bs琼脂平板全称
bs琼脂平板全称亚硫酸铋琼脂(BS)平板,是一种用于检验沙门氏菌的培养基。
配方:蛋白胨?10.0g牛肉膏?5.0g葡萄糖5.0g硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠4.0g煌绿0.025g或5.0g/L水溶液5.0mL柠檬酸铋铵2.0g亚硫酸钠6.0g琼脂?18.0g蒸馏水1000.0mL
制备:将前三种成分加入300mL蒸馏水(制作基础液),硫酸亚铁和磷酸氢二钠分别加入20mL和30mL蒸馏水中,柠檬酸铋铵和亚硫酸钠分别加入另一20mL和30ml蒸馏水中,琼脂加入600mL蒸馏水中。然后分别搅拌均匀,静置约30min,加热煮沸至完全溶解。冷至80℃左右时,先将硫酸亚铁和磷酸氢二钠混匀,倒人基础液中,混匀。将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠混匀,倒人基础液中,再混匀。调至PH7.5士0.1,随即倾人琼脂液中,混合均匀,冷至50℃一55℃。加入煌绿溶液,充分混匀后立即倾注平皿,每皿约20mL。
铋的常见化合物 Bi [Bi+5, Bi+3]
化合物名称 英文/ 中文
分子式
摩尔质量
Bismuth Nitrate 硝酸铋
Bi(NO3)3
394.9951
Bismuth(III) Nitrate Pentahydrate 五水硝酸铋(III)
Bi(NO3)3.5H2O
485.0715
Bismuth(V) Phosphate 磷酸铋(Ⅴ)
Bi3(PO4)5
1101.798
Bismuth Sulfate 硫酸铋
Bi2(SO4)3
706.1486
Bismuth(III) Oxide 氧化铋(III)
Bi2O3
465.959
Bismuth(V) Oxide 氧化铋(Ⅴ)
Bi2O5
497.9578
Bismuth(III) Chlorate 氯酸铋(III)
Bi(ClO3)3
459.334
Bismuth(III) Arsenate 砷酸铋(III)
BiAsO4
347.8996
Bismuth(III) Sulfide (III)铋硫化物
Bi2S3
514.1558
Bismuth Carbonate 碳酸铋
Bi2(CO3)3
597.9875
Bismuth(III) Bromide 溴化铋(III)
BiBr3
448.6924
Bismuth(III) Chloride 氯化铋(III)
BiCl3
315.3394
Bismuth(III) Hydrogen Sulfite 亚硫酸铋(III)
Bi(HSO3)3
452.1938
Bismuth(III) Acetate 乙酸铋(III)
Bi(C2H3O2)3
386.1125
Bismuth(III) Nitrite 硝酸铋(III)
Bi(NO2)3
346.9969
Bismuth(V) Phosphide 磷化铋(V)
Bi3P5
781.81
Bismuth(III) Orthophosphate 磷酸铋(III)
BiPO4
303.9518
Bismuth(V) Bromide 溴化铋(Ⅴ)
BiBr5
608.5004
Calcium Bismuthate 钙盐懒人
Ca(BiO3)2
554.0352
Bismuth(III) Chromate 铬酸铋(III)
Bi2(CrO4)3
765.9419
Bismuth(III) Hydroxide 铋(III)氢氧化物
Bi(OH)3
260.0024
Bismuth Oxynitrate 硷式硝酸铋
BiONO3
286.9847
Bismuth(III) Fluoride 氟化铋(III)
BiF3
265.9756
Magnesium Bismuthate 镁盐
Mg(BiO3)2
538.2622
Magnesium Bismuthide 镁铋化物
Mg3Bi2
490.8758
Bismuth Subcarbonate 碱式碳酸铋
Bi2O2CO3
509.9685
Bismuth(III) Hydrogen Carbonate 碳酸铋(III)
Bi(HCO3)3
