂均需用不含氨的纯水配制。

酚-乙醇溶液称取62.5g精制的苯酚(无色)溶于45mL(95+5)乙醇中，保存于冰箱中。如发现空白值增高，应重配。

亚硝基铁氰化钠溶液(10g/L)称取1g亚硝基铁氰化钠(又名硝普钠)溶于少量纯水中，稀释至100mL，贮存于冰箱中。如发现空白值增高，应重配。

氢氧化钠溶液(240g/L)称取120g氢氧化钠溶于550mL纯水中，煮沸并蒸发至450mL，冷却后加纯水稀释至500mL。

柠檬酸钠溶液(400g/L)称取200g柠檬酸钠溶于600mL纯水中，煮沸蒸发至450mL，冷却后加纯水稀释至500mL。

酚盐-柠檬酸盐溶液将3.0mL亚硝基铁氰化钠溶液、5.0mL酚-乙醇溶液、6.5mL氢氧化钠溶液及50mL柠檬酸钠溶液混合均匀。在冰箱中保存，可使用2～3d。

含氯缓冲溶液称取12gNa2CO3和0.8gNaHCO3溶于100mL纯水中。加入34mL30g/LNaClO溶液(又称安替福明)，并加纯水至200mL，放置1h后即可使用。取本试剂1mL用纯水稀释至50mL，加入1gKI及3滴H2SO4，以淀粉溶液作指示剂，用0.02500mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定生成的碘，应消耗5.6mL左右。如低于4.5mL应补加NaClO溶液。两种试剂混合后pH值的校正:加1.0mL酚盐-柠檬酸盐溶液和0.4mL含氯缓冲溶液于10mL纯水中，其pH值应在11.4～11.8，否则应在酚盐-柠檬酸盐溶液中再加入适量NaOH溶液。

铵离子标准储备溶液见81.12.1。

铵离子标准溶液ρ(NH+4)=5.00μg/mL吸取5.00mL铵离子标准储备溶液于1000mL容量瓶中，加纯水稀释至刻度。临用时配制。

校准曲线

于8支10mL具塞比色管中吸取0mL、0.05mL、0.10mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL和4.00mL铵离子标准溶液，加纯水至10mL。各加入1.0mL酚盐-柠檬酸盐溶液，立即加入0.4mL含氯缓冲溶液，充分混匀，静置90min，于波长630nm下，用1cm比色皿，以纯水作参比，测量吸光度，绘制校准曲线:

分析步骤

于每升水样中，加入0.8mLH2SO4，并在4℃保存。如有可能，最好在采样时立即过滤，并加入试剂显色，使测定结果更为准确。

对于直接测定的水样，加H2SO4固定时必须注意酸的用量。一般水样，每升加0.8mLH2SO4已足够，碱度大的水样可适当增加。应注意勿使过量，以免使加显色剂后pH值不能控制在10.5～11.5。

取10.0mL澄清水样或水样蒸馏液，于10mL具塞比色管中，按校准曲线步骤操作测定吸光度，从校准曲线上查出样品管中铵离子的质量。

试剂空白值取10mL纯水，置于10mL具塞比色管中，加入0.4mL含氯缓冲溶液，混匀，静置0.5h，将存在于水中的微量氨氧化分解，然后加入1.0mL酚盐-柠檬酸盐溶液，静置90min，测量吸光度，即为不包括稀释水在内的试剂空白值。

水样中铵离子的质量浓度的计算参见公式(81.9)。

不同形式表示的分析结果，可依照表81.6进行换算。

避免产生很大的毒害作用。紫外分光光度法测定药物中的苯酚实验中，苯酚浓度不能太大是避免产生很大的毒害作用。紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。

参比溶液选择：a 试液及显色剂均无色，蒸馏水作参比溶液。b 显色剂为无色，被测试液中存在其他有色离子，用不加显色剂的被测试液作参比溶液。c 显色剂有颜色，可选择不加试样溶液的试剂空白作参比溶液。d 显色剂和试液均有颜色，可将一份试液加入适当掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，使之不再与显色剂作用，而显色剂及其他试剂均按试液测定方法加入，以此作为参比溶液，这样就可以消除显色剂和一些共存组分的旦哗测狙爻缴诧斜超铆干扰。e 改变加入试剂的顺序，使被测组分不发生显色反应，以此溶液作为参比溶液消除干扰。一般,不加显色剂的测试溶液,参比溶液为溶解待测物质的溶剂. 如,测试溶液为CuSO4溶液(0.1%H2SO4中),则选择0.1%H2SO4作为参比溶液若测试溶液为KMnO4水溶液,则以水为参比.

