叠氮化钠与苯酚反应吗

1.

叠氮化合物是一类含有三个氮相连结构的化合物,一般用RN3表示。

2.

叠氮化合物是电子传递系统的抑制剂,能与细胞色素形成配位化合物,阻止细胞色素氧化酶氧化型a3组分的还原作用。

3.

叠氮钠是一种用作实验防腐剂的抗微生物试剂。氨氮是指游离氨(或称非离子氨,NH3)或离子氨(NH4+)形态存在的氨。pH较高

动植物组织mRNA提取：

一、材料

水稻叶片或小鼠肝组织.

二、设备

研钵,冷冻台式高速离心机,低温冰箱,冷冻真空干燥器,紫外检测仪,电泳仪,电泳槽.

三、试剂

1、无RNA酶灭菌水：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃ 2小时）装蒸馏水,然后加入0.01%的DEPC（体积/体积）,处理过夜后高压灭菌.

2、75%乙醇：用DEPC处理水配制75%乙醇,（用高温灭菌器皿配制）,然后装入高温烘烤的玻璃瓶中,存放于低温冰箱.

3、1×层析柱加样缓冲液；20mmol/L Tris·Cl(pH7.6),0.5mol/L NaCl,1mmol/L EDTA(pH8.0),0.1% SDS.

4、洗脱缓冲液：10mmol/L Tris·Cl (pH7.6),1mmol/L EDTA (pH8.0),0.05% SDS.

四、操作步骤

（一）动植物总RNA提取-Trizol法

Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染.RNA可直接用于Northern斑点分析,斑点杂交, Poly(A)+分离,体外翻译,RNase封阻分析和分子克隆.

1、将组织在液N中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml Trizol液研磨,注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%.

2、研磨液室温放置5分钟,然后以每1mlTrizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管,用手剧烈摇荡离心管15秒.

3、取上层水相于一新的离心管,按每mlTrizol液加0.5ml异丙醇的比例加入异丙醇,室温放置10分钟,12000g离心10分钟.

4、弃去上清液,按每ml Trizol液加入至少1ml的比例加入75%乙醇,涡旋混匀,4℃下7500g离心5分钟.

5、小心弃去上清液,然后室温或真空干燥5-10分钟,注意不要干燥过分,否则会降低RNA的溶解度.然后将RNA溶于水中,必要时可55℃-60℃水溶 10分钟.RNA可进行mRNA分离,或贮存于70%乙醇并保存于-70℃.

[注意] 1、整个操作要带口罩及一次性手套,并尽可能在低温下操作.

2、加氯仿前的匀浆液可在-70℃保存一个月以上,RNA沉淀在70%乙醇中可在4℃保存一周,-20℃保存一年.

（二）mRNA提取

由于mRNA末端含有多poly(A)+,当总RNA流径oligo(dT)纤维素时,在高盐缓冲液作用下,mRNA被特异的吸附在oligo(dT)纤维素柱上,在低盐浓度或蒸馏水中,mRNA可被洗下,经过两次oligo(dT) 纤维素柱,可得到较纯的mRNA.

1、用0.1mol/L NaOH悬浮0.5-1.0g oligo(dT)纤维素.

2、将悬浮液装入灭菌的一次性层析柱中或装入填有经DEPC处理并经高压灭菌的玻璃棉的巴斯德吸管中,柱床体积为0.5-1.0ml,用3倍柱床体积的灭菌水冲洗柱床.

3、用1x柱层析加样缓冲液冲洗柱床,直到流出液的pH值小于8.0.

4、将（一）中提取的RNA液于65℃温育5分钟后迅速冷却至室温,加入等体积2x柱层析缓冲液,上样,立即用灭菌试管收集洗出液,当所有RNA溶液进入柱床后,加入1倍柱床体积的1x层析柱加样溶液.

5、测定每一管的OD260,当洗出液中OD为0时,加入2-3倍柱床体积的灭菌洗脱缓冲液,以1/3至1/2柱床体积分管收集洗脱液.

6、测定OD260,合并含有RNA的洗脱组分.

