乙醇钠的碱性强弱

一、【实验探讨】

有所学知识可知，分子式为C2H6O的结构简式有两种：CH3CH2-OH,CH3-O-CH3。由结构式可知，当乙醇的结构式为第一种情况时，则与钠反应断开的键为羟基上的氢氧键，则产生氢气的量与所用乙醇的量的关系为2:1的；若乙醇的结构式为第二种情况，则因为所有氢的化学环境相同，则产生氢气的量与所消耗的乙醇的量为3:1的关系。因此，有以上分析我们可知，当产生氢气的量与加入乙醇的量为2:1的关系时，乙醇的结构式为CH3CH2-OH，当产生氢气的量与加入乙醇的量的3:1的关系时，则乙醇的结构式为CH3-O-CH3。

二、【实验原理】

钠与乙醇反应，生成乙醇钠并逸出氢气。由于生成的乙醇钠包在钠的表面，使反应缓慢，甚至中止。采用加热（使钠与乙醇钠熔融）与搅拌的方法，改进集气装置，能有效地提高氢气得率。

三、【实验装置】

四、【实验步骤及现象 】

4.1步骤

(1) 按实验装置图装好实验装置，在试管里放入已擦干煤油和去除氧化膜的钠粒（半个黄豆大小），试管的胶塞中央，插人一个事先抽入0.4mL无水乙醇的注射器。

(2) 经检查装置的气密性后，缓慢挤压注射器慢慢的加人0.1rnL无水乙醇，同时尽量摇动试管，使钠与无水乙醇充分接触一段时间后在加入一些乙醇，加入量不宜过多，速度也不宜过快，同时用量筒用排水法收集生成的氢气。当反应接近停止时，可将试管稍稍加热。等到没有气体产生、使装置冷却到室温时，准确读出量筒上的刻度，这就是室温下0.4mL无水乙醇与足量钠反应生成氢气的体积。

4.2现象 

钠与乙醇接触后钠渐渐的融化成小球，同时钠表面有大量气泡生成，反应较剧烈但是不如钠与水来的剧烈，用手摸量筒外壁有烫烫的感觉，排水法收集到了氢气的体积为47.0ml

五、【实验数据处理及结论】

5.1数据处理

（1）在量筒中总共收集到1V=47.0ml的水，即可说明实验中产生了47.0ml的氢气。 实验时室温1T=20.8℃=293.95K  大气压1P=101.330Kpa

（2）换算成标况下的氢气体积，

而0.4ml乙醇的量可产生的氢气体积（标况）

5.2结论

通过实验数据的计算可知乙醇的结果式为CH3CH2-OH。

DNA是遗传信息的载体和基本遗传物质，它在遗传变异、代谢调控等方面起着重要作用，是分子生物学和基因工程研究的对象，但无论是研究植物DNA的结构和功能，还是开展外源DNA的转化、转导的研究，首先要做的就是从植物组织中提取天然状态的高分子量的纯化DNA。因此，本实验的目的是学习植物基因组DNA提取方法、原理和DNA的鉴定技术。

Ⅰ 植物基因组DNA 的提取（CTAB法）

一、原理

植物组织中绝大部分是核DNA，它和组蛋白、非组蛋白结合在一起，以核蛋白（即染色质或染色体）的形式存在于细胞核内。CTAB(十六烷基三甲基溴化铵，hexadecyltrimethylammonium bromide，简称CTAB)：是一种阳离子去污剂，可溶解细胞膜，它能与核酸形成复合物，在高盐溶液中(0.7mol/L NaCl)是可溶的，当降低溶液盐的浓度到一定程度(0.3mol/L NaCl)时从溶液中沉淀，通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白、多糖类物质分开，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液中，再加入乙醇使核酸沉淀，CTAB能溶解于乙醇中。

