色谱固定液ffap是什么化学物质

保留值受溶质分子结构、烷基键合固定相的特性、流动相性质影响。

1、溶质分子结构

在反相键合相色谱法中，溶质的分离以它们的疏水结构差异为依据的，溶质的极性越弱，疏水性也强，保留值越大。根据疏溶剂理论，溶质的保留值与其分子中非极性部分的总表面积有关，其与烷基键合固定相结出的面积愈大，保留值越大。

2、烷基键合固定相的特性

烷基键合固定相的作用在于提供非极性作用表面，因此键合到硅胶表面的烷基数量就决定着溶质容量因子的大小。烷基的疏水特性随碳链的加长而增加，溶质的保留值也随着烷基碳链长度的增加而增人。

随着烷基碳链的增长，增加了键合相的非极性作用的表面积，其不仅影响溶质的保留值，还影响色谱柱的选择性，即随烷基碳链的加长其对溶质分离的选择性也增大。

3、流动相性质

流动相的表面张力愈大，介电常数愈大，其极性越强，此时溶质与烷基键合相的缔合能力越强，流动相的洗脱强度弱，导致溶质的保留值越大。

扩展资料

保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定。

保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大，对于非极性化合物通常遵循以下规则：(弱)非键合硅胶《氰基<C1(TMS)<C3<C4<苯基<C8≈C18(强)。

溶质保留值与固定相表面积成正比，普通载体(80A°)的比表面积约为250m²/g，而300A°孔径载体的比表面积约为60m²/g。

当其他条件相同时，溶质在300A°孔径(低表面积)色谱柱上的保留值大约为80A°孔径色谱柱上保留值的1/4(60：250)，小孔隙柱如高保留的C18柱或石墨柱有利于强亲水性样品洗脱。

样品的保留值也可以通过改变流动相组成或溶剂强度来调整，溶剂强度取决于有机溶剂的性质和其在流动相中的浓度。在反相色谱中，采用高溶剂强度、低极性的流动相时可获得较低的保留值。

固定相的不同也可以导致选择性发生变化，氰基柱、苯基柱、C8柱、C18柱等的选择性有很大差异，一般应优先考虑C8柱、C18柱，然后是氰基柱，再次是苯基柱。

参考资料来源：百度百科-反相高效液相色谱

参考资料来源：百度百科-反相色谱

在气相色谱中为实现样品中各组分的分离，所用固定液应满足以下要求。

1.固定液应是一种高沸点化合物，其蒸汽压低，热稳定性好，在色谱分析操作温度下呈液体状态。固定相的沸点比操作温度高100℃左右，否则固定液流失，会缩短色谱柱的使用寿命，还会引起保留值的变化影响定性检测或引起检测器的本底电流增大。

2.在色谱柱的操作温度下，固定液的粘度要低，以保证固定液能够均匀地分布在载体的表面上。一般降低柱温会增加固定液的粘度，降低色谱柱的分离效率。对某些固定液使用温度不能低于使用的低限温度。如阿匹松L的低限温度为75℃，甲基硅胶的低限温度为100~125℃

3.在色谱柱的操作温度下固定液要有足够的化学稳定性，这对高温（200℃以上）色谱柱尤为重要。有些固定液在高温下会变质，并有结构上的变化。

4.对所要分离的组分有高选择性，即对两个沸点相同（或相近），但属于不同类型的异构体（如正、异构体、顺、反异构体）有尽可能高的分离能力。

在气相色谱中使用的固定液已达1000多种，通常按照固定液的组成答题可以分为非极性、中等极性、极性、氢键型4类，如表16-15所示。（不好意思，表格不大好打，如果你需要可以通知我。哪天我整理了打上去，基本上都是一些载体名称，而且是代码的，<字段为：载体名称，组成及处理，颜色，催化吸附性能，厂家，备注>）固定液也可按相对极性划分，假设角鲨烷的极性为0，β，β’-氧二丙睛的极性为100，把固定液按相对极性划分，以每20个极性单位为一级，可分为0、+1、+2、+3、+4、+5、+6六个等级，按0~+5顺序极性不断增强。

