硫乙醇酸盐流体培养基的培养温度是多少?
硫乙醇酸盐流体培养基的培养温度是30-35℃。
液体硫乙醇酸盐培养基(FT)
成分
胰酶消化酪蛋白胨 15.0gL-胱氨酸 0.5g
无水葡萄糖 5.0g酵母膏 5.0g
氯化钠 2.5g硫乙醇酸钠 0.5g
新配置的0.1%刃天青(Resazurin) 1.0ml琼脂 0.75g
蒸馏水 1000mL
制法
除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解 ,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调节pH,使灭菌后在25°C的pH值为7.1 土0.2。分装至适宜的容器中,其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层(粉红色)不超过培养基深度的 1/2。灭菌。在供试品接种前,培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5,否则,须经100°C水浴加热至粉红色消失(不 释 过 2 0 分钟),迅速冷却,只限加热 一次,并防止被污染。除另有规定外,硫乙醇酸盐流体培养基置30〜 35°C培养。
硫乙醇酸盐流体培养基的培养温度是30-35℃。
液体硫乙醇酸盐培养基(FT)
成分
胰酶消化酪蛋白胨 15.0gL-胱氨酸
0.5g
无水葡萄糖 5.0g酵母膏 5.0g
氯化钠 2.5g硫乙醇酸钠 0.5g
新配置的0.1%刃天青(Resazurin) 1.0ml琼脂 0.75g
蒸馏水 1000mL
制法
除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解
,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调节pH,使灭菌后在25°C的pH值为7.1
土0.2。分装至适宜的容器中,其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层(粉红色)不超过培养基深度的
1/2。灭菌。在供试品接种前,培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5,否则,须经100°C水浴加热至粉红色消失(不
释
过
2
0
分钟),迅速冷却,只限加热
一次,并防止被污染。除另有规定外,硫乙醇酸盐流体培养基置30〜
35°C培养。
制作硫乙醇酸盐流体培养基时,需要注意以下问题:
(1)硫乙醇酸盐流体培养基有少量的的琼脂,在灭菌后,培养基应呈现无浑浊状态,如果放置一段时间,出现轻微浑浊,尤其是放入冰箱后,浑浊现象更加明显。浑浊程度一方面可能与培养基用的琼脂质量有关,另一方面也可能与灭菌是否彻底有关,应具体分析。如果是前者可考虑更换培养基厂家或批号、或者更换琼脂,如果是后者则应检查仔细灭菌操作和灭菌设备。
(2)培养基在灭菌后至使用过程中取放应避免摇晃,以免培养基因振动而进入氧气,影响培养基的使用,接种操作应动作迅速、敏捷,否则暴露在空气中过长,培养基被氧化。
2.分装的时候要边搅拌边分装。
3.灭菌好后使用前发现红色层过多(超过整个层高的1/5),可在沸水浴中加热一次(仅一次,时间不得过20分钟)。
1,瓶子上部空间不够,氧气不足以形成氧化层
2,指示剂失效(有可能是产品质量问题或灭菌过度造成)
3,瓶子高度不够或流体粘度不够,导致氧化层过深,使得培养基整体变色,看不出氧化层。
时间长了以后还是要出现的,很薄的一层氧化层的。如果一直都没有的话,或者说你在使用时接触空气都没有变色的话,那就要考虑是不是试剂、配制方法等方面是不是有问题了
敏感菌并不是特定的细菌,而是相对某种药物而言的。对于某一种抗生素药物具有有效反映的细菌,就是这种药物的敏感菌。也就是某种药物对某种细菌有效的话,那么这类细菌就称为这类药物的敏感菌。
如青霉素类抗生素的敏感菌主要是革兰氏阳性菌;而流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、沙门菌属则对甲砜霉素敏感,它们是甲砜霉素的敏感菌。
敏感菌在抗生素抑菌试验中的应用。在抗生素无菌检查中选择最合适的阳性对照菌,以保证无菌检查方法的可行性。根据抗生素对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的MIC值的比较,选择最敏感的菌作为该品种的阳性对照菌,并给出选择阳性对照菌的依据。
结论:为不同种类抗生素无菌检查中阳性对照菌的选择提供了参考依据,可明显降低假阴性结果的产生,确保了检验方法的有效性和结果的准确性。
扩展资料:
抗生素滥用,使环境中含有抗生素,会造成两大后果。
第一,直接损害人体健康。环境中残留的抗菌药可能通过食物链进入人体,而且抗菌药属于化学药物,人类长期暴露在含有抗菌药的环境中,对身体健康不利,比如儿童长期暴露在抗菌药环境中,患肥胖、哮喘的几率将增加。
第二,加重耐药难题。抗菌药杀死的是敏感菌,耐药菌却可能“安然无恙”,继续在细菌、动物和人类之间传播。很明显,滥用抗生素等于是在慢性自损,必须想尽办法扭转目前的滥用局面。
参考资料来源:百度百科-敏感菌株
1. 硫乙醇酸盐流体培养基
酪胨 (胰酶水解) 15.0g 酵母浸出粉 5.0g
葡萄糖 5.0g 氯化钠 2.5g
L-胱氨酸 0.5g 新配制的 0.1% 刃天青溶液 1.0ml
硫乙醇酸钠 0.5g 琼脂 0.75g
