外泌体提取策略
外泌体即细胞外囊泡（简称EVs）是所有细胞主动分泌的纳米级囊泡,活细胞释放不同类型的细胞外囊泡进入细胞外环境进行细胞间交流,细胞外囊泡越来越多地被认为是有希望的液体活检生物学标志物｡根据相似囊泡的直径大小可将细胞外囊泡分为三类,直径在50-150nm的外泌体,直径在100-1000nm的微囊泡､外粒体和微颗粒,直径在-100-5000nm的凋亡小体｡目前主要认为,外泌体产生的过程是细胞膜内陷形成内体,再形成多泡体,多泡体与质膜融合导致其管腔内囊泡释放到细胞外,产生一种称为外泌体的EV亚型｡
2 外泌体的提取纯化方法
2.1 基于密度的分离方法
2.1.1 超速离心法
超速离心法是最常用的外泌体提取方法,首先,施加较低速度的离心力300g以从细胞培养液中去除细胞然后,对上清液施加较大的离心力(10000-20000g),去除大的细胞碎片和破碎的细胞器最后,再次进行高速(100000-150000g)离心从 上清液 中收集外泌体,所有离心在4℃下进行｡超速离心法获得的外泌体不被分离试剂污染,且分离数量多,处理样本小｡尽管超速离心法是提取外泌体最广泛的“金标准”,但仍然有很多缺点,如所需的超高速离心仪器比较昂贵､样品量大､耗时长､电镜观察外泌体时仍存在蛋白质污染｡
2.1.2 蔗糖密度梯度离心法
目前已发现,外泌体在蔗糖梯度为1.15-1.19g/mL密度中漂浮,所以根据这个特性,可以将样品与蔗糖梯度溶液一起超速离心,外泌体沉降到不同的密度区域就可以将其区分出来｡蔗糖密度梯度离心法需要预先配好连续梯度浓度的蔗糖溶液,将蔗糖溶液铺于离心管底部,再将样本放于上部,4℃下100000g超速离心｡蔗糖密度梯度离心法获得的外泌体纯度较高,但是前期准备复杂,耗时长,又不能完全将外泌体与蛋白质分离开｡2013年10月ISEV会议一些研究人员表示,通过蔗糖密度梯度离心法分离囊泡时,细胞囊泡的生物功能丧失｡
2.2 沉淀法
2.2.1 聚乙二醇 (PEG)
PEG 是一种水溶性非离子化合物,具有极强的亲水性,可以与疏水的脂质双分子层结合,从而改变外泌体的溶解度而使外泌体沉淀｡RIDER等研究发现,PEG水平会影响外泌体的产率,且从外泌体中获得的总蛋白和RNA在数量和质量上足以用于蛋白质组学和测序分析｡沉淀法操作简单,不需要特殊设备,更经济,外泌体产量高,但是会沉淀一些非外泌体的疏水性物质而导致外泌体纯度不够｡
2.2.2 试剂盒法
最近已经开发出基于聚合物共沉淀的试剂盒,如ExoQuick､TEI等,可用于提取多种体液中的外泌体｡聚合物沉淀剂ExoQuick与样品4℃共孵育30min,然后室温1500g离心30min,即可获得外泌体沉淀｡与超速离心法比较,试剂盒法更简便､耗时短,且能获得更高的外泌体产量｡试剂盒法获得外泌体沉淀含有的杂质较多,不同来源的样本需要使用不同的试剂盒来进行提取,且试剂盒价格较贵｡
2.3 基于大小的分离方法
2.3.1 SEC SEC
主要根据外泌体的大小对外泌体进行分离和纯化｡样品中大分子物质不能进入凝胶孔而被流动相快速洗脱出来,尺寸小于孔径的物质可进入多孔材料,需要较长时间被洗脱出来,即可通过不同的洗脱时间分离外泌体｡BING等证明了琼脂糖凝胶可以从无血小板上清液中纯化出外泌体,通过这种方法,外泌体很容易从蛋白质和高密度脂蛋白中分离出来｡HONG等通过改编和使用mini-SEC方法能够有效分离出外泌体,与漫长而复杂的超速离心法不同,它可在30min内完成外泌体分离｡通过SEC分离的外泌体纯度较高,分离出结构上完整且功能活跃的囊泡是基于微型SEC分离的重要优势,但数量较少,而且需要特殊设备,故应用不广泛｡
