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细胞培养液中蛋白的提取方法

心灵美的宝马
成就的歌曲
2022-12-22 16:53:01

细胞培养液中蛋白的提取方法?

最佳答案
还单身的水杯
美丽的小懒虫
2026-02-09 05:17:56

蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术.

1、透析袋浓缩法

利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种.将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可.也可将吸水剂配成30%-40%浓度的溶液,将装有蛋白液的透析袋放入即可.吸水剂用过后,可放入温箱中烘干或自然干燥后,仍可再用.

2、冷冻干燥浓缩法

这是浓缩蛋白质的一种较好的办法,它既使蛋白质不易变性,又保持蛋白质中固有的成分.它是在冰冻状态下直接升华去除水分.具体做法是将蛋白液在低温下冰冻,然后移置干燥器内(干燥器内装有干燥剂,如NaOH、CaCl2和硅胶等).密闭,迅速抽空,并维持在抽空状态.数小时后即可获得含有蛋白的干燥粉末.干燥后的蛋白质保存方便,应用时可配成任意浓度使用.也可采用冻干机进行冷冻干燥.

3、吹干浓缩法

将蛋白溶液装入透析袋内,放在电风扇下吹.此法简单,但速度慢,且温度不能过高,最好不要超过15 ℃.

4、超滤膜浓缩法

此法是利用微孔纤维素膜通过高压将水分滤出,而蛋白质存留于膜上达到浓缩目的.有两种方法进行浓缩:一种是用醋酸纤维素膜装入高压过滤器内,在不断搅拌之下过滤;另一种是将蛋白液装入透析袋内置于真空干燥器的通风口上,负压抽气,而使袋内液体渗出.

5、凝胶浓缩法

选用孔径较小的凝胶,如SephadexG25或G50,将凝胶直接加入蛋白溶液中.根据干胶的吸水量和蛋白液需浓缩的倍数而称取所需的干胶量.放入冰箱内,凝胶粒子吸水后,通过离心除去.

6、浓缩胶浓缩法

浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物,具有很强的吸水性能.每克干胶可吸水120 ml-150 ml.它能吸收低分子量的物质,如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等,适宜浓缩10000分子量以上的生物大分子物质.浓缩后,蛋白质的回收率可达80%~90%.比浓缩胶应用方便,直接加入被浓缩的溶液中即可.必须注意,浓缩溶液的pH值应大于被浓缩物质的等电点,否则在浓缩胶表面产生阳离子交换,影响浓缩物质的回收率.

(转的!不过也希望能帮到你)

最新回答
尊敬的月饼
拉长的鸭子
2026-02-09 05:17:56

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备有,高速组织捣碎机、匀浆器、研钵等。2.渗透破碎法这种方法是在低渗条件使细胞溶胀而破碎。3.反复冻融法生物组织经冻结后,细胞内液结冰膨胀而使细胞胀破。这种方法简单方便,但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。4.超声波法使用超声波震荡器使细胞膜上所受张力不均而使细胞破碎。5.酶法如用溶菌酶破坏微生物细胞等。(二)蛋白质的抽提通常选择适当的缓冲液溶剂把蛋白质提取出来。抽提所用缓冲液的pH、离子强度、组成成分等条件的选择应根据欲制备的蛋白质的性质而定。如膜蛋白的抽提,抽提缓冲液中一般要加入表面活性剂(十二烷基磺酸钠、tritonX-100等),使膜结构破坏,利于蛋白质与膜分离。在抽提过程中,应注意温度,避免剧烈搅拌等,以防止蛋白质的变性。

土豪的裙子
酷炫的小鸭子
2026-02-09 05:17:56
药用聚乙二醇

组成:乙二醇和环氧乙烷聚合物别名:碳蜡、PEG

结构式:CH2(OH)-(CH2CH2O)n -CH2OH

目前加工系列产品有:

PEG-4000 120~400(目)

PEG-6000 120~500(目)

PEG-8000 120~600(目)

PEG-20000 120~800(目)

性状及用途:

聚乙二醇系列产品通常情况下溶于水和多种有机溶剂,不溶于脂肪烃、苯、乙二醇等,不会水解变质,有广泛的溶解范围和优良的相容性、很好的稳定性、润滑性、成膜性、增塑性、分散性等。系低毒物质,且无刺激性,属非离子型聚合物。

应 用:

聚乙二醇的应用有两种方式:一种是PEG包含在最终产品中,例如:医药用的油膏、软膏、洗液、栓剂、片剂和非肠道用溶液;在化妆品中的牙膏、发乳、除臭剂、洗净膏;造纸工业中用于压光纸;尼龙纤维、赛璐璐薄膜、粘合剂、洗涤剂、焊剂、清漆及照相显影剂等。另一种是为许多产品提供润滑性,如:金属、瓷砖、瓷品的成形润滑剂,纺丝和纺织纤维、制轮胎和医疗外科缝线的润滑剂,乳胶泡沫制成的脱膜剂等。

聚乙二醇200:可作为有机合成的介质及有较高温度要求的热载体,在日用化学工业作保湿剂和无机盐增溶剂,粘度调节剂。在纺织工业中用作柔软剂、抗静电剂、造纸与农药工业中润湿剂。