（下边是一个1970年W.O.麦克雷诺兹为评价固定液的极性，选用10种标准实验溶质做的实验，应该可以在网上找到吧。）下面介绍通过电子计算机，利用Fortran程序，引进“最相邻技术”说明226种固定液的麦克雷偌兹常数表的相互关系，从而提出的12中最佳固定液（表16-16）（我只按照极性从小到大排列以下顺序，表格不好在这上打，顺序为角鲨烷，甲基硅酮SE-30，甲基苯基（10%）硅酮OV-3，甲基苯基（20%）硅酮OV-7，甲基苯基（50%）硅酮DC-710，甲基苯基（65%）硅酮OV-22，甲基三氟丙基（50%）硅酮qf-1(或OV-210)，甲基氰乙基（25%）硅酮XE-60(或OV-225)，聚乙二醇PEG-20M，乙二酸二乙二醇酯DEGA，丁二酸二乙二醇酯DEGS，1,2,3-三（2-氰乙氧基）丙烷（TCEP)。这12中固定液的特点是在较宽的温度范围内稳定，并占据了固定液的全部极性范围。此工作说明，每个实验室只要储存少量标准固定液，就可满足绝大部分分析任务的要求。（自己加一句，或许如果转成工艺，只是按照相似的固定液考虑一下成本，或许也可以转化一下。考虑一下成本，一下用途，找一些可以使用的相似的固定液就可以吧。没有学过，只是自己脑里这样闪过）

在选择固定液时，针对不同的分析对象和分析要求，可按如下原则考虑：

1根据“相似性原则”，被分离的组分为非极性物质时，应选用非极性固定液，组分流出色谱柱的先后次序，一般符合沸点规律，即低沸点的先流出，高沸点的后流出（色散力起作用）。若被分离的组分为极性物质，应选用极性固定液，被分离组分流出色谱住的先后次序，一般符合极性规律，即极性弱的先流出，极性强的后流出（取向力起作用）。若被分离的物质含有极性和非极性的组分，在使用非极性固定液时，极性组分比非极性组分先流出；使用极性固定液是，非极性组分比极性组分先流出。用异三十烷、阿匹松、十四烷、甲基苯基硅油、己二腈

β,β’-氧二丙腈等固定液分离C1~C4烃类时，皆符合上述规律。

2对能形成氢键的物质，如醇、酸、醚、醛、酮、酯、酚、胺、腈和水的分离，一般选择极性或氢键型固定液，流出顺序取决于组分与固定液分子间形成氢键能力的大小。不易形成氢键的先流出，易形成氢键的后流出。

3被分析的物质与固定液发生某种特殊作用，被选择性的分离。当被分析的物质组成复杂时，常使用混合固定液，它是由两种性质不同的适当比例混合而成的固定液，此时可将固定液的极性、氢键结合能力或特殊作用性能调节到我们所要求的范围内，使其对给定混合物的分离既有比较满意的选择性，又不致使分析时间拖得过长。

英文名:MACROGOL 400

来源(分子式)与标准:

本品为环氧乙烷和水缩聚而成的混合物

分子式以HOCH2(CH2OCH2)nCH2OH表示，其 中n 代表氧乙烯基的平均数

性状:

本品为无色或几乎无色粘稠液体；略有特殊臭

本品在水或乙醇中易溶，在乙醚中不溶

相对密度本品的相对密度（附录Ⅵ A）为1.110～1.140

粘度本品的运动粘度（附录Ⅵ G第一法），在40℃时（毛细管内径为0.8mm），应为37～45mm2/s

检查:

平均分子量 取本品约1.2g，精密称定，置干燥的250ml 具塞锥形瓶中 ，精密加邻苯二甲酸酐的吡啶溶液（取邻苯二甲酸酐14g，溶于无水吡啶100ml 中，放 置过夜，备用）25ml，摇匀，置沸水浴中，加热30～60分钟，取出冷却，精密加入氢氧 化钠滴定液(0.5mol/L)50ml，以酚酞的吡啶溶液(1→100)为指示剂，用氢氧化钠滴定液 （0.5mol/L）滴定至显红色，并将滴定的结果用空白试验校正。供试量(g) 与4000的乘 积，除以消耗氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)的容积(ml)，即得供试品的平均分子量，应为 380 ～420