2.3.2超滤法
超滤法是根据外泌体的大小使用相应孔径的滤膜,将样品中小分子物质过滤到膜的另一侧,而将大分子物质滞留在膜上来达到分离的目的｡超虑法简单､省时､成本低｡LIU等改良了简单的超滤法,通过将不同孔径的膜(200､100､80､50､30nm)串联在一起,实现了不同大小外泌体的快速分离,且捕获效率明显高于超速离心法｡然而,过滤器很容易被囊泡和其他大分子物质堵塞,这种情况很容易导致膜压力过大而破碎｡
2.4 基于表面成分亲和力的分离法
2.4.1 蛋白质
外泌体表面含有丰富的蛋白质,所以基于其表面成分的亲和力特别适合于分离外泌体｡CD63是外泌体中发现的最丰富的蛋白质之一,因此,常用抗CD63免疫吸附外泌体｡ZHAO等通过使用抗CD63包裹的磁珠与血液样品不断混合,将外泌体捕获到磁珠上后,加 缓冲液 冲洗5min,然后引入3种不同荧光染料标记的抗体[抗CD24､抗上皮细胞黏附分子(抗EpCAM)､抗糖类抗原-125(抗CA-125)],通过观察不同荧光强度可以量化卵巢癌中不同肿瘤标志物的表达水平｡
2.4.2 膜磷脂
虽然大部分基于表面成分的亲和方法是基于外泌体表面的蛋白质,但是脂质双层也是一种很好的检测目标｡XU等利用外泌体膜上表达的磷脂酰 丝氨酸 (PS)可以被PS结合受体Tim4很好地结合,用Tim4固定化的磁珠与样品反应进行外泌体捕获,并且观察到洗脱的外泌体保持着完整的形态,与商业外泌体提取试剂盒相比,表现出更高的捕获率｡CHEN等利用外泌体将带负电荷的PS暴露在膜上的特点,使用带正电荷基团的离子交换树脂的磁珠与血浆样品反应,血浆中的外泌体就能与磁珠结合,通过这种方法分离的外泌体具有比超速离心法更高的回收率和更少的杂质蛋白｡
2.5 ACE分离法
ACE微阵列产生的介电泳(DEP)分离力是通过施加交流电场产生的,纳米级的粒子和其他纳米级实体物质被吸引到圆形微电极边缘周围的DEP高场区域,细胞和大的实体物质被吸引到DEP低场区域｡ IBS EN等的ACE装置需要30-50μL血浆样品就能够在15min内将外泌体浓缩到微电极周围的高场区域｡ACE设备流程明显快于目前使用的方法,这个装置简化了外泌体提取和回收过程的能力,明显减少了加工步骤和消耗时间｡CHEN等构建了具有交叉电极的DEP芯片,能在30min内从血浆样品中分离出外泌体｡经过测试证明,DEP芯片具有高捕获率和高回收率,需要的时间更短,并且不需要笨重和贵重的仪器｡
2.6 微流控芯片法
微流控芯片法是新开发出来的用于快速高效分离样品中外泌体的方法｡WOO等使用2个纳米过滤器(Exodisc)集成的实验盘在30min内实现了20-600nm外泌体的全自动富集｡使用纳米粒子跟踪分析定量检测证实了细胞培养上清液中外泌体的回收率大于95%｡与超速离心法相比,Exodisc提供了高出100倍的mRNA水平,更省时,所需样本量更少｡FANG等开发了一种微流体芯片,将包裹了抗CD63的磁珠与血浆样品通入芯片,在第1个腔室中捕获到外泌体,通入一抗与磁珠-外泌体混合物结合,再通入荧光标记的二抗形成磁珠-外泌体-一抗-二抗混合物聚集在第2个腔室｡微流控芯片法操作简单,捕获率高,特别适合于生物学研究｡外泌体作为癌症诊断的有前景的生物学标志物,其在癌症的液体 活检 中受到关注｡外泌体的生物学价值和临床应用价值凸显了开发有效提取和分离外泌体技术的重要性和必要性｡相信随着技术的不断进步和创新,外泌体提取将变得更加简便经济,纯度越来越高,完整性越来越好｡
