用HPLC法测小檗果中盐酸小檗碱的含量,用的是自动仪器,要怎样操作?我要做的实验流程有哪些?谢谢了,希
1.溶解、过滤、烘干——为得到足够的盐酸小檗碱作为对照品;
2.取1克,精密称定,溶解于50ml溶剂中——得到20mg/ml的盐酸小檗碱对照品溶液;
3.分别配成5、10、20、30、40微克/毫升——为了绘制标准曲线配制的5个浓度,最终的小檗果制成的供试品溶液应该在5-40微克/毫升范围内,最可能在20微克/毫升附近;
4.在346纳米波长处连续测定——346nm是此方法盐酸小檗碱的含量测定波长,很可能是盐酸小檗碱在紫外光区的最大吸收波长;绘制标准曲线和包括后续的含量测定必须连续测定,避免系统漂移;
5.溶剂B的浓度比例为45——我也没明白,是不是上下文有缺失呢?
6.小檗果样品在相同条件下测定——小檗果样品即供试品溶液,制备过程没写,应该是配出来了,当然应该在绘制标准曲线时的条件下(346nm)测定了,最好是连续测定,相隔时间不要太久。
7.盐酸甲醇1:100要一次配够,最终的供试品溶液应该是溶解在盐酸甲醇1:100中的,空白溶液也是盐酸甲醇1:100。
老师的目的是让你练习紫外-可见分光光度法,使用标准曲线进行含量测定。如果还不懂,可借阅《中国药品检验标准操作规范》2010年版和《中国药典》2010年版中的紫外-可见分光光度法。
看错了,你标题里提到HPLC法,那溶剂B的浓度比例为45应该是使用双通道,流动相通道A占55%,通道B占45%。由于液相方法应该做方法学验证其回收率和线性,你没有做,所以采用标准曲线法。
如果还不懂请留言
小檗碱广泛存在于小檗科等4科10属的许多植物中,毛莨科、小檗科、防已科与芸香科的一些植物中都有小檗碱。如果只用小檗碱对照品,缺乏专属性,用黄连对照药材为对照品可以增加方法的专属性。可以与同科同属类似植物相区别,避免采用其他含有小檗碱成分药材替代黄连而不能鉴别出来的情况发生。 黄连根茎含多种异喹啉类生物碱,以小檗碱含量最高,为5~8%,尚含黄连碱、甲基黄连碱、巴马亭、药根碱、表小檗碱及木兰花碱等;酸性成分有阿魏酸,氯原酸等。须根含小檗碱可达5%;黄连叶含小檗碱1.4%~2.9%。
本品含盐酸小檗碱(C20H18ClNO4.2H2O)应为标示量的93.0%~107.0 %。
【性状】 本品为黄色片或糖衣片。
【鉴别】 取本品的细粉适量(约相当于盐酸小檗碱0.1g),加水10ml,缓缓加热
使盐酸小檗碱溶解,滤过,取滤液,照盐酸小檗碱项下的鉴别试验,显相同的反应。
【检查】 溶出度 取本品,照溶出度测定法(附录Ⅹ C第一法),以水1000ml为
溶剂,转速为每分钟120 转,依法操作,经45分钟时,取溶液5ml,滤过,取续滤液2ml
置25ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,照分光光度法(附录Ⅳ A),在263nm 的波长处
测定吸收度,按C20H18ClNO4.2H2O的吸收系数(E1% 1cm)为724 计算出每片的溶出量。
限度为标示量的70%,应符合规定。
其他 应符合片剂项下有关的各项规定(附录Ⅰ A)。
【含量测定】 取本品20片,如为糖衣片,注意除去糖衣,精密称定,研细,精密
称取适量(约相当于盐酸小檗碱0.3g),置烧杯中,加沸水150ml ,搅拌使盐酸小檗碱
溶解,放冷,移入25ml量瓶中,照盐酸小檗碱项下的方法,自“精密加重铬酸钾滴定液
(0.016 67mol/L)50ml,加水至刻度”起,依法测定。每1ml 重铬酸钾滴定液(0.01667
mol/L) 相当于13.60mg 的C20H18ClNO4.2H2O。
【类别】 同盐酸小檗碱。
【规格】 (1) 0.025g (2) 0.05g (3) 0.1g
【贮藏】 遮光,密封保存。
【性状】本品为淡黄色糖衣片,除去糖衣后显黄色。
【作用类别】本品为止泻药类非处方药药品。
【注意事项】
1.对本品过敏者、溶血性贫血患者禁用。
遗传6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏的儿童应禁用,因本品可引起溶血性贫血以致黄疸。
2.妊娠期头三个月慎用。
3.如服用过量过出现严重不良反应,请立即就医。
4.当药品性状发生改变时禁止使用。
5.儿童必须在成人监护下使用。
6.请将此药品放在儿童不能接触的地方。
【药物相互作用】
1. 含鞣质的中药与黄连素合用后,由于鞣质是生物碱沉淀剂,二者结合,生成难溶性鞣酸盐沉淀,降低疗效。
2. 如正在服用其他药品,使用本品前请咨询医师或药师。
【不良反应】口服不良反应较少,偶有恶心、呕吐、皮疹和药热,停药后消失。
【作用类别】本品为止泻药类非处方药药品。
【适应症】用于肠道感染,如胃肠炎。
【副作用】黄连素最常见的副作用是便秘,大量应用后偶有恶心、呕吐、皮疹及发热,停药后即可消失。 黄连素的主要副作用是味苦。剂量过大时对胃有一定刺激,可使胃酸过多,即中医所说“苦败胃”。 黄连素对心率的影响与剂量及给药方式有关,每日口服2克以下,对心率无影响如静脉点滴,可抑制心脏传导系统,引起心率减慢。所以,临床上为了避免副作用的发生,对于溃疡病者,可饭后服药,或将每次剂量适当减少至0.3克一般不静脉给药,口服剂量不要随意加大,最好不要超过2克。黄连素的降血糖作用明显,且呈量效关系。但专家指出,服用黄连素降血糖副作用较大,有一定风险,不宜长期大量服用。其主要副作用可能就是横纹肌溶解症及乳酸中毒症。黄连素最常见的副作用是便秘,大量应用后偶有恶心、呕吐、皮疹及发热,停药后即可消失。 周围神经炎,黄连素会影响肠道消化酶的活性,对肠道益生菌的活性有抑制作用,破坏人体对维生素及脂肪酸的吸收。
【用法用量】
口服,成人:一次4-12片,一日3次;儿童用量见下表:
年龄(岁) 体重(公斤) 一次用量(片) 次数
1-3 10-15 2-4
4-6 16-21 4 一日3次
7-9 22-27 4-6
10-12 28-32 6-8
【禁忌】溶血性贫血患者及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏患者禁用。
一般处理的都是沾在玻璃仪器上
1、一般性药品都是用水洗
2、油脂类,可以用洗涤剂,或者纯碱、氢氧化钠等
3、金属氧化物,金属氢氧化物一般用盐酸
4、活泼金属用盐酸
5、不活泼金属用硝酸
步骤是:先用水洗,再用洗液洗,再用自来水洗,再用蒸馏水洗
2.盐酸黄连素在冷水中不溶,在沸水中易溶
3.不再有黄色沉淀析出
4.加热除去沉淀表面杂质
5.若在普通环境下 冷却过程会有水蒸气凝结的水附着 所以重要的不是冷却而是干燥