在DNA提取过程中必须始终注意以下几个关键问题：

（1）DNA的二级结构和双链易受多种因素（如强酸、强碱、加热、低盐浓度、有机溶剂、酰胺类、尿素等）的影响引起双链解开，即“变性”，因此抽提时避免使用变性的条件。

（2）抑制内外源DNase的活力。DNase就象一把刀，它能把大分子的DNA切成碎片，所以要加以杜绝，现可以通过多种途径来做到这一点：a、低温操作；b、调节pH，使偏碱（pH8.0）；c、抽提液中加表面活性剂；d、加螯合剂（EDTA）除去酶的铺助因子（Mg2+），使酶活性丧失。

（3）防止化学降解。如过酸或过碱以及其它化学因素，会使DNA降解，一般综合考虑，取pH8.0左右为宜。

（4）防止物理因素降解。如温度太高或机械张力剪切等，DNA分子特别大，其分子量可达1012道尔顿，极易被机械张力拉断，甚至在细管中稍急一些的流动也会使DNA断裂，所以在抽提过程中要特别注意这一点，操作过程要尽量简便、温和、减少搅拌次数，也不要剧烈摇动。

（5）植物的次生代谢物（主要是胞质内的多酚类或色素类化合物）对核酸提取有干扰作用。因此，一般尽可能选幼嫩的、代谢旺盛的新生组织作为提取DNA的材料，这是因幼嫩的新生组织次生代谢物较少，DNA含量高，且易于破碎，植物材料最好是新鲜的。

分离提取植物DNA的方法很多，本实验采用CTAB法提取DNA并通过紫外吸收法和电泳鉴定。

二、操作方法

（1） 取200mg样品(在液氮中研磨成粉末状)放入1.5mL离心管中，加入600μL DNA提取液，颠倒混匀5-6次。65℃保温35分钟以上，其间颠倒混匀一次。

（2）再加等体积的氯仿异戊醇(24：1)溶液轻轻摇晃30秒，在4℃下10000rpm/分钟离心10分钟后，取吸上清液(450μL)

（3） 再加两倍体积的预冷异丙醇，混匀静止10分钟以上，在4℃下10000rpm/分钟离心10分钟后，弃上清。

（4） 用600μL70%乙醇洗涤沉淀，重复一次，在室温下倒置晾干。

（5）沉淀用TE溶液溶解DNA，再加入RNase至终浓度50μg/mL，在37℃下保温半小时，将DNA样品放入冰箱保存。

Ⅱ 植物DNA 纯度的鉴定——紫外分光光度计法

一、原理

由于核酸中的碱基都具有共轭双键，所以具有紫外光吸收性质。核酸在紫外光谱区有一条典型的吸收曲线，其吸收高峰在260nm处，吸收低谷在230nm处。蛋白质在紫外区的吸收高峰在280nm处，所以核酸的紫外吸收光谱数据是鉴定核酸的重要依据之一。但紫外法不能区分DNA和RNA，只能用来鉴定核酸的纯度和含量。

纯度鉴定时，需测定在230、260和280nm处的消光值，经验数据表明，

纯净的核酸溶液A260/A230的消光值比大于或等于2.0；A260/A280大于或等于1.80。A260/A280值过小，说明蛋白未脱净；A260/A230过小，说明有杂质（一般为多酚类或色素）。

含量测定时，对于纯净的DNA来说，在实际应用中可根据260nm处的消光值O.D260值换算成含量，一般认为O.D260值为1时，相当于50μg/ml。在测定核酸粗制品时，样品中残留的蛋白质和色素等与其它具紫外吸收的杂质对测定有明显干扰作用，大分子核酸制备过程中变性降解后有增色效应，因此有时此法测定的结果会高于定磷法。

二、实验材料、仪器及试剂

1、材料 植物DNA

2、器材：紫外分光光度计、移液管、试管

3、试剂：TE溶液（pH8.0）（见前述）

三、操作方法

将纯化的DNA溶液用TE（pH8.0）稀释至每毫升含5-50μg DNA浓度范围，用TE（pH8.0）作空白对照，于紫外分光光度计上测定260nm、280nm和230nm吸收值，计算A260/A230和A260/A280的比值，并换算出核酸的含量。