392.03092
Bismuth(II) Phosphate Bismuth(II)磷酸盐
Bi3(AsO4)2
904.7796
Bismuth(III) Oxyiodide 碘氧化铋(III)
BiOI
351.8843
Bismuth(III) Telluride 铋(III)特柳赖德
Bi2Te3
800.7608
Bismuth(III) Molybdate 钼酸铋(III)
Bi2(MoO4)3
897.8336
来源-一点计算器
1 病原学特征
沙门氏菌为短杆菌,菌体大小(0.6~0.9)μm×(1~3)μm,两端钝圆,不形成荚膜和芽孢,具有鞭毛,有运动性,为革兰氏阴性菌。该菌对营养的要求不高,分离培养常采用肠道选择鉴别培养基。在肉汤培养基中变浑浊,而后沉淀,在琼脂培养基中培养24h后生成光滑、微隆起、圆形、半透明的灰白色小菌落,见图2-2和图2-3。
图2-2革兰氏染色后显微镜下的沙门氏菌 图2-3显色培养基上沙门氏菌菌落形态
沙门氏菌的生化特性见表2-1。大多本属菌按生化反应分为4个亚属。亚属Ⅰ是生化反应典型的和最常见的沙门氏菌;亚属Ⅱ和Ⅳ是生化反应不典型的沙门氏菌;亚属Ⅲ是亚利桑那沙门氏菌。沙门氏菌对热抵抗力不强,60℃经15min可被杀死;对低温有较强的抵抗力,在琼脂培养基上于-10℃经115d尚能存活。在水中存活2~3周。在5%的石炭酸中,5min即可死亡。在干燥的沙土中可生存2~3个月,在干燥的排泄物中可保存4年之久,在含29%食盐的腌肉中或在6~12℃的条件下均可存活4~8个月。
沙门氏菌具有复杂的抗原结构,一般可分为菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原3种。
O抗原为脂多糖,性质稳定。能耐100℃达数小时,不被乙醇或0.1%石炭酸破坏。决定O抗原特异性的是脂多糖中的多糖侧链部分,以1、2、3等阿拉伯数字表示。例如乙型副伤寒杆菌有4、5、123个;鼠伤寒杆菌有1、4、5、124个;猪霍乱杆菌有6、72个。其中有些O抗原是几种菌所共有,如4、5为乙型副伤寒杆菌和鼠伤寒杆菌共有,将具有共同O抗原沙门氏菌归为一组,这样可将沙门杆氏菌属分为a~z、O51~O63、O65~O67共42组。我国已发现26个菌组、161个血清型,使人类致病的沙门氏菌大多属于a~e组。O抗原刺激机体主要产生IgM抗体。
H抗原为蛋白质,对热不稳定,60℃经15min或乙醇处理被破坏。具有鞭毛的细菌经甲醇固定后,其O抗原全部被H抗原遮盖,而不能与相应抗O抗体反应。H抗原的特异性取决于多肽链上氨基酸的排列顺序和空间构型。H抗原有两种,即第1相和第2相。H抗原刺激机体主要产生IgG抗体。
Vi抗原是由聚-n乙酰-D-半乳糖胺糖醛酸组成。不稳定,经60℃加热、石炭酸处理或人工传代培养易破坏或丢失。新从患者标本中分离出的伤寒杆菌、丙型副伤寒杆菌等有此抗原。Vi抗原存在于细菌表面,可阻止O抗原与其相应抗体的反应。Vi抗原的抗原性弱。当体内菌存在时可产生一定量抗体;细菌被清除后,抗体也随之消失。故测定Vi抗体有助于对伤寒带菌者的检出。
2 流行病学特征
沙门氏菌广泛分布于自然界,人及动物如猪、牛、马、羊、鸡、鸭、鹅等均是其宿主。少数沙门氏菌对宿主有选择性,如马流产沙门氏菌、牛流产沙门氏菌和羊流产沙门氏菌分别引起马、牛、羊的流产等;猪伤寒沙门氏菌仅侵害猪;其他的沙门氏菌不需要中间宿主,很容易在动物与动物、动物与人、人与人之间通过直接或间接的途径传播。个别血清型是在一定程度上适应于特定动物的偏嗜性沙门氏菌,如猪霍乱沙门氏菌和都柏林沙门氏菌,分别是猪和牛羊的强适应性菌型,多在各自宿主中致病,但也能感染其他动物。大部分血清型的沙门氏菌属于非适应性或泛嗜性沙门氏菌,它们具有广泛感染的宿主谱,能引起人和各种动物的沙门氏菌病,鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌是其中的突出代表。