聚乙二醇400、600:用作医药,化妆品的基质,橡胶与纺织工业的润滑剂和润湿剂。600在木材工业中作保湿剂,在金属工业加于电解液中可增强研磨效果,增强金属表面的光泽。

聚乙二醇1000-1500:在医药、纺织、化妆品工业中用作基质或润滑剂、柔软剂;涂料工业中作分散剂,改进树脂的水分散性、柔韧性,用量为10-30%;油墨中可提高染料的溶解能力,降低其挥发性;在蜡纸和印台油墨中尤为适用;也可在圆珠笔油墨中作调节油墨粘稠度用;橡胶工业用作分散剂,以促进硫化作用,以及用作碳黑填充料的分散剂。

聚乙二醇2000-3000:用作金属加工铸膜剂,金属拉丝、冲压或成型的润滑剂及切削液,研磨冷却抛光剂、焊接剂,造纸工业中作润滑剂。

聚乙二醇4000-6000:在医药、化妆品工业中用作基质,起调节粘度、熔点的作用。在橡胶、金属加工工业中作润滑剂、冷却剂,在农药、颜料工业生产中作分散剂、乳化剂,纺织工业中用作抗静电剂、润滑剂。

包装及贮存:

聚乙二醇200-600用50kg塑料桶;聚乙二醇1000用10kg塑料桶;聚乙二醇1500-6000用25kg纸袋。贮存于阴凉、干燥处,注意防火,避免与热和氧化物接触。

直率的小松鼠
细心的冰棍
2026-02-09 05:17:56
聚乙二醇又名α-氢-ω-羟基(氧-1,2-乙二基)的聚合物、聚氧化乙烯(PEO-LS)。是平均分子量在约200到至少6000的乙二醇高聚物的总称。品种很多,例如聚乙二醇300(PEG300)、聚乙二醇600(PEG600)、聚乙二醇20 000(PEG20M),PEG后面数字表示平均分子量。常用的除上述外,还有1000,1500,2000,4000,6000等。随着平均分子量的不同,性质也有差异。无色无臭粘稠液体至蜡状固体。溶于水、乙醇和许多其他有机溶剂。蒸汽压低。对热稳定。与许多化学品不起作用,不水解,不变质。无毒,对眼睛和皮肤无明显刺激。 聚乙二醇的生产工艺:由液体乙二醇在高温及高压或低压下聚合而得。 聚乙二醇的用途:可用作增塑剂、软化剂、增湿剂,并用于制药膏和药物等。

过时的枫叶
鳗鱼黑猫
2026-02-09 05:17:56

1、相对分子质量低的聚乙二醇(Mr<2000)适于用作润湿剂和稠度调节剂,用于膏霜、乳液、牙膏和剃须膏等,也适用于不清洗的护发制品,赋予头发有丝状光泽。

2、相对分子质量高的聚乙二醇(Mr>2000)适用于唇膏、除臭棒、香皂、剃须皂、粉底和美容化妆品等。

3、在清洗剂中,聚乙二醇也用作悬浮剂和增稠剂。

4、在制药工业上,用作油膏、乳剂、软膏、洗剂和栓剂的基质。

5、聚乙二醇广泛用于多种药物制剂,如注射剂、局部用制剂、眼用制剂、口服和直肠用制剂。

6、固体级别的聚乙二醇可以加入液体聚乙二醇调整黏度,用于局部用软膏;聚乙二醇混合物可用作栓剂基质;聚乙二醇的水溶液可作为助悬剂或用于调整其他混悬介质的黏稠度;聚乙二醇和其他乳化剂合用,增加乳剂稳定性。

7、聚乙二醇还用作薄膜包衣剂、片剂润滑剂、控释材料等。

扩展资料:

由于链长的影响,不同分子量的聚乙二醇往往有不同的物理性质(如黏度)及不同的应用,但大部分的聚乙二醇化学性质是相似的。低分子量的聚乙二醇通常指较纯的寡聚体,较具单分散性;高纯度的聚乙二醇具有结晶性,因此可用X-光决定其晶体结构。由于纯化和分离寡聚体聚乙二醇较为困难,因此价格通常是多分散聚乙二醇的10-1000倍。

相对分子质量在700-900之间者为半固体。相对分子质量1000及以上者为浅白色蜡状固体或絮片状石蜡或流动性粉末。混溶于水,溶于许多有机溶剂,如醇、酮、氯仿、甘油酯和芳香烃等,不溶于乙醚和正己烷。

它与疏水性分子结合后的产物可用作非离子表面活性剂。随着分子量的提高,其水溶性、蒸汽压、吸水性和有机溶剂的溶解度等相应下降,而凝固点、相对密度、闪点和黏度则相应提高。对热稳定,与许多化学品不起作用,不水解。

参考资料来源:百度百科 聚乙二醇

缓慢的外套
激昂的大炮
2026-02-09 05:17:56

聚乙二醇是α-氢-ω-羟基(氧-1,2-乙二基)的聚合物。系列产品无毒、无刺激性,味微苦,具有良好的水溶性,并与许多有机物组份有良好的相溶性。具有优良的润滑性、保湿性、分散性。化学式为HO(CH₂CH₂O)nH。