7、加入1/10体积的3M NaAc(pH5.2), 2.5倍体积的冰冷乙醇, 混匀, -20℃30分钟.

8、4℃下12000g离心15分钟,小心弃去上清液,用70%乙醇洗 涤沉淀,4℃下12000g离心5分钟.

9、小心弃去上清液,沉淀空气干燥10分钟,或真空干燥10分钟.

10、用少量水溶解RNA液,即可用于cDNA合成（或保存在70%乙醇中并贮存于-70℃）.

[注意] 1、mRNA在70%乙醇中-70℃可保存一年以上.

2、oligo(dT)纤维素柱用后可用0.3mol/l NaOH洗净,然后用层析柱加样缓冲液平衡,并加入0.02%叠氮钠（NaN3）冰箱保存,重复使用.每次用前需用NaOH水层析柱加样缓冲液依次淋洗柱床.

兔肝RNA的制备：

实验目的

1.学习从兔肝中提取RNA的方法.

2.通过地衣酚显色法测定RNA的含量.

实验原理

细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起,并且多以核蛋白的形式存在.因此,分离制备RNA时,首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离,并除去蛋白质.由于RNA的种类来源和存在形式不同,所用的制备方法各异,一般常用的方法有,盐酸胍法,去污剂法和苯酚法.其中,以苯酚法使用较为广泛.产品纯度高,适合小规模生产.

动物组织中以肝脏器官RNA含量较为丰富.经组织匀浆用苯酚处理并离心后RNA溶于上层被酚饱和的水相中,DNA和蛋白质则留在酚层中,向水层中加入乙醇后,RNA即以白色絮状沉淀析出.此法能较好的除去DNA和蛋白质.上述方法提取的的RNA具有生物活性.工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA；其工艺简单,所提取的核酸均为变性RNA,只能用作制备核苷酸原料.本实验就是将兔肝组织,在酚与十二烷基硫酸钠的存在下,RNA与蛋白质分离使蛋白质变性凝固.RNA溶解在水相中,用乙醇使RNA从水相中沉淀,达到分离.

RNA含量的测定,除了可用紫外吸收法及定磷法外,常用地衣酚法测定,其反应原理是当RNA与浓盐酸共热时,即发生降解,形成的核糖继而转变成糠醛,后者与3, 5-二羟甲苯（地衣酚orcinol)反应,在Fe3+或Cu2+催化下,生成鲜绿色的复合物．反应产物在670nm处有最大吸收.RNA在20－250微克范围内,光吸收与RNA浓度 成正比.地衣酚反应特异性较差,凡是戊糖均有此反应.DNA和其他杂质也能给出类似的颜色.

实验试剂

0.05mol/L醋酸缓冲液（PH5.0）

0.05mol/L醋酸钠35毫升, 0.2mol/L醋酸15毫升,加蒸馏水至1000毫升,混合后测PH5.0

25%SDS:称取SDS25克,溶于50％乙醇中至100毫升,室温存放.

80％酚：取苯酚80份,加蒸馏水20份,混匀后装棕色瓶中.

2mol/L醋酸钠：取无水醋酸钠16.4克,用蒸馏水溶解后配成100毫升

95％乙醇

RNA标准溶液：取酵母标准RNA配成100μg/ml溶液.

样品待测液：准确稀释成每毫升溶液含RNA干燥制品50-100μg.

地衣酚试剂：先配制0.1%三氯化铁的浓盐酸溶液,实验前以此溶液为溶剂配成0.1%地衣酚溶液.

操作步骤

RNA提取：将新鲜兔肝浸入预冷0度0.05mol/L醋酸钠缓冲液(PH5.0)中,除去肝脏处的结缔组织,除去血凝,用滤纸吸干,称取0.9克.

取0.9克肝脏,加入 0.05mol/L醋酸缓冲液(PH5.0)9毫升,250克/升.SDS1.5毫升,移入匀浆管中,匀浆后再加入等体积80%酚,再匀浆一次.

移入三角瓶中,置65度水浴中继续振摇5-8分,取出流水冷却.