提取后往往需要进一步检测，确定提取的是不是外泌体。有三种方法：1. 扫描电镜观察；2. NTA仪器粒径检测；3. WB检测。如图所示，在外泌体上往往存在许多标志物，这时候就可以选择相应的抗体进行WB检测。根据22 篇外泌体相关文献的统计，排在前4 位的检测指标为 CD63（13/22）、Tsg101(8/22)、CD9 和CD81并列第三位（6/22）；接着检测较多的4 个指标为Alix （4/22）、HSP70(3/22)、flotillin (3/22)和Syntenin (2/22)；此外还有一些指标仅在1 篇文献中出现过，例如HSP90、LAMP2B、LMP1、ADAM10、nicastrin、AChE、AQP2、RPL5、a-1AT。针对外泌体的定性检测至少选择两个指标就能满足文章发表需要了，比如检测CD63 和Tsg101。
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一分钟了解聚异丁烯
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聚异丁烯
由异丁烯经正离子聚合制得的聚合物
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聚异丁烯（Polyisobutylene，PIB）是由异丁烯经正离子聚合制得的聚合物，其分子量可从数百至数百万。它是一种典型的饱和线型聚合物。分子链主体不含双键，无长支链存在，其结构单元为-（CH2-C(CH3)2)-，其中无不对称碳原子，并且结构单元以首一尾有规序列连接。
中文名
聚异丁烯
外文名
Polyisobutylene
简称
PIB
结构单元
-（CH2-C(CH3)2)-
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结构式与结构特征
特性
聚异丁烯的加工与应用
发展简史与现状
苏联Бутлеров首次发现了异丁烯在BF3 作用下的聚合, 并经详细研究确定了其结构。自此，美国、德国、英国、日本等先后开展了对聚异丁烯的研究。德国BASF公司于1940年首次建立了6000t/a聚异丁烯生产装置，美国Exxon公司1942年建立了第一个工业规模丁基橡胶厂，并于1942年生产出聚异丁烯产品。目前，美国、法国、前苏联、德国都有商品聚异丁烯生产，主要采用德国BASF公司和美国Seandard oil公司的连续聚合技术。美国Exxon公司低分子量聚异丁烯的生产工艺与此相同，都是把高纯度的异丁烯和异丁烷或己烷混合，用AlCl3 或BF3 为催化剂在-10℃~ -20℃下聚合。而高分子量聚异丁烯的制造工艺却不相同，Exxon公司采用的是AlCl3 为引发剂的淤浆聚合工艺，该工艺中，聚合淤浆的稳定是影响PIB连续运转的关键技术问题。Exxon公司将接枝29%苯乙烯的聚异丁烯共聚物加入聚合系统，有效地克服了聚合物淤浆的自黏性。美国Cosden公司利用石油炼油厂的混合C4馏分合成一种聚合物，一般文中称之为聚丁烯。其实这个名称是不恰当的，事实上这种聚合物是由大量的异丁烯和少量的丁烯共聚所得的共聚物，其物理化学性能与PIB十分相似，因此，也应称之为聚异丁烯。美国Cosden公司合成低聚异丁烯采用AlCl3 引发体系, 原料中的1-丁烯是个温和的抑制剂，它能使低聚异丁烯收率降低，但对平均分子量影响不大，而2-丁烯既是抑制剂，又是链转移剂, 能使收率和平均分子量都降低，因此，使用混合C4合成低聚异丁烯反应过程是异丁烯在抑制剂和链转移剂存在下的聚合过程。