Ⅲ 植物DNA 分子量的测定——琼脂糖凝胶电泳法

一、原理

以琼脂糖凝胶为支持介质的电泳广泛应用于核酸研究中，其操作简单、快速，是分离、鉴定、纯化DNA的标准方法。DNA分子在高于其等电点的pH溶液带负电荷，在电场中向正极移动。DNA分子在电场中通过凝胶介质而泳动，除电荷效应外，还有凝胶介质的分子筛效应，也就是说与分子大小构象有关。实验表明DNA迁移率与其分子量的对数成反比。因此通过参比已知标准分子量的DNA迁移率，可测定样品DNA的分子量。用低浓度的荧光物质，插入性染料溴化乙锭（EB）使凝胶中DNA区带染色，在紫外光下可直接显示DNA在凝胶中的位置，灵敏度很高，可检出10ng（10-9g）或更少的DNA含量。

二、实验材料、仪器及试剂

1、材料： 植物DNA

2、器材：水平板型电泳槽装置 电泳仪 254nm波长的紫外分析仪塑料手套 移液管 水浴锅

3、试剂：

（1）T ris-HAc(TAE)缓冲液

A．浓缩的贮备液（50倍）每升含：242gTris 57.1ml冰醋酸，100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）。

B．使用浓度：0.04mol/L Tris-HAc/0.04mol/L EDTA。

（2） 琼脂糖：电泳纯以上。

（3）溴酚蓝甘油溶液（0.05%溴酚蓝-50%甘油溶液）：先配制0.1%溴酚蓝水溶液，然后取1份0.1%溴酚蓝溶液与等体积的甘油混合即成。

（4）已知分子量的标准DNA（λDNA-ECORI/Hind III）。

（5） 10mg/mL溴化乙锭水溶液（EB）或GV水溶液。

三、操作方法

1．琼脂糖凝胶板的制备

称取0.7g琼脂糖置于三角瓶中，加入100mlTAE缓冲液，在沸水浴中加热至琼脂糖完全溶解，冷却至50℃，然后加入EB溶液使终浓度为0.5μg/ml。倒入凹形有机玻璃槽（事先用胶带封住有机物玻璃板的边缘）。使其成2mm左右的凝胶板。在其未凝固前将样品槽模板（梳子）插入凝胶的一端，注意梳齿底与凝胶底之间应至少保持0.5-1.0mm的凝胶。待全部凝固后（室温，约30-45分钟），取出梳子及除去胶带，将凝胶板与玻璃板一起放入电泳槽内，加入TAE缓冲液使刚好超过凝胶面约1mm。

2．加样：将样品与溴酚蓝按4：1的比例混合，用移液器缓慢加入凝胶样品孔中，点样量为每孔5μgDNA。

3．电泳：点样端接负极，电泳开始时，可用较高的电压，如100伏特，这样可使样品很快进入胶内，而减少样品扩散，待样品进入胶内即可保持每厘米

5伏特左右的电压，DNA在电泳中向正极移动。当溴酚蓝的区带移至距凝胶底部1-2cm，停止电泳，当胶板为10-15cm的长度时，电泳时间一般为2小时左右。

(4)观察与鉴定

电泳结束后，取出凝胶板，在波长为254nm的凝胶成像系统下，观察电泳图谱，如果电泳条带清晰(如果EB染色看到桔黄色荧光条带，GV染色则看到绿色荧光条带)，将凝胶照相。根据标准DNA的电泳图谱，可以得知样品DNA的分子大小。

GB/T176-1996水泥化学分析方法（eqvISO680：1990）

2、分析方法

1）烧失量的测定：

准确称取 1.000g在105 -110℃下烘过2小时的试样，置于已灼烧恒的瓷坩中，放在750 -800℃高温炉中灼烧1h，取出置于干燥器中的冷却至室温后，称量。

