50mM的β巯基乙醇怎么配
50mM的β巯基乙醇配置:算出来mol,然后最好用移液枪配制浓溶液,然后稀释后用,这样可以配制减少误差。比如液体的纯度是90%,密度是0.8,我们就可以知道1ml液体含有多少羟基乙醇(m=pV*0.9),然后n=m/M,最后c=n/V。
如果你要跑还原性电泳,样品需要用含有β-巯基乙醇的loading buffer沸煮5分钟,这样使蛋白间的二硫键在还原剂β-巯基乙醇的作用下被打开,得到的是蛋白的一级结构。
而非还原的电泳就是在loading buffer中不加入还原剂β-巯基乙醇,这样的电泳比较能够真实的反应蛋白当时的情况,比如二聚体或者多聚体之类的。
化学性质
乙醇的官能团是羟基(—OH),其化学性质主要由羟基和受它影响的相邻基团决定,主要反应形式是О—H键和C—О键的断裂。羟基的结构特征是氧的电负性很大,分子中的C—О键和O—H键都是极性键,因而乙醇分子中有2个反应中心。由于α-H和β-H受到C—О键极性的影响具有一定的活性,因此它们还能发生氧化反应和消除反应等。
以上内容参考:百度百科-2-巯基乙醇
提取RNA时,用了百分之二十五的乙醇,如果这个时候还继续提取,那么肯定会有大部分的RNA会溶于水中,导致最后提取的RNA的总量大大的降低。所以这个时候,不能马上就继续提取。你可以选择再加入双倍体积的无水乙醇,糖原等再重新冷冻沉淀一次。如果觉得体积太大,可以选择先用RNA抽提液抽提以后,再用乙醇沉淀。
巯基乙醇有毒性,呼吸多了会中毒,滴到了手上有致命危险。
巯基乙醇:危险品,经皮肤、吞咽吸收有致命危险;刺激眼睛、呼吸道粘膜,引起慢性咽炎。水白色易流动液体,具有少许硫醇气味。
应用领域:用作增塑剂及杀虫剂,也用于染料的制造。
扩展资料:
用途:
α-巯基乙醇主要用于血清学检查凝集试验。其临床意义:当其实验值>1∶50为阳性健康搜索,布氏杆菌病符合率为93.88%。
β-巯基乙醇主要用于生产低聚合度聚氯乙烯的链转移剂,腈纶的终止剂。也可用于合成高分子材料的调聚剂、聚合催化剂、交联剂及树脂固化剂等,也可用于合成橡胶、照相、医药、油漆、纺织、金属钝化剂等行业。
β-巯基乙醇在生物实验上的意义:二硫键被打开后可以使蛋白质的四级或三级结构被破坏。由于β-巯基乙醇能够打开蛋白质的结构,它常常被用于蛋白质分析。而β-巯基乙醇也常常被用于保护蛋白质中自由的半胱氨酸巯基之间不会错误形成二硫键。
作为还原剂,2-巯基乙醇常常可以与二硫苏糖醇(DTT)或三(2-甲酰乙基)膦盐酸盐(TCEP)互换使用。β-巯基乙醇是少数几种被发现可以延长小鼠寿命的化合物。在微克量级水平上,2-巯基乙醇被观察到对实验鼠的生命具有多种可能的正面效应。
参考资料来源:百度百科-巯基乙醇
(1)胍盐:a.盐酸胍;b. 异硫氰酸胍;
作用:强烈的蛋白质变性剂;
(2)重蒸酚
★区别于饱和酚
重蒸酚加入0.1%的8-羟基喹啉(作为抗氧化剂),并用等体积的0.5mol/L Tris-Cl (pH8.0)和0.1mol/L Tris-Cl(pH8.0)缓冲液反复抽提使之饱和并使其pH值达到7.6以上,主要用于DNA的抽提。
因为苯酚是酸性的,酸性条件(pH<7)下DNA会分配于有机相,故不能用重蒸酚。本实验中Trizol溶液pH<7,故要使用重蒸酚。适合RNA的抽提。
作用:有机溶剂;蛋白质变性剂;
个人觉得不要自己配了还是买trizol 试剂盒吧,自己配的麻烦还不容易操作。