(或硫乙醇酸) ( 0.3 ml) 纯化水 1000ml
除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解,调节 pH 为弱碱性,煮沸,滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调节 pH 值使灭菌后为 7.1±0.2。分装至适宜的容器中,其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层(粉红色)不超过培养基深度的 1/2。灭菌。在供试品接种前,培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的 1/5,否则,须经 100℃水浴加热至粉红色消失(不超过 20 分钟) ,迅速冷却,只限加热一次,并防止被污染。除另有规定外,硫乙醇酸盐流体培养基置 30~35℃培养。
2. 胰酪大豆胨液体培养基
胰酪胨 17.0g 氯化钠 5.0g
大豆木瓜蛋白酶消化物 3.0g 磷酸氢二钾 2.5g
葡萄糖(一水合/无水) 2.5g (2.3g) 纯化水 1000mL
除葡萄糖外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为7.3±0.2,加入葡萄糖,分装,灭菌。
胰酪大豆胨液体培养基置 20~25℃培养。
3. 选择性培养基
按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基的处方及制法,在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂,其用量同方法适用性试验。
4. 0.5%葡萄糖肉汤培养基(用于硫酸链霉素等抗生素的无菌检查 )
胨 10.0g 氯化钠 5.0g
葡萄糖 5.0g 水 1000 ml
牛肉浸出粉 3.0g
除葡萄糖外,取上述成分混合,微温溶解,调节 pH 为弱碱性,煮沸,加入葡萄糖溶解后,摇匀,滤清,调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为 7.2±0.2,分装,灭菌。
5. 胰酪大豆胨琼脂培养基
胰酪胨 15.0g 氯化钠 5.0g
大豆木瓜蛋白酶水解物 5.0g 琼脂 15.0g
纯化水 1000ml
除琼脂外,取上述成分,混合。微温溶解,调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为 7.3±0.2,加入琼脂,加热溶化后,摇匀,分装,灭菌。
6.沙氏葡萄糖液体培养基
动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物 10.0g
葡萄糖 20.0g 纯化水 1000mL除葡萄糖外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为 5.6±0.2,加入葡萄糖,摇匀,分装,灭菌。
7. 沙氏葡萄糖琼脂培养基
动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物 10.0g
葡萄糖 40.0g 纯化水 1000mL
琼脂 15.0g
除葡萄糖、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节 pH 值使灭菌后
在 25 ℃ 的 pH 值为 5.6±0.2,加入琼脂,加热溶化后, 再加入葡萄糖,摇匀,分
装,灭菌。
敏感菌并不是特定的细菌,而是相对某种药物而言的。对于某一种抗生素药物具有有效反映的细菌,就是这种药物的敏感菌。也就是某种药物对某种细菌有效的话,那么这类细菌就称为这类药物的敏感菌。
如青霉素类抗生素的敏感菌主要是革兰氏阳性菌;而流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、沙门菌属则对甲砜霉素敏感,它们是甲砜霉素的敏感菌。
敏感菌在抗生素抑菌试验中的应用。在抗生素无菌检查中选择最合适的阳性对照菌,以保证无菌检查方法的可行性。
扩展资料:抑细菌试验采用薄膜过滤法:取少量冲洗液打湿滤膜,将上述供试品溶液,全量通过一次性使用的全封闭集菌培养器的一个滤器。然后用0.9%无菌氯化钠溶液50mL/次冲洗滤膜数次,每次均用力振摇;
使可能附着在培养器壁上的抑菌成分冲掉,记录所用的冲洗液总量。将灭菌的硫乙醇酸盐液体培养基100mL加入集菌培养器内(该集菌培养滤桶为此次试验的样品管),该联集菌培养器的余下的滤桶依上述方法操作,作为平行样品管。
另取2联滤器,分别加入灭菌的硫乙醇酸盐液体培养基各100mL(该集菌培养滤桶称为此次试验的阳性管)。再取一单联的滤器。过冲洗液300mL,加入灭菌的硫乙醇酸盐液体培养基各100mL(该集菌培养滤桶称为此次试验的阴性管)。
参考资料:百度百科---敏感菌株
1、 从储藏室(2-25℃)取出接触皿,并恢复至室温。
2、 将包装整体送入取样地点,在此过程中逐步去掉外面两层包装,最后一层包装在操作间打开。
3、 打开接触皿上盖,使培养基表面与取样面直接接触,均匀按压接触皿底板,确保全部琼脂表面与取样点表面均匀接触10s左右,再盖上皿盖。
4、 在接触皿磨砂区域标记取样地点、取样时间和取样人。
5、 用消毒剂或杀孢子剂擦拭测试区域,以消除培养基的残留。
6、 将接触皿从洁净室取出,置于培养箱中按规定的温度和时间培养。
7、 培养结束后,从培养箱中取出观察、计数。