苯酚差值光谱法测定未知样品中苯酚的含量：

（1）具有快速、灵敏,实验结果稳定、可靠之特点,而且有效地消除了紫外-可见分光光度法中有机杂质的干扰

（2）可以消除因为系统的光源不稳定,检测器灵敏度变化等由于系统本身的原因而引起的系统误差.

从而测定结果更准确,结果更具可靠性.

紫外-可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长（频率小）的光线能量小，波长短（频率大）的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。

测定蔗糖含量的主要依据旋光法、气相色谱法、液相色谱法、分光光度法等。

有关蔗糖含量的测定法有很多，如旋光法、气相色谱法、液相色谱法、分光光度法等。其中旋光法测量准确性较差。

气相色谱法和液相色谱法测量过程较复杂；文献报道的分光光度法，是在蔗糖的溶液中加入显色剂间苯二酚或2，4，6-三硝基酚，反应生成有色物质，并测其吸光度，文献报道的分光光度法，用酶水解蔗糖，加入4-氨替吡啉苯酚显色，再测吸光度。

但在以上试验中加入了有污染的间苯二酚等。用紫外分光光度法在酸性条件下直接测定蔗糖还未见报道。方法基于在酸性条件下,蔗糖水 解生成果糖和葡萄糖，果糖受热破坏后，其产物在285nm处有较大的紫外吸收。通过试验,确定了最佳条件，并建立了测定蔗糖的新紫外分光光度法。

酚试剂分光光度法检测甲醛，数据的高低、精准与否除了与密闭时间长短、检测环境有直接关系外，还与如下7个因素有关系。

1、检测环境因素。GB/T18883-2002要求夏冬两个极端季节温湿度条件分别为，夏季温度保持22-28℃，相对湿度40-80％RH；冬季温度保持16-24℃，相对湿度30-60％RH。所以检测时一定要关注现场实际环境，尽最大努力让室内环境达到或者接近规范所要求的检测条件。

2、酚试剂因素。检测所用的酚试剂主要成分为：盐酸3-甲基苯并瞻唑胺，为采样时吸收甲醛的主要耗材，无论是单点位的配置还是多点位的配置，其配比的浓度会绝对影响数值的精准。所以一定要严格按照实验室要求的浓度进行配比。

 3、酚试剂配比的纯水因素。酚试剂为粉末状，用于采样时需用纯水稀释至固定单位液体使用，所以水的纯净度也至关重要，自来水、瓶装水、桶装水多少都会含有部分杂质或添加物，实验室一般都用蒸馏水做为稀释液。

 4、大气采样仪的因素。大气采样仪为采集甲醛的主要设备，流速的稳定性决定采集10L大气量的精准性，所以采样流速及时间的设定会决定最终的采样空气量，一般采集甲醛流速设定0.5L/min，时间设定为20min。 

5、显色液的因素。显色液的主要成分为硫酸高铁铵溶液，与采样后的生成物嗪（甲醛与酚试剂反应生成物）发生反应生成蓝绿色化合物，这种颜色的化合物是通过分光光度计最终得到甲醛数值的主要依据，所以显色液的浓度配比及滴入嗪中显色液的量，决定着是否能够完全反应呈现最精准的蓝绿色。 

6、比色皿的因素。比色皿为分光光度计比色分析所用的器皿，透光度决定着光度计分析数据的精准性，考虑到玻璃的易磨损、透光度等问题，一般比色皿都选用石英材质。

 7、分光光度计的因素。分光光度计是最终测定甲醛含量的主要仪器，充当判官角色，嗪与酚试剂的氧化产物反应生成蓝绿色化合物，在波长630nm处用分光光度法测定甲醛数值，一般测得最大数值1.2mg/m³，最小数值为0.01mg/m³。因光度计涉及检测领域较广，检测不同物质会用到不同波段，所以每年需进行校验才能确保波长稳定数据更精准。