我国的聚异丁烯开发较晚，研究开发始于20世纪80年代，最初是作为内燃机油清净分散剂的钡盐原料而由兰化炼油厂和锦州炼油厂开展研究生产的。其生产原料是C4馏分，并以AlCl3 倍半铝为催化剂，所得产品的分子量为1000~ 3000，80年代初兰化炼油厂和锦州炼油厂分别建立了500t/a和300t/a生产装置。锦州炼油厂还生产分子量为40000的润滑油黏度指数改进剂, 商品名为T603。大庆石化总厂也开展了聚异丁烯的研究，生产的聚异丁烯分子量为20000~40000。所用原料为混合C4，采用甲苯-AlCl3体系催化剂。上述3个厂家在1977年所生产的聚异丁烯均为淡黄色，无法用于白色制品中，且分子量20000以上的产品中尚含有稀释油，并非单一聚异丁烯产品，因此，其生产开发受到限制。1988年，吉化研究院为吉化油脂厂出口白油中所添加的黏度指数改进剂（日本进口）国产化，开展了无色高分子量聚异丁烯研究，并完成了小试。之后，又研制出无色低分子量聚异丁烯，并建立100t/a低聚异丁烯中试装置，来满足大连鼠药厂和日本三井消毒株式会社合作生产捕鼠胶的需求。该项目1995年通过吉林省技术鉴定，1995年吉化研究院建成了我国第一套200t/a无色聚异丁烯生产装置，产品主要技术指标达到了国际先进水平，可完全替代进口产品，填补了国内空白。分子量范围在30000~100000之间。
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百科名片
发展简史与现状
结构式与结构特征
特性
聚异丁烯的加工与应用
氧化玉米淀粉胶液100
羧甲基纤维素1
钛白粉4
立德粉10
滑石粉13
轻质碳酸钙30
磷酸三丁酯1
六偏磷酸钠0.8
涂料色浆适量
水适量
白垩土-淀粉内墙涂料 成分用量/kg
胶水:
白垩土200
40%甲醛溶液19
山芋淀粉37.5
4%NaOH溶液125
水余量
内墙涂料:
胶水535
立德粉54
20%石灰水(细度40目以上)123
磷酸三丁酯0.3
群青0.5-1
水余量
工艺、性能 胶水及涂料配方各以1t计。
纤维素室内墙面涂料 成分用量/份
胶水添加剂配方:
尿素100
邻苯二甲酸二丁酯200
甲醛100
乙二醇适量
胶水配方:
水100000
甲基水纤维素1000
添加剂1000
水5000
4%聚乙二醇100
涂料配方:
胶水25000
磷酸三厂酯微量
漂白粉50
灰钙粉33000
滑石粉5000
1、我这样的情况适合不适合打干扰素，500万的那种，一个星期一针，持续
4个月?
不适合，你是携带者，没有抗病毒的指标，虽然病毒量高，但体内没有免疫反应，用抗病毒药如果没有免疫反应的参与，效果会非常差。
2、如果打了4个月，具体是哪一方面会好转？
见1题回答。没办法预计。
3、干扰素的副作用大不大？我是否在打针期间注意些什么？要不要吃些
什么药来调控？
副作用很多，如发热、脱发等，严重的会发生肾炎、血糖升高等，所以你现在用药是得不偿失。打针期间头一个月最好住院观察。有药物可以调控这些症状，但你觉得有意义么，不该用药而用药。
4、转阴的几率有多少？
用干扰素，携带者转阴几率极低。慢性肝炎每年有30%的几率。
5、停针后有什么副作用或者后遗症？
停药后，所有的副作用会消失，但后遗症可能不会，比如脱发。
乙型肝炎患者就需要接受治疗，通常是干扰素和口服抗病毒药物。
乙肝大三阳，肝功能，B超正常的大三阳，病毒可以是6次方，也可以是8次方，年龄低于40岁，定期检查就行。
乙肝小三阳，肝功能，B超，肝弹正常，病毒低于四次方，年龄低于40岁定期检查就行。
大于40岁，乙肝小三阳，病毒阴性，定期检查就行.