烧失量百分含量按下式计算：

式中：m-灼烧后试料的质量，g

m1-灼烧后试样的质量，g

2）氧化钙的测定（萤石中CaCO3及CaSO4的含钙量）；

准确称取约 0.25g已在105 -110℃烘过2h的试样，置于100mL烧杯中，加入1mL已醇润湿，准确加入10mL含钙乙酸溶液。盖上表面皿，摇动烧杯，使其分散，加热微沸3min，保温2min立即用于慢速过滤于300mL烧杯中，用温水冲洗烧杯和残渣3-4次，溶液总体积为40mL，然后弃去滤纸及残渣。

将烧杯中的溶液以水稀至250mL，加入5mL三乙醇胺（1+2）及适量CMP指示剂，在搅拌下加入200g/L氢氧化钾溶液出现绿色萤光后再过量5-8mL，用0.015mol/LEDTA标准滴定溶液滴定于绿色萤光消失并呈现红色。

随同做二份空白试验，取其平均值。若二份空白试验所消耗的EDTA标准滴定溶液的差值大于0.10mL，需进行第三次空白试验。

氧化钙含量按下式计算：

式中：TCaO-每毫升EDTA标准滴定溶液相当于CaO的毫克数；

V--滴定时消耗EDTA标准滴定溶液的体积，

VO--滴定随同试样所做二份空白溶液所消耗的EDTA标准滴定溶液的平均值，mL；

m--试料的质量，g。

3）测定SiO2、CaF2、MgO、AL2O3的试样溶液的制备。

准确称取约 0.5g已在105 -110℃烘过2h的试样，置于银坩埚中加入6 -7g氢氧化钠，盖上坩盖并稍留缝隙。放入高温炉中由低温升至650 -700℃熔融15min，取出后立即用坩埚坩夹持坩埚摇劝并旋转，使熔融物均匀的附于坩埚内壁冷却后将坩埚置于300mL塑料杯中，加入100mL 沸水，盖上表面皿，待熔块完全浸出后，用热水洗出坩埚，然后在搅拌下一次加入25mL浓盐酸及1mL 浓硝酸，用热盐酸溶液（1+5）洗净坩埚和盖，溶液冷至室温。将溶液快速转移入250mL容量瓶中，迅速用水稀释至标线并摇匀，立即将溶液倒入另一干燥塑料杯中，以供检测。

4）二氧化硅的测定：

吸取50mL制备的试样溶液，放入250-300mL塑料杯中，加入10-15mL硝酸，搅拌，冷却至 30℃以下，然后加入10mL 150g/L氟化钾析出。放置15-20min，用中速滤纸过滤，塑料杯及沉定用 50g/L氟化钾溶液洗净3次，将滤纸连同沉淀取下，置于原塑料杯中，沿杯壁加入10mL 50g/L氟化钾一乙醇溶液及1mL酚酞指示剂，用0.15mol/L NaOH溶液中和未洗净的酸，仔细搅动滤纸并随之擦洗杯壁直至溶液呈红色。然后加入200mL沸水：用0.15mol/L NaOH标准滴定溶液滴定至微红色。

二氧化硅百分含量按下式计算：

氧化镁的百分含量按下式计算：

式中：TMgO--每毫升EDTA标准溶液相当于氧化镁的毫克数；

V2--滴定钙镁合量消耗EDTA标准溶液的体积，mL；

V2--滴定氟化钙时消耗EDTA标准溶液的体积，mL ；

m--试料的质量，g。

5）三氧化二铁的测定：

吸取25mL制备好的试样溶液，放入300mL烧杯中，加5mLHCL（1+1）， 2g固体硼酸，盖上表面皿，放置电炉上加热蒸发至干取下后，用热水冲洗表面和杯壁并调整溶液体积约100mL，用HCI（1+1）和氨水（1+1）调节溶液PH至1.8-2.0。将溶液加热至 70℃，加入10滴磺基水杨酸钠指示剂（ 100g/L），以0.015mol/LEDTA标准滴定溶液缓慢滴定至亮黄色（终点温度大于 60℃）。

