二甲苯青电泳中的大小

loading buffer 里一般有两个指示剂。一个是溴酚蓝，一个二甲苯青，在琼

脂糖浓度为1%-5%时，两者的电泳速度基本恒定。溴酚蓝的速度相当于300bp的

条带，二甲苯青指示4000bp的条带。电泳时，看到一前一后的蓝带和青带既是

这两个指示剂。

二苯胺和抗坏血酸显色后出现的就是同功酶的条带了,这是利用酶的催化作用产生的颜色,其他蛋白不会显示出来.

溴酚蓝指示的条带不水平,可能原因很多,比如胶聚合不均匀,电泳电压过大,样品或点样缓冲液有问题等等都有可能.

这种问题真的不好直接用文字回答你。首先你要搞明白为什么要电泳，电泳的目的是什么。我不知道你有没有亲自做过电泳，首先希望你先查询下如何DNA电泳。在DNA电泳前，

在需要电泳的DNA溶液里加上loading buffer，目的是在电泳时可以看到指示带，有两条：跑在前面的蓝色条带是溴酚蓝,位置大约相当于300bp的DNA,后面的绿色条带是二甲苯青FF,相当于4000bp左右大小DNA的位置。

2. 在制备琼脂糖胶时，需要加入EB，EB可以与DNA结合，在紫外灯下显示DNA位置，也就是你说的白色条带。

3. 现在有些实验室用一些新型染料（EB有毒），可以用蓝光而不是紫外观察条带，这个时候看到的DNA条带其实是淡蓝色的，不是白色的。

不知道你明白没有?     我要看文献了，下午老板要找我谈话。。。。。

1.溶液Ⅰ:50mM葡萄糖,25mM Tris-HCl(pH 8.0),10mM EDTA(pH 8.0）.1M Tris-HCl(pH 8.0）12.5ml,0.5M EDTA（pH 8.0）10ml,葡萄糖4.730g,加ddH2O至500ml.在10 lbf/in2高压灭菌15min ,贮存于4℃.

2.溶液Ⅱ：0.2N NaOH,1% SDS.2N NaOH 1ml,10%SDS 1ml,加ddH2O至10ml.使用前临时配置.

3.溶液Ⅲ：醋酸钾（KAc）缓冲液,pH 4.8.5M KAc 300ml,冰醋酸 57.5ml,加ddH2O至500ml.4℃保存备用.

4.TE：10mM Tris-HCl(pH 8.0),1mM EDTA(pH 8.0).1M Tris-HCl（pH 8.0）1ml,0.5M EDTA（pH 8.0）0.2ml,加ddH2O至100ml.15 lbf/in2高压湿热灭菌20min,4℃保存备用.

5.苯酚/氯仿/异戊醇（25：24：1）

6.乙醇（无水乙醇、70%乙醇）

7.5×TBE：Tris 碱54g,硼酸27.5g,EDTA-Na2·2H2O 4.65g,加ddH2O 至1000ml.15 lbf/in2高压湿热灭菌20min,4℃保存备用.

8．溴化乙锭（EB）：10mg/ml

9.RNase A（RNA酶A）：不含DNA酶(DNase-free) RNase A的10mg/ml,TE配制,沸水加热15min,分装后贮存于-20℃.

10.6×loading buffer（上样缓冲液）：0.25%溴酚蓝,0.25%二甲苯青FF,40%（W/V）蔗糖水溶液.

11.1% 琼脂糖凝胶：称取1g琼脂糖于三角烧瓶中,加100ml 0.5×TBE,微波炉加热至完全溶化,冷却至60℃左右,加EB母液（10mg/ml）至终浓度0.5μg/ml（注意：EB为强诱变剂,操作时带手套）,轻轻摇匀.缓缓倒入架有梳子的电泳胶板中,勿使有气泡,静置冷却30min以上,轻轻拔出梳子,放入电泳槽中（电泳缓冲液0.5×TBE）,即可上样.

溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状dna相同,而二甲苯青ff的泳动则与长4kb的双链线状dna相同。

希望能够对你有所帮助。