下面是需要治疗的情况:
乙肝大三阳，肝功能，B超出现不正常，肝功能谷丙转氨酶，谷草转氨酶连续三个月大于参考值两倍以上，需要吃药治疗。
乙肝小三阳，肝功能，B超不正常，肝弹数字显示有肝硬化纤维化，病毒大于四次方，出现其中一个不正常就需要考虑吃药治疗。
年龄大于40岁，还能够检测出病毒的患者，也建议吃药治疗。
肝脏纤维化，肝硬化患者。B超出现回声不均匀，回声粗，回声强，弥漫性病变，脾大，肝脏结节，门静脉宽，肝功能正常的情况下，肝弹数字高，这些都是肝纤维化，肝硬化的表现。出现肝脏纤维化，肝硬化，只要病毒阳性，能够检测出病毒就需要治疗。
吃药的选择，目前抗病毒药物一共有，拉米夫定，替比夫定，恩替卡韦，阿德福韦酯，替诺福韦tdf，替诺福韦艾拉酚胺taf（替诺二代）。目前最新的《乙肝防治指南》提出，第一次抗病毒应该选择恩替卡韦，替诺福韦，替诺福韦艾拉酚胺（替诺二代taf）等三个一线药物。
如果你B超正常，可以选择三个一线药物中的任何一个。如果你存在肾功能缺陷，恩替卡韦和替诺福韦艾拉酚胺taf是你很好的选择。
如果你B超不正常，出现肝纤维化，肝硬化，或者你有考虑最近怀孕，替诺福韦tdf和替诺福韦艾拉酚胺taf才是你最好的选择。
目前治疗乙肝最好的抗病毒药物是替诺福韦艾拉酚胺taf，印度有吉利德授权mylan，natco，hehero等三个厂家生产，价格都是1900卢比，折合人民币200元一个月，一天花费7元。
如果你有疑问可以留言或者关注后私信我，我会尽力解答的。我是chenxipy，希望能够帮到你《wx》！
这个问题总是引起一些乙肝病人的争议，他们说为什么非要等我的病严重了才给治疗呢？医生是怎么想的?这不是矛盾吗？
医生不会因为病人经济条件好坏决定病人是否需要治疗。有的乙肝病人医生建议治疗，但是他们怕花钱，怕有副作用，怕不能停药等等而拒绝。有的乙肝病人经济条件非常好，总觉得自己吃药总是好的，总是主动找医生要求治疗。——有的太在乎自己的病，有的太不在乎自己的病，两极分化，各种各样的情况都有。最好的办法就是听医生的！
抗病毒治疗的适应症主要依据血清HBVDNA水平,血清ALT和肝脏疾病严重程度来决定，同时结合年龄,家族史和伴随疾病等因素，综合评估患者疾病进展风险后决定是否需要启动抗病毒治疗。动态评估比单次的检测更有临床意义。对HBeAg阳性患者，发现ALT水平升高后，建议观察3—6个月，如未发生自发性HBeAg血清学转换，才建议考虑抗病毒治疗。
在《2016年中国慢性乙型肝炎防治指南》中推荐接受抗病毒治疗的人群需同时满足以下条件:
(1)HBVDNA水平:HBeAg阳性患者，HBVDNA 20000IU/ml；HBeAg阴性患者，HBVDNA 2000IU/ml。
(2)ALT水平:一般要求ALT持续升高 2 ULN（正常上限）超过3个月；如用干扰素治疗，一般情况下ALT应 10 ULN（正常上限），血清胆红素应 2 ULN。
对持续HBVDNA阳性，达不到上述治疗标准，但有以下情形之一者疾病进展风险较大，可考虑给予抗病毒治疗:
(1)存在明显的肝脏炎症(2级以上)或纤维化，特别是纤维化2级以上。
(2)ALT持续处于1倍正常上限至2倍正常上限之间，特别是年龄大于40岁者，建议行肝穿或无创性检查明确肝纤维化情况后给予抗病毒治疗。
(3)ALT持续正常(每三个月检查一次，持续12个月)，年龄大于30岁，伴有肝硬化或肝癌家族史，建议行肝穿或无创性检查明确肝纤维化情况后给予抗病毒治疗。
(4)存在肝硬化的客观依据时，无论ALT和HBeAg情况如何，均建议积极抗病毒治疗。
特别需要提醒的是在开始治疗前应排除合并其他病原体感染或药物，酒精等其他因素所致的ALT增高。也应排除应用降酶药物后ALT暂时性正常。