沙门氏菌主要传染途径是消化道,蛋、家禽和肉类产品是沙门氏菌病的主要传播媒介。人畜感染沙门氏菌后可呈无症状带菌,也可表现为有临床症状的致死疾病,可能加重病态,增加病死率或者降低动物的繁殖生产力。其致病性主要取决于沙门氏菌的菌型和食用者的身体状况。猪霍乱沙门氏菌致病性最强,其次为鼠伤寒沙门氏菌,鸭沙门氏菌致病性较弱;受威胁最大的是儿童、老人及免疫缺陷个体,即便是较少菌量或较弱致病性的菌型仍可引起食物中毒,甚至出现较重的临床症状。
3 危害
沙门氏菌是肠杆菌科中最重要的人畜共患病的病原菌,是细菌性食物中毒中发病率最高的一种。几乎所有血清型的沙门氏菌都具有感染性,常见的危害最大的有如下几种:鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、猪伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌、马流产沙门氏菌、鸡沙门氏菌。
大部分血清型的沙门氏菌都能感染人类。人感染沙门氏菌血清型的70%是鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌,在暴发的人沙门氏菌病中,这两个血清型感染的病例数有时可达上万例。由沙门氏菌引起的人类疾病主要有伤寒和非伤寒沙门氏菌病。伤寒是由伤寒沙门氏菌引起的急性肠道传染病,主要临床症状表现为持续高热、腹痛、腹泻或便秘,白细胞数量减少,部分病人会出现玫瑰疹、相对缓脉等,并发肠出血、肠穿孔。全球每年因沙门氏菌引起的伤寒造成至少160万人发病、60万人死亡。非伤寒沙门氏菌病是世界范围内最普通的食源性疾病。如沙门氏菌胃肠炎,潜伏期为8~48h,可引起恶心、呕吐、腹泻、发热、寒战、头疼等症状,病程一般1d或更长,易感群体是儿童、老人和免疫缺陷者等。
据美国疾病控制与预防中心报告,美国在1973年所发生的84起细菌性食物中毒事件中有33起是由沙门氏菌引起的,占食物中毒的首位,中毒人数为2045人。欧洲食品安全局和欧洲疾病预防控制中心发布的2018年关于人畜共患病趋势和来源的年度报告显示,欧盟近1/3的食源性疾病暴发是由沙门氏菌引起的,沙门氏菌病是欧盟第二大最常报告的人类胃肠道感染(报告91857例),仅次于弯曲杆菌病(246571例)。有些国家沙门氏菌食物中毒占细菌性食物中毒的40%以上。世界上最大的一起沙门氏菌食物中毒事件发生在1953年,瑞典人由于食用了被鼠伤寒杆菌污染的猪肉而中毒,中毒7717人,死亡90人。我国以沙门氏菌引起的细菌性食物中毒占首位。1972年青海省同仁县发生了因圣保罗沙门氏菌污染牛肉引起的中毒事件,中毒1041人。沙门氏菌食物污染给国家造成巨大的经济损失,如1990年在我国向欧洲出口的生肉中检测到肠炎沙门氏菌,全部销毁的直接经济损失达3000万元,另外沙门氏菌污染严重是我国鸡肉出口欧洲受限的主要原因;2010年美国多个州暴发由鸡蛋引发的沙门氏菌疫情,共召回鸡蛋5.5亿个。
4 国内外卫生要求
国际食品法典委员会(CAC)、欧盟、澳大利亚、加拿大、日本以及我国的动物源食品标准规定,沙门氏菌为不得检出的致病菌,但美国的联邦法规中规定了在具体的动物产品中可有一定比例的检出。如碎牛肉沙门氏菌的最大阳性检出数为5/53,嫩鸡肉沙门氏菌的最大阳性检出数为12/51,碎火鸡肉的沙门氏菌最大阳性检出数为29/53。
5 检测方法
沙门氏菌作为食品中致病菌检测的一项重要指标,在公共卫生、食品卫生、畜牧兽医和口岸检疫中都有重要的意义。目前随着现代科学技术的发展,特别是免疫学、生物化学和分子生物学的不断发展,沙门氏菌检测从以传统方法为基础发展到以免疫学为基础的或以DNA为基础的方法,并在实践检验中不断取得新进展。
5.1 常规的标准检验方法
用于检测沙门氏菌的传统标准检测方法是将食物样品分步增菌,以增加病原菌的检出率。这种培养方法总体可分为三个不同阶段,即预增菌、选择性增菌及分离步骤。传统沙门氏菌检测法全过程至少需4d才能得出明确的诊断结果。GB4789.4—2016是目前我国规定的对畜产品中沙门氏菌的标准检测方法,主要是根据沙门氏菌的生化特性,进行预增菌、选择性增菌、分离培养、生化鉴定和血清分型。在检测畜产品过程中,应注意根据不同的样品采取不同的检测步骤。
5.1.1 细菌分离培养
