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沉淀DNA时为什么要用无水乙醇

清秀的星星
悦耳的野狼
2022-12-23 07:46:56

酚氯仿抽提DNA体系后出现的现象及成因,沉淀DNA时为什么要用无水乙醇

最佳答案
酷炫的铃铛
甜甜的乌龟
2026-05-02 02:25:42

酚氯仿抽提DNA后,会使溶液分层,上层为水相,含有DNA;中间为蛋白(有时看不到);下层为有机相。

原因是酚氯仿可以使蛋白质变性,从而从溶液中析出,但是蛋白密度会小于酚氯仿,所以离心后它分布在中间;而DNA溶于水而不溶于有机相。

沉淀DNA用无水乙醇,是因为DNA不溶于乙醇,而乙醇可以夺取水,从而使得DNA聚集沉淀,如果用乙醇沉淀的话一定要用2倍以上的无水乙醇。

也可以用异丙醇沉淀。

最新回答
感动的月饼
清爽的衬衫
2026-05-02 02:25:42

1.DNA不溶于乙醇

2.乙醇可以吸附水分子(极性相同),使得溶液中相对的水分子减少,增大了DNA在水中的相对浓度.

3.附:乙醇沉淀DNA需要盐离子,用金属离子屏蔽DNA上磷酸的负电荷,降低DNA分子间的斥力,才能沉淀完全.

超帅的冬日
勤奋的冬天
2026-05-02 02:25:42
溶解的原理是被溶解溶质的分子分散到溶解该物质的溶液分子间隙的过程,这个原理同样适用于DNA溶于水的过程,即DNA分子同水分子相互结合。乙醇分子和水的结合力大于DNA与水的结合力,故乙醇分子会抢占原来已经溶于水的DNA分子的位置,DNA分子因此被析出。为保证所形成的乙醇溶液的浓度,要加两倍以上体积的乙醇,这样能形成60%以上浓度的乙醇溶液,不一定是两倍,但是一定要高于这个值,否则DNA不容易析出。DNA提取的下一步加70%洗涤也是这个原理,其实量多量少不重要,关键是达到一定的条件。

犹豫的书本
腼腆的云朵
2026-05-02 02:25:42
乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。

换句话就是DNA这个比较娇贵。

乙醇比较柔和,所以用乙醇。

包容的戒指
瘦瘦的香烟
2026-05-02 02:25:42
乙醇可以沉淀DNA.

DNA washing buffer 中为什么要加无水乙醇,是为了维持DNA的沉淀状态,把DNA沉淀上附着表面的一些盐如LiCl、NaCl等溶解去除.

娇气的羽毛
美满的电脑
2026-05-02 02:25:42
因为无论用哪种方法提取,沉淀dna时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和dna分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与dna结合形成dna-阳离子盐溶于溶液中,再用无水乙醇可以将dna-阳离子盐沉淀下来,但这样一来,dna中就含有较多的盐离子,这势必会影响下一步实验的进行,所以要用70%乙醇洗涤dna沉淀(因为在70%乙醇里dna是不溶的,而盐离子却可溶),用无水乙醇则达不到这个目的!ok?

幽默的嚓茶
虚心的朋友
2026-05-02 02:25:42
因为DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。

脱氧核糖核酸(英语:Deoxyribonucleic acid,缩写为DNA)又称去氧核糖核酸,是一种分子,双链结构,由脱氧核糖核苷酸(成分为:脱氧核糖及四种含氮碱基)组成。可组成遗传指令,引导生物发育与生命机能运作。

主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为“蓝图”或“食谱”。其中包含的指令,是建构细胞内其他的化合物,如蛋白质与RNA所需。