——说起来简单，其实很复杂。是否需要治疗需要做很多种检查，需要动态评估，把这些交给专业医生，这是医生该做的事。
当然不吃药更好！——其实也有许多乙肝是不需要治疗的。对于肝脏炎症病变轻微,难以取得持续应答的患者(如ALT正常,HBeAg阳性的免疫耐受期)，特别是当这些患者小于30岁时，不宜开始抗病毒治疗。
有很多乙肝病毒感染者长期处于慢性非活动性乙型肝炎状态，肝功能正常，HBVDNA低于检测下限，没有肝硬化迹象。他们坚持定期复查，生活中也特别注意对肝脏的保护，长期保持这种理想的状态，与正常人一样工作生活。他们不需要吃药，也有正常人一样的寿命。
其实每一个乙肝病毒感染者通过努力都能得到这样的结果，这需要懂得一些乙肝防治知识，懂得如何让自己带“ ”号的肝脏不受额外的打击，不发生演变，不打破平衡，这样可以安安稳稳度过一生，这样的结果最好！
发生演变，或者破坏平衡也是有原因的，老百姓都知道生气，着急，劳累，熬夜，营养不良，肥胖，酗酒，生病等等都会引起机体抵抗力下降，就容易打破乙肝病毒与免疫系统保持的平衡，进而引起发病。所以乙肝病毒感染者要想不服药就要远离那些危险因素，保护好自己的肝脏不再受额外伤害。
根据 《慢性乙型肝炎防治指南( 2015 年更新版)》（中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病学分会） ，乙肝起始治疗的适应症如下：
起始治疗主要根据血清 HBV DNA 水平、血清ALT 和肝脏疾病严重程度 来决定，同时结合患者年龄、家族史和伴随疾病等因素，综合评估患者疾病进展风险后决定是否启动抗病毒治疗。动态的评估比单次的检测更具有临床意义。
对HBeAg 阳性患者，发现ALT 水平升高后，可以考虑观察3-6 个月，如未发生自发性HBeAg 血清学转换(即HBeAg转阴，出现抗-HBe)，且ALT 持续升高，再考虑治疗。
推荐接受抗病毒治疗的人群需 同时 满足以下条件:
( 1) HBV-DNA 水平:
HBeAg 阳性患者，HBV DNA 20 000 IU/ml( 相当于10*5 拷贝/ml)
HBeAg 阴性患者，HBV DNA 2000IU/ml( 相当于10*4 拷贝/ml) ；
( 2) ALT 水平: 一般要求ALT 持续升高 2 ULN如用干扰素治疗，一般情况下ALT 应 10 ULN，血清总胆红素应 2 ULN
(注: 10*5即100000；10*4即10000；ULN即正常值的上限:如 2 ULN就是高于2倍正常值的上限)
对持续HBV-DNA 阳性、达不到上述治疗标准、但有以下情形之一者，疾病进展风险较大，可考虑治疗:
( 1) 存在明显的肝脏炎症( 2 级以上) 或纤维化，特别是肝纤维化2 级以上。
( 2) ALT 持续处于1 ULN 至2 ULN 之间，特别是年龄 30岁者，建议行肝组织活检或无创性检查，若明显肝脏炎症或纤维化则给予治疗。
( 3) ALT 持续正常( 每3 个月检查一次) ，年龄 30 岁，伴有肝硬化或HCC(肝细胞性肝癌) 家族史，建议行肝组织活检或无创性检查，若明显肝脏炎症或纤维化则给予治疗。
( 4) 存在肝硬化的客观依据时，无论ALT 和HBeAg 情况，均建议积极治疗。
需要特别提醒的是，在开始治疗前应排除合并其他病原体感染或药物、酒精和免疫等因素所致的ALT 升高，尚需注意应用降酶药物后ALT 暂时性正常。
抗病毒药物有哪些？
干扰素:
普通干扰素（IFNα）、聚乙二醇干扰素（PegIFNα）
核苷（酸）类药物（NAs） ：
恩替卡韦（ETV）、替诺福韦酯（TDF）、替比夫定（LdT）、阿德福韦酯（ADV）、拉米夫定（LAM）