(1)预增菌 称取25g(mL)样品放入盛有225mL缓冲蛋白胨水(BPW)的无菌均质杯中,以8000~10000r/min均质1~2min,或置于盛有225mL BPW的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1~2min。若样品为液态,不需要均质,振荡混匀。如需测定pH,用1mol/mL无菌氢氧化钠或盐酸调pH至6.8±0.2。无菌操作将样品转至500mL锥形瓶中,如使用均质袋,可直接进行培养,于(36±1)℃培养8~18h。
如为冷冻产品,应在45℃以下不超过15min或2~5℃不超18h解冻。
(2)选择性增菌 轻轻摇动培养过的样品混合物,移取1mL,转种于10mL四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液内,于(42±1)℃培养18~24h。同时,另取1mL,转种于10mL亚酸盐胱氨酸(SC)增菌液内,于(36±1)℃培养18~24h。
(3)分离培养 分别用接种环取增菌液1环,划线接种于亚硫酸铋(BS)琼脂平板和木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂平板(或HE琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板)。于(36±1)℃分别培养18~24h(XLD琼脂平板、HE琼脂平板、沙门氏菌属显色培养基平板)或40~48h(BS琼脂平板),观察各个平板上生长的菌落,各个平板上的菌落特征见表2-2。
5.1.2 生化鉴定
(1)自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落,接种三糖铁琼脂,先在斜面划线,再于底层穿刺;接种针不要灭菌,直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板,于(36±1)℃培养18~24h,必要时可延长至48h。在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内,沙门氏菌属的反应结果见表2-3。
(2)接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时,可直接接种蛋白胨水(供做靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾培养基,也可在初步判断结果后从营养琼脂平板上挑取可疑菌落接种。于(36±1)℃培养18~24h,必要时可延长至48h,按表2-4判定结果。将已挑菌落的平板储存于2℃~5℃或室温至少保留24h,以备必要时复查。
反应序号A1:典型反应判定为沙门氏菌属。如尿素、氰化钾和赖氨酸脱羧酶3项中有1项异常,按表2-5可判定为沙门氏菌。如有2项异常为非沙门氏菌。
反应序号A2:补做甘露醇和山梨醇试验,沙门氏菌靛基质阳性变体2项试验结果均为阳性,但需要结合血清学鉴定结果进行判定。
反应序号A3:补做β-半乳糖苷酶试验(ONPG)。ONPG阴性为沙门氏菌,同时赖氨酸脱羧酶阳性,甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸脱羧酶阴性。
必要时按表2-6进行沙门氏菌生化群的鉴别。
(3)如选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统,可根据5.1.2(1)的初步判断结果,从营养琼脂平板上挑取可疑菌落,用生理盐水制备成浊度适当的菌悬液,使用生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统进行鉴定。
5.1.3 血清型鉴定
用营养琼脂平板上的单个菌落作为玻片凝集试验用的抗原。然后按照定型血清说明书依次进行O抗原、H抗原及Vi抗原的鉴定。
5.2 生化鉴定试剂盒方法
API20E试验条由20个含干燥底物的小管所组成。这些测定管用细菌悬浮液接种。培养一定时间后,通过代谢作用产生颜色的变化,或是加入试剂后变色而观察其结果。