离心,3000转/分,10-15分,上层为稍混浊,含有RNA的水相,中层为变性蛋白,下层为酚液,管底残渣,含有RNA.吸出上层水溶液要RNA的收获量,可向中下层液中再加1/2体积的醋酸缓冲液,同样在65度水浴中振摇提取一次,离心后所收得的上层水液,可与上述水液合并,本次实验只提取一次.

用量筒测水液的量,加入1/10体积的2mol/L醋酸钠混匀.再加入2.5倍体积预冷的95%乙醇混匀,冷却放置絮状沉淀充分形成.

离心3000转/分,10分钟,倾出上清(不要废弃,可倒入收集瓶,作蒸馏回收乙醇用.

沉淀用蒸馏水4毫升溶解,慢慢向沉淀中加入蒸馏水,不断搅拌,至沉淀完全溶解即可,待作含量测定

向含苯酚废水中投加混凝剂，通过设备进行搅拌加快反应速率，使含苯酚废水中难以沉淀的颗粒能互相聚合而形成胶体，然后与含苯酚废水中的杂质结合形成更大的絮凝体。絮凝体具有强大吸附力，不仅能吸附悬浮物，还能吸附部分细菌和溶解性物质。絮凝体通过吸附，体积增加产生下沉，后进入沉淀池进行分离。

生物分解法含苯酚废水处理工艺

用微生物将含苯酚废水中的有机物进行氧化、分解。好氧处理是在含苯酚废水中含有充分溶解氧的条件下，利用好氧性微生物使含苯酚废水中的有机物分解成二氧化碳、氨及水等。 厌氧处理是在含苯酚废水中缺氧的条件下，利用厌氧性微生物使含苯酚废水中的有机物分解成甲烷、二氧化碳、硫化氢、氮及水等。

萃取法含苯酚废水处理工艺

将不溶于水的溶剂投入废水中，以溶解废水中的溶质，利用溶质与水的密度差，将溶剂分离。

除上述含苯酚废水处理工艺外还可采用氧化法、过滤、膜处理等多种工艺进行处理，具体根据实际情况而定。

这个问题在环|保|通上面有看见过，首先建议要建造一个较大调节池1000方吧，一般像盐分这么高的废水，通过静置就能析出部分盐类。就苯酚来说采用萃取处理比较好。也可加置一个二氧化氯反应器，用氯酸钠和盐酸制备二氧化氯。当然也有一些通过加碱把苯酚变成钠盐，在通过萃取来处理的。工艺流程如下：废水→调节池→萃取槽→分离器→二氧化氯氧化槽→调节池→厌氧→缺氧→好氧→二沉池→清水池→深度处理 查看原帖>>

（1）苯酚和氯化铁溶液之间会发生显色反应，向溶液中滴加FeCl 3 溶液，若溶液呈紫色，则表明污水中有苯酚，苯酚可以和氢氧化钠反应得到苯酚钠溶液，苯酚钠溶液和有机溶剂是互不相溶的，与有机溶剂脱离，然后向苯酚钠溶液中通入二氧化碳可以得到苯酚，发生的反应为：

