二甲苯青电泳中的大小
大小为538.611。二甲苯青是核酸电泳常用的指示剂,根据其迁移情况,推断样品的电泳进程,决定电泳时间。其水溶液呈蓝色,分子量为554.6,在1%和1.4%琼脂糖凝胶中电泳时,其迁移率分别与2kb和 1.6kb的双链线性DNA大致相似。
一个是溴酚蓝,一个二甲苯青,在琼脂糖浓度为1%-5%时,两者的电泳速度基本恒定。溴酚蓝的速度相当于300bp的条带,二甲苯青指示4000bp的条带。电泳时,看到一前一后的蓝带和青带既是这两个指示剂。
荧光染料EB染色的优点是安全灵敏,可以代替溴化乙锭EB作为各种核酸电泳的染色剂,缺点是,他有一定的毒性,对人体有害。
EB染料常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色,溴酚兰在碱性液体中呈紫兰色,在0.6%1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同。
二甲苯青的水溶液呈兰色,它在1%和1.4%琼脂糖中电泳时,其迁移速率分别与2Kb和1.6Kb的双链线性DNA大致相似。
荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质,它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物,荧光染料可以单独使用,也可以组合成复合荧光染料使用。
荧光染料常用于荧光染料产品的制备,以及增白洗衣粉中的增白剂,指示信号用的各种荧光路标漆,荧光标志服等。
荧光染料的其他用途包括,渗漏污水系统包括水和工业的污染物、连接系统、测量发电厂排出的液体、洗手间的渗漏、非法的连接污水管监察,研究流量和绘图,分析腐败的系统,此外还用于纤维织物印染和某些特种标志如暗处符号及军事追踪等。
脂糖浓度为1%-5%时,两者的电泳速度基本恒定。溴酚蓝的速度相当于300bp的
条带,二甲苯青指示4000bp的条带。电泳时,看到一前一后的蓝带和青带既是
这两个指示剂。
二苯胺和抗坏血酸显色后出现的就是同功酶的条带了,这是利用酶的催化作用产生的颜色,其他蛋白不会显示出来.
溴酚蓝指示的条带不水平,可能原因很多,比如胶聚合不均匀,电泳电压过大,样品或点样缓冲液有问题等等都有可能.