中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

GB/T 15351—94

化 学试剂

苯 酚 红

Chemical reagent

Phenol red

本试剂为红色结晶性粉末，易溶于乙醇及碱溶液中，不溶于三氯甲烷及醚中。

示性式：C19H14O5S

结构式：

相对分子质量:354.38（按1991年国际相对原子质量）

1 主题内容与适用范围

本标准规定了化学试剂苯酚红的技术要求、试验方法、检验规则和包装及标志。

本标准适用于化学试剂苯酚红的检验。

2 引用标准

GB/T 601化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备

GB/T 603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备

GB/T 604化学试剂酸碱指示剂pH变色域测定通用方法

GB/T 619化学试剂采样及验收规则

GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T 9721化学试剂分子吸收分光光度法通则（紫外和可见光部分）

GB/T 9741化学试剂灼烧残渣测定通用方法

HG 3—119 化学试剂 包装及标志

3技术要求

3.1 pH变色域:

1.2(橙)～3.0(黄)；

6.5(棕黄)～8.0(紫红)。

3.2 最大吸收波长（nm）：

λ1(pH1.2)…………………………………503～506

λ2(pH3.0)…………………………………430～435

λ3(pH6.5)…………………………………430～435

λ4(pH8.0)…………………………………557～560

3.3 质量吸收系数（L/cm•g）：

a1(λ1,pH1.2干样)…………………………………110～123

a2(λ2,pH3.0干样)…………………………………60～68

a3(λ3,pH6.5干样)…………………………………62～72

a4(λ4,pH8.0干样)…………………………………120～135

3.4 杂质最高含量：

%

名 称 指 示 剂

碱溶解试验

干燥失重

灼烧残渣（以硫酸盐计） 合格

1.0

0.2

4试验方法

本试验方法中标准滴定溶液、制剂及制品和pH缓冲溶液，除另有规定外，均按GB/T 601、GB/T 603、GB/T 604之规定制备，实验用水应符合GB/T 6682中三级水规格。

4.1 pH变色域测定

按GB/T 604的规定测定。

4.2 最大吸收波长测定

按GB/T 9721之规定测定，其中：

4.2.1 测定条件

吸收池厚度：1cm；

参比溶液：水。

扫描范围：400～700nm。

4.2.2 测定方法

称取0.100g预先于105±2℃干燥至恒重的试样，精确至0.0001g。加14.20mL氢氧化钠标准溶液[c(NaOH)=0.02mol/L]，水浴加热溶解，冷却后，置于500mL容量瓶中，并用无二氧化碳的水稀释至刻度，摇匀。

量取2.00mL、3.00mL、3.00mL、2.00mL上述试样溶液，各置于100mL容量瓶中，分别用pH1.2，pH3.0，pH6.5，pH8.0缓冲溶液稀释至刻度，摇匀。按GB/T 9721中7.2.1条之规定，测量出最大吸收波长及相对应的吸光度A（A用于质量吸收系数的计算）。

4.3 质量吸收系数

质量吸收系数按式（1）计算：

a = A ……………………………………(1)

b•c

式中：a----质量吸收系数,L/cm•g

A----4.2.2条中所测得的吸光度；

b----吸收池厚度，cm

c----试样溶液的浓度，g/L

4.4 杂质测定

试样称量须精确至0.01g。

4.4.1 碱溶解试验

称取0.1g样品，加0.3mL氢氧化钠标准溶液[c(NaOH)=1mol/L]溶解，稀释至250mL，应全溶清亮，无机械杂质。

4.4.2干燥失重

称取1g样品，精确至0.0001g，置于已在105±2℃干燥至恒重的称量瓶中，于105±2℃的电烘箱中干燥至恒重。

干燥失重按式（2）计算：

X = m1－m2 ×100 …………………………(2)

m1

式中：X----干燥失重，%；

m1----恒重前样品的质量，g；

m2----恒重后样品的质量，g；

4.4.3灼烧残渣

称取0.5g样品，按GB/T 9741中4.1条之规定测定。结果按GB/T 9741中第5章 之规定计算。

5检验规则

按GB/T 619的规定进行采样及验收。

6 包装及标志

按HG 3—119的规定，其中：

内包装形式：Gz-3；

外包装形式：W-1；

包装单位：第2类。

附加说明：

本标准由中华人民共和国化学工业部提出。

本标准由北京化学试剂总厂归口。

本标准由北京化工厂负责起草。

本标准主要起草人郝玉林、关瑞宝、强京林、刘冬霓。

本标准自实施之日起，原化学工业部部标准HG 3—957—76《化学试剂 苯酚红》作废。