三氧化二铁百分含量按下式计算：

式中：TFe2O3--每毫升EDTA标准溶液相当于三氧化二铁的毫克；

V--滴定时消耗EDTA标准溶液的体积，mL；

m--试料的质量，g。

式中TSi02--每毫升氢氧化钠标准滴定相当于二氧化硅的毫克数；

V--滴定时消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积mL；

m--试料的质量，g。

6）氟化钙的测定：

吸取25mL制备的样试溶液，放入400mL烧杯中，加入5mL 50g/L硼酸溶液，用水稀释至250mL，加入5mL 三乙醇胺（1+2）及适量CMP混合指示剂。在搅拌下加入 200g/L氢氧化钾溶液，至出现绿色荧光后过量5-8mL，用0.015mol/LEDTA标准滴定溶液滴定至绿色荧光消失，并呈现红色。

氯化钙百分含量按下式计算：

式中：TCaO--每毫升EDTA标准溶液相当于氯化钙的毫克数；

V1--滴定消耗EDTA标准溶液的体积，mol；

m--试料的质量，g；

XCaO--试样中氧化钙的百分含量；

1.3923--试样中氧化钙对氟化钙的换算系数。

7）氧化镁的测定：

吸取25mL制备的试样溶液，放入400mL烧杯中，加入5mL 50g/L的硼酸溶液，用水稀释至250mL，加入1mL 100g/L酒石酸钾钠和5mL 50g /L的硼酸溶液，用水稀释至25mL ，加入1mL 100g/L酒石酸钾钠和5mL三乙醇胺（1+2），搅拌，然后加入25 mL氨-氯化按缓冲溶液（PH=10）及适量的酸性铬兰K-萘酚绿B（1+2.5）混合指示剂，以0.015mol/LETDA标准滴定溶液滴定近终点时应缓慢滴定至纯蓝色。

8）三氧化二铝的测定：

在滴定铁后的溶液中，加入15-20mL 0.015mol/LEDTA标准滴定溶液，然后用水稀释至300mL。将溶液加热至70 -80℃加入15mL乙醇-乙醇钠缓冲溶液（PH=4.3）煮沸1-2min，取下稍冷，加4-5滴PAN指示剂，以硫酸铜标准滴定溶液至亮紫色（终点相对稳定，返色不考虑）

三氧化二铝的百分含量按下式计算：

式中：TAL2O3--每毫升EDTA标准溶液相当于氧化铝的毫克数；

V1--加入EDTA标准溶液的体积，mL

V2--滴定时消耗硫酸铜标准溶液的体积，mL

K--每毫升硫酸酸铜标准滴定溶液相当于EDTA标准溶液的毫升数；

m--试料的质量，g。

钠原子的最外层只有1个电子，很容易失去，所以有强还原性。因此，钠的化学性质非常活泼，能够和大量无机物，绝大部分非金属单质反应和大部分有机物反应，在与其他物质发生氧化还原反应时，作还原剂。

扩展资料：

钠的化学性质很活泼，常温和加热时分别与氧气化合，和水剧烈反应，量大时发生爆炸。钠还能在二氧化碳中燃烧，和低元醇反应产生氢气，和电离能力很弱的液氨也能反应。

钠可测定有机物中的氯。还原和氢化有机化合物。检验有机物中的氮、硫、氟。去除有机溶剂（苯、烃、醚）中的水分。除去烃中的氧、碘或氢碘酸等杂质。制备钠汞齐、醇化钠、纯氢氧化钠、过氧化钠、氨基钠、合金、钠灯、光电池，制取活泼金属。

参考资料来源：百度百科-钠