按照生化鉴定试剂盒操作说明,将以上菌悬液加入20E反应条的各反应孔内,放入反应槽中,置37℃温箱中培养24h。取出后根据说明书观察反应结果,在软件上记录结果,系统将自动出现检测结果。所得反应的类型必须以数字化形式记录在报告单中,每3个测定为一组,每个以1、2和4标明,在每组中,阳性反应以相应的数字相加,由API20E的20个测定可得一个7位数,通过分析即可鉴定获得细菌类型。
5.3 分子生物学鉴定方法
用PCR进行鉴定,亦可根据5.1.2(1)的初步判断结果,从营养琼脂平板上挑取可疑菌落,用无菌去离子水制成菌悬液,水浴煮沸10min,3000r/min离心5min,以上清液为模板,进行扩增。上游引物为:5′-GTG AAA TTA TCG CCA CGT TCG GGC AA-3′,下游引物为:5′-TCA TCG CAC CGT CAA AGG AAC C-3′。反应体系:10×buffer5μL,TaqDNA聚合酶(2U/μL)1μL,氯化镁溶液(25mmol/L)5μL,dNTP(2.5mmol/L)5μL,ddH2O29μL,上游引物(10μmol/L)2μL,下游引物(10μmol/L)2μL,模板1μL。反应条件:95℃预变性5min,94℃变性30s,64℃退火30s,72℃延伸30s,30个循环,PCR产物用1.5%的琼脂糖在100V条件下进行电泳,得到扩增长度为284bp的扩增产物为沙门氏菌阳性。
5.4 VIDAS鉴定方法
用可疑菌落制成菌悬液或以下方法培养菌液以备检测:
(1)预增菌 无菌方法在225mL缓冲蛋白胨水中加入25g(25mL)待检样品,混合混匀后,35~37℃孵育16~20h。
(2)选择性增菌 孵育之后,转1mL悬液至10mLSC肉汤中(或1/10稀释)。35~37℃孵育6~8h。同时转0.1mL预增菌肉汤至氯化镁孔雀绿大豆(RVS)肉汤中,41~42℃孵育6~8h。
(3)后增菌 孵育之后,从SC肉汤中转1mL至M肉汤,从RVS肉汤中转1mL至另一份M肉汤。
孵育之后,混匀肉汤,从两份M肉汤中各取1mL加入一个试管封口并在95~100℃水浴中加热15min。冷却后进行VIDAS鉴定。
(4)将所需试剂取出,使其恢复至室温(至少30min)。
(5)每个样品使用一条SLM(沙门氏菌)试剂条及一个SLM固相容器,先必须做好质控和校正。确保取出试剂后,将装有剩余固相容器的袋子重新密封好。
(6)输入所需的信息以便建立工作类列表(work list),键入“SLM”至检测编号,再输入将要检测待检样品的试验号。标准(S1)必须在work list的首位并做双份,随后是质控(C1)和(C2)。
(7)吸取500μL的质控或样品至SLM试剂条样品孔。依屏幕所示,将固相容器和试剂条放入仪器的相应位置。核对位置以确保固相容器上3个字母编码的颜色标记与试剂条相符。
(8)根据操作手册进行检测。所有分析过程都由仪器自动完成。整个过程约需45min。
5.5 乳胶凝集试验方法
用沙门氏菌多价血清致敏乳胶制成的乳胶抗体,建立沙门氏菌乳胶凝集试验检测方法。直接将可疑单个菌落涂布于玻片上,然后滴加乳胶血清,观察其凝集情况。乳胶凝集试验操作简便、快速、敏感性高、特异性强且可用于现场检测,是一种适合基层单位用来检测沙门氏菌的可靠方法。
5.6 ELISA方法
(1)抗原的制备 待检样品在增菌液中增菌后,取1mL增菌液于离心管中,3000r/min离心10min,收集沉淀用PBS洗涤后,用少量PBS悬浮,于水浴锅中煮沸20min,冷却后于4℃保存备用。
(2)包被 在每个聚苯乙烯板的反应孔中加50μL制备的抗原,于50~60℃烘干,冷却后,加甲醇固定5~10min,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3min。
(3)加酶标抗体 于各反应孔中加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)50μL。37℃孵育2h,洗涤。
(4)加底物液显色 于各反应孔中加入临时配制的TMB(3,3,5,5-四甲基苯胺)底物溶液50μL,37℃孵育20min。
(5)终止反应 于各反应孔中加入2mol/L硫酸50μL。