干扰素治疗的不良反应与禁忌
1、流感样症候群：表现为发热、头痛、肌痛和乏力等，可在注射的同时服用解热镇痛药。
2、一过性外周血细胞减少：如中性粒细胞绝对计数 0. 75 10*9 /L 和( 或) 血小板 50 10*9 /L，应降低IFNα 剂量中性粒细胞绝对计数 0.5 10*9 /L 和( 或) 血小板 25 10*9 /L，则应暂停使用。
3、精神异常：可表现为抑郁、妄想和重度焦虑等精神病症状。对症状严重者，应及时停用并进行精神心理诊治。
4、自身免疫现象：一些患者可出现自身抗体，少部分患者出现甲状腺疾病、糖尿病、血小板减少、银屑病、白斑、类风湿关节炎和系统性红斑狼疮样综合征等， 严重者应停药。
5、其他不良反应：包括肾脏损害、心血管并发症、视网膜病变、听力下降和间质性肺炎等，应停药。
6、干扰素治疗的禁忌证包括: 妊娠或短期内有妊娠计划、精神病史( 具有精神分裂症或严重抑郁症等病史) 、未能控制的癫痫、失代偿期肝硬化、未控制的自身免疫性疾病、伴有严重感染，视网膜疾病，心力衰竭和慢性阻塞性肺病等基础疾病。
其相对禁忌证包括: 甲状腺疾病，既往抑郁症史，未有效控制的糖尿病和高血压病，治疗前中性粒细胞计数 1. 5 10*9 /L 和( 或) 血小板计数 90 10*9 /L。
NAs不良反应及禁忌
耐药是NAs 长期治疗CHB 所面临的主要问题之一。耐药可引发病毒学突破、生化学突破、病毒学反弹及肝炎发作，少数患者可出现肝功能失代偿、急性肝功能衰竭，甚至死亡。
少见不良反应：NAs 总体安全性和耐受性良好，但在临床应用中确有少见严重不良反应的发生，如肾功能不全( 主要见于ADV 治疗) 、低磷性骨病( 主要见于ADV 和TDF 治疗) 、肌炎( 主要见于LdT 治疗) 、横纹肌溶解( 主要见于LdT) 、乳酸酸中毒( 可见于LAM、ETV 和LdT)等，应引起关注。对治疗中出现血肌酐、CK、乳酸脱氢酶明显升高或血磷下降，并伴相关临床表现者如全身情况变差、明显肌痛、肌无力、骨痛等症状的患者，应密切观察，一旦确诊为药物相关的肾损害、低磷血症、肌炎、横纹肌溶解或乳酸酸中毒等，应及时停 药或改用其他药物，并给予积极的相应治疗干预。
抗病毒药物的有效性是怎样呢？
“焦氏肝医”传承百年中医药之瑰宝，结合现代医疗科学技术，在病毒性肝炎及肝硬化的治疗上能够显著降低HBV-DNA定量水平，且转阴率高，促进肝功能好转；能够提高血清白蛋白含量，明显减少腹水量，促使脾肿大复常。解决了现有治疗乙肝药物治疗效果不理想的问题。
要看你处于哪个阶段，我来帮你分析一下吧
如果你是大三阳的话 说明乙肝病毒在活跃复制期 这个时候需要吃药控制的 并且要监测肝功
如果你是小三阳的话 要再去查查病毒载量和肝功能，如果病毒载量在正常范围而且肝功能也正常的话说明你只是病毒携带者，病毒处于睡眠状态 就不需要吃药，但是要定期复查病毒量和肝功能，3-6个月一次。
如果病毒载量超出正常范围或者肝功能不正常的话 就要开始吃药了，抗病毒的药及保肝的药。
再给点建议，不要劳累，不要喝酒，合理作息，规律饮食，均衡营养，祝你身体 健康 。
乙肝吃药其实很笼统。
一般出现肝功能异常了，需要保肝降低肝酶治疗。
二是病毒量升高了，需要抗病毒治疗。
所以，主要看看你的肝功能，乙肝DNA量，肝脏超声和甲胎蛋白这几个比较重要的指标是否异常。
肝功能不正常，病毒量升高，甲胎蛋白也高，还有身体各方面有些反应，有些人身体没反应！具体到大专科医院去查听医生的！药是吃上就停不下了！如果能住院调理好就不要吃药！！！
5次方达到抗病毒治疗量
肝病是免疫系统疾病，中药调理治疗是最佳选择，西药治疗是压制的，停药反弹，免疫系统弱才被传染的，如果免疫系统强，是传染不了，
