怎么配75%乙醇（DEPC处理水配制）

DEPC水是用DEPC(diethyl pyrocarbonate，焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压灭菌的MiliQ纯水，无色液体。经检测不含杂质RNA、DNA和蛋白质。

DEPC水可以用于RNA沉淀的溶解，含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等，以及其它各种要求无RNase、DNAase和proteinase的反应体系。

扩展资料：

DEPC水的使用要点：

通常使用0.1%的DEPC水溶液使Rnase失活，即1ml DEPC溶于1L纯净水中。溶解时，DEPC不会很快溶解，开始时以小球的形式存在于溶液中，因此要在搅拌器中搅动直到小球消失为止。

DEPC自行分解成乙醇和二氧化碳很慢，可以通过高压灭菌处理破坏DEPC或水溶液中煮沸15分钟以上。

DEPC对湿气和酸碱敏感，在乙醇和二氧化碳的水溶液中缓慢分解，在155°C自行分解。DEPC在氨水中特别不稳定，生成一种致癌的聚氨酯胶的物质。 DEPC对核酸酶有积极地抑制作用。（主要是对含有-NH，-SH，-OH活性部位的酶起作用）。

参考资料来源：百度百科-DEPC水

无RNA酶灭菌水DEPC水：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃×2h）装蒸馏水,然后加入0.1%的DEPC（体积/体积）,处理过夜后高压灭菌.

DEPC水：

泡实验器具的DEPC水的配制：1000ml双蒸水中加1mlDEPC,放在1000ml容量瓶中静置4小时后备用.

配75％乙醇的DEPC水的配制：100ml盐水瓶内装40ml双蒸水,加40ulDEPC,37℃过夜,送至高压.

无RNA酶灭菌水DEPC水：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃×2h）装蒸馏水，然后加入0.1%的DEPC（体积/体积），处理过夜后高压灭菌。

DEPC水：

泡实验器具的DEPC水的配制：1000ml双蒸水中加1mlDEPC，放在1000ml容量瓶中静置4小时后备用。

配75％乙醇的DEPC水的配制：100ml盐水瓶内装40ml双蒸水，加40ulDEPC，37℃过夜，送至高压。

没有烘干不可以用，因为DEPC在水溶液中不稳定，极易分解，DEPC在pH6.0和pH7.0的PBS缓冲液中的半衰期分别约为20分钟和10分钟，DEPC在水中的半衰期约为30分钟。

DEPC中文名为焦碳酸二乙酯。分子式为C6H10O5，分子量为162.14。是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。通过和RNA酶的活性的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性，常用于生物实验中RNA的提取等。

DEPC毒性须知：

1．DEPC 是一种高效烷化剂。DEPC不稳定，在水溶液中会分解成乙醇和二氧化碳，155℃时也会分解。DEPC遇到氨水会发生反应产生氨基甲酸乙酯。

2．DEPC有刺激性，对眼睛和气道粘膜有强刺激，在操作中应尽量在通风的条件下进行，DEPC毒性并不是很强，但吸入的毒性是很强的，使用时戴口罩，不小心沾到手上注意立即冲洗。

3．DEPC是一种潜在的致癌物质，主要是能生成乙酯基衍生物和乙酯类衍生物，其中尿烷是一种已知的致癌物质。

无酶水是一种化学品，用超纯的去离子水经DEPC处理后，再经过高压灭菌而来。DEPC水可以用于RNA沉淀的溶解。

DEPC水含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等，以及其它各种要求无RNase、DNAase和proteinase的反应体系。

无酶水经检测无核酸酶和蛋白酶活性，可用于cDNA合成、体外转录、RNA提取等对核酸酶敏感的分子生物学试验。无酶水可以用于RNA沉淀的溶解，含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等。

DEPC水是用DEPC(diethyl pyrocarbonate，焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压灭菌的MiliQ纯水，无色液体。经检测不含杂质RNA、DNA和蛋白质。

DEPC对湿气和酸碱敏感，在乙醇和二氧化碳的水溶液中缓慢分解，在155°C自行分解。DEPC在氨水中特别不稳定。

生成一种致癌的聚氨酯胶的物质，DEPC对核酸酶有积极地抑制作用。（主要是对含有-NH，-SH，-OH活性部位的酶起作用）。

以上内容参考：depc水

以上内容参考：无酶无菌水

rna提取无菌水需要用depc处理

一般RNA提取试剂盒里的RNase-free ddH2O就是已经经过DEPC处理的水，具体还是要看一下说明书。 一个RNA提取样品（以1ml Trizol为例）只需要250+20ul DEPC水。

RNA提取的时候,一定要注意防止RNA酶作用.

第一点,样本处理和存放最好都放负80冰柜.

第二点,实验过程中你可以使用DEPC水泡过的枪头,离心管,保持手套干净,带好口罩,不要说话.

第三点,假如你用Trizol提取RNA,75%的乙醇也最好采用来菌的DEPC水来配制.晾干酒精这一步时间不要太长.

第四点：琼脂糖凝胶电泳,专漕专用,使用新的电泳缓冲液TBE.

还有呢,也可以在实验前,采用RNase Zap喷喷桌面,也能有一定程度上去除RNA酶的影响.

一般提取的时候多多注意,应该问题不大.

糊弄用可以,但是如果是自己做实验的话最好还是参考一下比较好的文献总结会比较好!

一）DEPC水是经DEPC处理过的灭菌蒸馏水。DEPC即二乙基焦碳酸酯（diethylprocarbonate），可灭活各种蛋白质，是RNA酶的强抑制剂。原位杂交在杂交及其以前的各步处理中，所有液体试剂都应经DEPC处理。方法是：取市售DEPc 1ml，加入1L待处理水（蒸馏水等）中，经猛烈振摇后，于室温静止数小时，然后高压灭菌，以除去降解DEPC（DEPC分解为CO2和乙醇）。注意：①DEPC是一种潜在的致癌物质，在操作中应尽量在通风的条件下进行，并避免接触皮肤。②含有Tris缓冲液的溶液中，不能加入DEPC。