Tris-乙酸 配制

1.

称量Tris

48.4g，Na2EDTA·2H2O

7.44g

于1L烧杯中；

2.向烧杯中加入约800ml去离子水，充分搅拌溶解；

3加入11.4ml的冰醋酸，充分搅拌；

4.用去离子水定容至1L后，室温保存，待用。

三羟甲基氨基甲烷试剂，三羟甲基氨基甲烷（Tris）是一种应用非常广泛的有机试剂，它的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。它及其衍生物被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备，可用于制作药物、有机合成、生物缓冲剂等。

其中在生化实验中，许多蛋白质及核酸相关的实验都需要用Tris作为生物缓冲剂。它甚至有超过磷酸盐缓冲液的趋势，因为它有好的缓冲能力、毒性低、对生物反应的干扰极低，而且纯度很高。有超过磷酸盐的趋势，如在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中都已开始实验TRIS缓冲液，很少再用磷酸盐。

TRIS（三羟甲基氨基甲烷）的应用

① 在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定P值；

② 在凝胶中使用TRIS-HCL缓冲体系稳定PH值；

③ 被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂；

④ TRIS缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成；

⑤ 在TRIS盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，可用于DNA的稳定和储存；

⑥ 将调节PH值的酸溶液换成乙酸，获得“TAE缓冲液”，换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种溶液常用于核酸电泳实中。

242g Tris碱

57.1ml冰乙酸

100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

是配置1L 50x的缓冲液

使用的时候取决于你的容器有多大，一般用一个2L的试剂瓶的话，就是40ml储存液+水补满到2L，然后拼命混匀就可以倒进电泳槽作电泳缓冲液或者配置agarose TAE胶了

1、使用液（0.5×）

0.045mol/L Tris-硼酸 0.001mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀，溶液体积为1L。

2、浓贮存液（5×）

54gTris碱 27.5g硼酸 20ml 0.5mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀，NaOH调pH至8.0，溶液体积1L。

组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时，缓冲作用减小，缓冲能力降低，当c（盐）/c（酸）为1∶1时△pH最小，缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算：

此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远，缓冲能力愈小，甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系，存在有效缓冲范围，这个范围大致在pKaφ（或pKbφ）两侧各一个pH单位之内。

弱酸及其盐（弱酸及其共轭碱）体系pH=pKaφ±1

弱碱及其盐（弱碱及其共轭酸）体系pOH=pKbφ±1

参考资料来源：百度百科-tbe

参考资料来源：百度百科-缓冲液

TAE缓冲液组份浓度：2M Tris-醋酸,100mM EDTA

TAE缓冲液配方体积：1L

TAE缓冲液配制方法：

称量下列试剂,置于1 L烧杯中.

Tris：242g

Na2EDTA·2H2O：37.2g

向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解.

加入57.1 ml的醋酸,充分搅拌.

加去离子水将溶液定容至1 L后,室温保存.