酸度

取本品1.0g,加水20ml溶解后,依法测定(附录Ⅵ H),pH值应为4.0～7.0

溶液的澄清度与颜色

取本品5.0g，加水50ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，与2 号浊度标准液（附录Ⅸ B）比较，不得更浓；如显色，与黄色2 号标准比色液（附 录Ⅸ A第一法）比较，不得更深

乙二醇与二甘醇 取乙二醇与二甘醇各50mg，置100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另取本品4.0g，置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取上述溶液，照气相色谱法〔附录Ⅴ E(4) 法〕，以硅藻土为载体，山梨醇 为固定液，在柱温160 ℃测定。含乙二醇与二甘醇均不得超过0.25％(g/g)

炽灼残渣

不得过 0.2％（附录Ⅷ N）。

重金属 取本品4.0g，加盐酸溶液(9→1000)5ml与水适量，溶解后，用稀醋酸或氨 试液调节pH至3.0 ～4.0 ，再加水稀释至25ml，依法检查（附录Ⅷ H第一法），含重金 属不得过百万分之五

砷盐

取本品0.67g，置凯氏烧瓶中，加硫酸5ml,用小火消化使炭化，控制温度不 超过120 ℃（必要时可添加硫酸，总量不超过10ml），小心逐滴加入浓过氧化氢溶液，俟反应停止，继续加热，并滴加浓过氧化氢溶液至溶液无色，冷却，加水10ml，蒸发至浓烟发生使除尽过氧化氢，加盐酸5ml 与水适量，依法检查（附录Ⅷ J第一法），应符 合规定（0.0003％）

类别:药用辅料

是最常用的细胞学固定液，能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，但核蛋沉淀后，能溶于水，因此，经95%酒精固定的涂片，染色前没有必要经过水洗。此固定液适用于苏木素-伊红染色和巴氏染色。固定时间根据标本的不同，时间也不尽相同，一般标本固定时间为15-30分钟，痰标本需要更长一些时间。经过95%酒精固定的标本，细胞核保存较好，结构清晰，颜色鲜艳。如果在95%酒精液内加入聚乙二醇更佳，可以保护细胞免受空气干燥后的人工假象。

2、乙醚酒精液（1：1）：

其效果与95%酒精相似，但由于乙醚有很强的吸水性和特有的刺激性气味，容易挥发，长期低浓度吸入，有头痛、头晕、疲倦、嗜睡、蛋白尿、红细胞增多等不良反应。长期皮肤接触，可发生皮肤干燥、皲裂。所以现在已经逐渐被95%酒精所代替。

3、甲醇：

　固定时间快，细胞收缩小，细胞核保存较好，结构清晰，染色鲜艳。常作为穿刺细胞涂片的固定液。对抗原保存较好，可作为细胞涂片免疫组化的固定液。缺点是具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对中枢神经有一定的伤害。甲醇的毒性与其代谢产物甲醛和甲酸的蓄积有关。以前认为毒性作用主要为甲醛所致, 甲醛能抑制视网膜的氧化磷酸化过程,使膜内不能合成ATP,细胞发生变性,最后引起视神经萎缩。近年研究表明,甲醛很快代谢成甲酸,急性中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害，主要与甲酸含量相关。

4、冰醋酸：5%水溶液可作固定用。不能沉淀白蛋白，但能沉淀核蛋白。渗透性强，固定快，能使红细胞膨胀而破碎，常与其它液体配合使用。

4、无水酒精：

　对糖原保存较好，容易使细胞收缩，其性能与95%酒精相似，很少单独使用，一般只用于糖原的固定。

5、丙酮：

　为易挥发的无色液体，有刺激性气体。可使蛋白质沉淀，渗透性强，细胞收缩严重，对核的固定差。很少用于常规细胞学的固定。广泛用于酶组织化学中的各种酶的固定，也有人用于抗原的保存，作为细胞涂片免疫组化的固定液。丙酮具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害。