(6)结果判定 可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”“-”号表示。也可测光密度(OD)值:在ELISA检测仪上,于450nm处,以空白对照孔调零后测各孔OD值。每次试验设阴、阳性和空白对照。
不含 BSA 和 Azide
这种抗体一般可以用来做功能实验,比如培养细胞或者体内注射用于中和等。所以不含bsa和叠氮化物。
bsa加到抗体里是一种抗体蛋白抗变性和降解的保护剂,但用与体内注射的时候会有一定的干扰
叠氮物可以抗菌,但如果用于细胞培养等则会对细胞有毒性
所以这种抗体要注意尽量无菌环境,保存条件稳定。
如果只是做wb,还是带的好。特别是放四度的时候,比较容易长菌也不太稳定。
引用自丁香园
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糖发酵管
ONPG培养基
缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)
西蒙氏柠檬酸盐培养基
克氏柠檬酸盐培养基
丙二酸钠培养基
葡葡糖铵培养基
Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)
马尿酸钠培养基
营养明胶
苯丙氨酸培养基
氨基酸脱羧酶试验培养基
蛋白胨水(靛基质试验用)
硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)
尿素琼脂
氰化钾(KCN)培养基
硝酸盐培养基
氧化酶试验
细胞色素氧化酶试验
过氧化氢酶试验
过氧化物酶试验
磷酸盐缓冲液
明胶磷酸盐缓冲液
乳酸-苯酚溶液
肉浸液肉汤
肉浸液琼脂
牛肉(或牛心)消化汤
血消化汤
豆粉琼脂
血琼脂
营养琼脂
营养肉汤
乳糖胆盐发酵管
乳糖发酵管
EC肉汤
缓冲蛋白胨水(BP)
氯化镁孔雀绿增菌液(MM)
四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)
四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)
亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)
GN增菌液
肠道菌增菌肉汤
亚硫酸铋琼脂(BS)
DHL琼脂
HE琼脂
SS琼脂
Ws琼脂
麦康凯琼脂
伊红美蓝琼脂(EMB)
三糖铁琼脂(TSI)
三糖铁琼脂(换用方法)
克氏双糖铁琼脂(KI)
克氏双糖铁琼脂(换用方法)
半固体琼脂
葡萄糖半固体发酵管
5%乳糖发酵管
CAYE培养基
Honda氏产毒肉汤
Elek氏培养基(毒素测定用)
氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基
胰蛋白胨水
Rustigian氏尿素培养液
氯化钠结晶紫增菌液
氯化钠蔗糖琼脂
嗜盐菌选择性琼脂
3.5%氯化钠三糖铁琼脂
氯化钠血琼脂
嗜盐性试验培养基
3.5%氯化钠生化试验培养基
改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)
CIN-1培养基
改良Y培养基
改良克氏双糖
快速硫化氢(H2S)试验琼脂
DNA酶甲基绿琼脂(DTA)
Cary-Blair氏运送培养基
改良Camp-BAP培养基
Skirrow氏培养基
TTC琼脂
甘氨酸培养基
改良磷酸盐缓冲液
氯化镁孔雀绿肉汤
胰酪胨大豆肉汤
Baird-Parker氏培养基
7.5%氯化钠肉汤
匹克氏肉汤
3.8%柠檬酸钠溶液
甘露醇卵黄多粘菌素琼脂
酪蛋白琼脂
木糖-明胶培养基
庖肉培养基
卵黄琼脂培养基
亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂(SPS)
液体硫乙醇酸盐培养基(FT)
含铁牛奶培养基
动力-硝酸盐培养基(A法)
动力-硝酸盐培养基(B法)
血清肉汤
马丁氏肉汤
明胶培养基
察氏培养基
高盐察氏培养基
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)
马铃薯琼脂
孟加拉红培养基
玉米粉琼脂
大米粉培养基
亚硒酸盐煌绿增菌液
煌绿肉汤增菌液