、 ，

故答案为：取少量废液于试管中，滴加少量FeCl 3 溶液，溶液变紫色，说明废液中含有苯酚； 、 ；

（2）检验醛基，可用弱氧化剂进行氧化，加入银氨溶液后，水浴加热有银镜生成，可证明有醛基，或加入新制氢氧化铜进行加热，反应方程式为：

或

；检验碳碳双键，可用溴水，但醛基也可与溴水发生氧化反应而使溴水褪色，则应先加入银氨溶液氧化-CHO后，调pH至酸性再加入溴水，看是否褪色，反应的方程式为 ，

故答案为：稀氨水、AgNO 3 溶液或新制Cu（OH） 2 ；

或 ； ；

（3）硝酸具有强氧化性，可与试管内壁上的Ag反应使Ag溶解，则硝酸可用来清洗做过银镜反应的试管，

故答案为：HNO 3 ．

1.会的。因为这个羟基是连接在甲基上面的，所以它是醇羟基，而不是酚羟基。表现出来的就是醇羟基的性质，可以和NaOH发生水解。

2.B。A中如果用氨水清洗反应后溶液，氨水不仅无法清洗，并且会与该溶液反应生成叠氮盐，会发生爆炸放出大量气体。应用硝酸清洗。一般叠氮铜可以用来制造雷管

C.苯酚不与盐酸反应，也不与其互溶。所以不用盐酸。应用NAOH

D.KClO3+6HCl==KCl+3H2O+3C12↑.会发生这个反应。

3.B。这些反应你应该记住“加氧去氢是氧化”。氧化中乙醛做还原剂，被还原

4.A。甲醛中有两个醛基，所以它可以氧化4mol银氨溶液反应。生成4mol的AG，也就是432g。而其他饱和一元醛只有有一个醛基，1mol只能生成2mol的Ag

甲醛的结构简式是HCHO。C在中间，画出结构式来可以看到左右各有一个醛基

OK

（一）呼吸抑制剂：这类抑制剂抑制呼吸链的电子传递，也就是抑制氧化，氧化是磷酸化的基础，抑制了氧化也就抑制了磷酸化。呼吸链某一特定部位被抑制后，其底物一侧均为还原状态，其氧一侧均为氧化态，这很容易用分光光度法（双波长分光光度计）检定，重要的呼吸抑制剂有以下几种。鱼藤酮（rotenone）系从植物中分离到的呼吸抑制剂，专一抑制NADH→CoQ的电子传递。 抗霉素A（actinomycin A）由霉菌中分离得到，专一抑制CoQ→Cyt c的电子传递。 CN、CO、NaN3和H2S均抑制细胞色素氧化酶。 （二）磷酸化抑制剂：这类抑制剂抑制ATP的合成，抑制了磷酸化也一定会抑制氧化。 寡霉素（oligomycin）可与F0的OSCP结合，阻塞氢离子通道，从而抑制ATP合成。 二环己基碳二亚胺（dicyclohexyl carbodiimide，DCC）可与F0的DCC结合蛋白结合，阻断H+通道，抑制ATP合成。栎皮酮（quercetin）直接抑制参与ATP合成的ATP酶。 （三）解偶联剂（uncoupler）：解偶联剂使氧化和磷酸化脱偶联，氧化仍可以进行，而磷酸化不能进行，解偶联剂作用的本质是增大线粒体内膜对H+的通透性，消除H+的跨膜梯度，因而无ATP生成，解偶联剂只影响氧化磷酸化而不干扰底物水平磷酸化，解偶联剂的作用使氧化释放出来的能量全部以热的形式散发。动物棕色脂肪组织线粒体中有独特的解偶联蛋白，使氧化磷酸化处于解偶联状态，这对于维持动物的体温十分重要。 常用的解偶联剂有2，4-二硝基酚（dinitrophenol，DNP），羰基-氰-对-三氟甲氧基苯肼（FCCP），双香豆素（dicoumarin）等，过量的阿斯匹林也使氧化磷酸化部分解偶联，从而使体温升高。 过量的甲状腺素也有解偶联作用，甲状腺素诱导细胞膜上Na+-K+-ATP酶的合成，此酶催化ATP分解，释放的能量将细胞内的Na+泵到细胞外，而K+进入细胞，Na+-K+-ATP酶的转换率为100个分子ATP/秒，酶分子数增多，单位时间内分解的ATP增多，生成的ADP又可促进磷酸化过程。甲亢病人表现为多食、无力、喜冷怕热，基础代谢率（BMR）增高，因此也有人将甲状腺素看作是调节氧化磷酸化的重要激素。

1，加入苯的一支试管由于苯将废水中苯酚萃取了一部分而使紫色变浅；加入少量活性炭，振荡后静置由于活性炭的吸附性使紫色物被吸附而变为无色。

2，下层液体显紫色，结果是都显紫色，且深浅一样，原因是苯酚在苯中和在废水中是按比例分配的