6、Carnoy 固定液

配方：无水乙醇60ml，氯仿30ml，冰醋酸10ml。

Carnoy液能固定胞浆和胞核，尤其适宜于染色体等。常用于糖原及尼氏体的固定，由于冰醋酸能溶解红细胞并可防止细胞由酒精引起的过渡收缩，对固定有血的标本和显示DNA、RNA效果很好。缺点是每次固定后固定液内有大量的红细胞碎片和细胞脱落，必须及时过滤，否则容易造成污染。其次，氯仿具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害。

7、10%中性缓冲甲醛液：

固定液配方1：40%甲醛10ml，0.01mol/L pH7.4的PBS90ml。

固定液配方2：40%甲醛120ml，蒸馏水880ml，磷酸二氢钠（NaH2PO4•H2O）4g，磷酸氢二钠（Na2HPO4）13g。

10%中性缓冲甲醛液对大多数抗原保存较好，是免疫组织化学最常用的固定液，组织穿透性好，组织收缩较小。但此液体不适合固定湿固定的涂片，可作为干固定涂片和细胞蜡块的固定液。甲醛也具有挥发性和毒性。大量吸入会出现呼吸道的严重刺激和水肿、眼刺痛、头痛，也可发生支气管哮喘。经常吸入少量甲醛，能引起慢性中毒，出现粘膜充血、皮肤刺激症、过敏性皮炎、指甲角化和脆弱、甲床指端疼痛等。全身症状有头痛、乏力、胃纳差、心悸、失眠、体重减轻以及植物神经紊乱等。

一、烃类： 是非极性固定液，包括烷烃和芳烃。常用的有角鲨烷（相对极性定为零）、石蜡烷和聚乙烯等。

二、硅氧烷类： 是通用型固定液，从弱极性到极性都有，种类多，使用温度较高，溶解能力强，使用范围广。

1、聚二甲基硅氧烷类： 目前使用最广泛的固定液，可使用温度范围大，对一般的有机化合物有较好的溶解能力。 常用的固定液有：SE-30、OV-1、OV-101、SP2100、SF-96、DC-200和UCW982等。

2、聚苯基甲基硅氧烷类： 由于硅原子上引入了苯基，与甲基硅酮相比较，芳香化合物的溶解度升高，极性组分保留值增大。 适合分离甾体化合物、生物碱、醇类和糖类等化合物。 按苯基含量不同可分为三类：

（1）低苯基聚硅氧烷类（苯基含量＜20%）：如OV-3、OV-7、HP-5和SE-52等。 （2）中苯基聚硅氧烷类（苯基含量20%～50%）：如OV-17和DC-550等。

（3）高苯基聚硅氧烷类（苯基含量＞50%）：如OV-22和OV-25等。

3、氟烷基聚硅氧烷类： 是中等极性固定液，给质子能力很强，对硝基化合物和酮类有显著的选择性保留，对芳烃和醇类则否。 比较常用的是QF-1。

4、氰烷基聚硅氧烷类： 是极性较强的固定液，由于含有电负性的氰基，对极性组分有较强的定向力，对含芳香基和烯基化合物保留较强。 适合从复杂的烃类混合物中分离不饱和烃与芳烃，适合分离不饱和脂肪酸，适合分离糖类、醇类、酚类、甾体化合物和脂肪酸等。 比较常用的是OV-225。

三、醇类： 是氢键型固定液，分非聚合醇类与聚合醇类。 聚乙二醇类的相对极性为++++，适合分离醇类、醛类、脂肪酸类、酚类、生物碱类、酯类等化合物。 最常用的是PEG-20M，药物分析中最常用的气相色谱仪固定液。

四、酯类： 是中强极性固定液，分非聚合酯类与聚合酯类。

1、非聚合酯类：常用的有邻苯二甲酸酯，如DNP，是分析低沸点化合物最常用的固定液之一。

2、聚合酯类：常用的有线性脂肪族聚酯，如DEGS，适合分离醇类、酚类、脂肪酸类、酯类和胺类等化合物。