0.1%蛋白胨水稀释剂
肠毒素产毒培养基
某些细菌具有色氨酸酶,能分解蛋白胨水中的色氨酸生成吲哚,当加入吲哚试剂后形成红色的玫瑰吲哚。
氧化酶试验原理
氧化酶使细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌,使细胞色素C氧化,再由氧化型细胞色素C是对苯二胺氧化,生成有色的醌类化合物。
姐姐你要的也太多了,我把我的专业书给你好了。我这两天考试,考完了,慢慢给你打
人沙门氏菌病有四类综合症:沙门氏菌病;伤寒;非伤寒型沙门氏菌败血症和无症状带菌者。沙门氏菌胃肠炎是由除伤寒沙门氏菌外任何一型沙门氏菌而所致,通常表现为轻度,持久性腹泻。伤寒实际上是由伤寒沙门氏菌所致。未接受过治疗的病人致死率可超过10%,而对经过适当医疗的病人其致死率低于1%,幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌携带者。这些无症状携带者不显示发病症状仍能将微生物传染给其他人(传统的例子就是玛丽伤寒)。
非伤寒型沙门氏菌败血症可由各型沙门氏菌感染所致,能影响所有器官,有时还引起死亡。幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌携带者。
沙门氏菌胃肠炎,潜伏期一般6-72小时,主要症状为恶心、呕吐、腹绞痛、腹泻、发热寒颤头痛。病程一般1-2天或更长。感染剂量为15-20个菌,死亡率达1-4%。最易感群体是年幼儿童、虚弱者、年长老人、免疫缺陷者等。污染源主要是人和家畜的粪便,沙门氏菌常存在于动物中,特别是禽类和猪。在许多环境中也有存在。从水,土壤,昆虫中,从工厂和厨房设施的表面和动物粪便中已发现该类细菌。它们可以存在于多类食品中,包括生肉,禽,奶制品和蛋,鱼,虾和田鸡腿,酵母,椰子,酱油和沙拉调料,蛋糕粉,奶油夹心甜点,顶端配料,干明胶,花生露,橙汁,可可和巧克力。
沙门氏菌属也是嗜温性细菌,在中等温度,中性pH,低盐和高水活度条件下生长最佳。生长最低水活度为0.94。兼性厌氧,对中等加热敏感。同样,该菌属能适应酸性环境。通过卫生以防止二次污染;蒸煮;巴氏消毒等控制。正常家庭烹调,个人卫生可以防止煮熟食品的二次污染,以及控制时间和温度一般都能充分防止沙门氏菌病的发生。
蛋类食物很容易感染的。
菌体大小(0.6~0.9)×(1~3)微米无芽胞,一般无荚膜,除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外,大多有周身鞭毛。营养要求不高,分离培养常采用肠道选择鉴别培养基。生化反应对本属菌的鉴别具有重要参考意义(见表)。不液化明胶,不分解尿素,不产生吲哚,不发酵乳糖和蔗糖,能发酵葡萄糖、甘露醇、麦芽糖和卫芽糖,大多产酸产气,少数只产酸不产气。VP试验阴性,有赖氨酸脱羧酶。DNA的G+C含量为50~53%。对热抵抗力不强,在60℃15分钟可被杀死。在水中存活2~3周。在5%的石炭酸中,5分钟死亡。
本属菌按生化反应分为 4个亚属。亚属Ⅰ是生化反应典型的和最常见的沙门氏菌;亚属Ⅱ和Ⅳ是生化反应不典型的沙门氏菌;亚属Ⅲ是亚利桑那沙门氏菌。
沙门氏菌具有复杂的抗原结构,一般可分为菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原3种。
沙门氏菌通过消化道传染致病,统称为沙门氏菌病。引起人类疾病的沙门氏菌大多属于A、B、C、D、E5个血清群,病型有①伤寒与副伤寒(统称肠热症):由伤寒沙门氏菌、甲型和乙型副伤寒沙门氏菌等引起;②食物中毒:可由不同菌型引起,以鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、汤卜逊沙门氏菌等最为常见;③败血症:由猪霍乱沙门氏菌等引起,此外,还可引起慢性肠炎。
对禽兽致病的沙门氏菌大多属于B~E血清群。以侵害幼年动物为主,发生急性败血症、胃肠炎以及其他局部炎症。对成年动物常引起局部慢性或隐性疾病。患沙门氏菌病痊愈的动物具有一定的免疫力。能抗再感染。但局部慢性患病的动物免疫力不强,在疾病恢复期间常成为带菌者。目前,对猪伤寒、马流产等11种传染病已使用菌苗。