用途:

1、聚乙二醇在化妆品工业和制药工业中的应用很广泛。由于聚乙二醇具有水溶性、不挥发性、生理惰性、温和性、润滑性和使皮肤润湿、柔软、有愉快用后感等优良性质。可选取不同相对分子质量级分的聚乙二醇改变制品的粘度、吸湿性和组织结构。

2、在清洗剂中,聚乙二醇也用作悬浮剂和增稠剂。

3、在制药工业上,用作油膏、乳剂、软膏、洗剂和栓剂的基质。聚乙二醇广泛用于多种药物制剂,如注射剂、局部用制剂、眼用制剂、口服和直肠用制剂。

4、聚乙二醇的水溶液可作为助悬剂或用于调整其他混悬介质的黏稠度;聚乙二醇和其他乳化剂合用,增加乳剂稳定性。

扩展资料:

聚乙二醇的化学性质:

1、在一般条件下,聚乙二醇是很稳定的,但在120℃或更高的温度下它能与空气中的氧发生作用。在惰性气氛中(如氮和二氧化碳),即使被加热至200~240℃也不会发生变化,当温度升至300℃会发生热裂解。

2、聚乙二醇无毒、无刺激性,广泛应用于各种药物制剂中。低分子量的聚乙二醇毒性相对较大。局部应用聚乙二醇特别是黏膜给药可导致刺激性疼痛。在外用洗剂中,能增加皮肤的柔韧性,并具有与甘油类似的保湿作用。

3、随着分子量的提高,聚乙二醇的水溶性、蒸汽压、吸水性和有机溶剂的溶解度等相应下降,而凝固点、相对密度、闪点和粘度则相应提高。热稳定性好,与许多化学品不起作用,不水解。

参考资料来源:百度百科-聚乙二醇

潇洒的楼房
谦让的手链
2026-02-09 05:17:56
具有疏水性基团的中性脂肪切片的制作通常采用冰冻切片或碳蜡包埋切片,能更好防止脂肪被溶解并有效地将脂肪保存下来,有利于脂肪的显示。使用恒温冷冻切片机切片,所切组织贴附在载玻片上直接染色。FCa固定后组织恒温冷冻切片机切片(厚度10 μm~15 μm) 染色;新鲜组织恒温冷冻切片机切片(厚度6 μm~8 μm),冷FCa固定后染色。碳蜡(聚乙烯乙二醇)包埋切片,组织无需经过脱水、透明等步骤,在50℃温箱中用不同比例的碳蜡作连续浸透后包埋,由于碳蜡溶于水,在制片过程中切片不能在水中进行裱片,需在特殊液体中裱片,但在组织切片上容易产生皱褶而不平整,影响对切片的观察,这种方法现已很少使用。在石蜡包埋切片中仍可保存相当数量的髓鞘磷脂、脑苷酯、神经节苷酯等具有亲水性基团的复合脂质,用其他组织化学染色方法可显示出来

聪慧的自行车
谨慎的自行车
2026-02-09 05:17:56
第一,聚乙二醇缩写PEG,聚丙二醇缩写PPG,乙谐音E,那PEG肯定就是聚乙二醇啦!其次是物理状态,聚丙二醇PPG系列,无论分子量大小都是无色透明油状粘稠液体。而聚乙二醇PEG系列,分子量200-600之间的都是无色透明液体,分子量800、1000为乳白色膏状物、分子量1000以上的都是乳白色固状物,对此他们的包装方式也是不一样的。聚丙二醇系列是用200kg铁桶、50kg塑料桶包装。而聚乙二醇系列,根据分子量不同,包装也各不相同,分子量为200-1500之间采用200kg铁桶或50kg塑料桶包装。分子量为2000-8000,则是在切片后用20-25Kg编织袋包装。当然他们性能上很有区别,PEG系列主要用于药剂、药膏、日用化学、橡胶工业等,而PPG用于日化、医药和油剂的基料。

激情的八宝粥
俭朴的音响
2026-02-09 05:17:56
聚乙二醇的物理性质:

熔点

64-66℃

沸点

>250℃

密度

1.27 g/mL at 25℃

蒸气密度

>1 (vs air)

蒸气压

<0.01 mm Hg ( 20℃)

折射率

n=1.469

闪点

270℃

储存条件

2-8℃

溶解度

H2O: 50 mg/mL, 澄清, 无色

形态

粘稠液体→蜡状固体

敏感性

吸湿性

Merck

147568

稳定性

稳定,会被强氧化剂氧化

聚乙二醇系列产品无毒、无刺激性,味微苦,具有良好的水溶性,并与许多有机物组份有良好的相溶性。它们具有优良的润滑性、保湿性、分散性、粘接剂、抗静电剂及柔软剂等,在化妆品、制药、化纤、橡胶、塑料、造纸、油漆、电镀、农药、金属加工及食品加工等行业中均有着极为广泛的应用。