冻干机不适合哪些溶剂

冻干粉，纳米金国家发明专利

专利号：ZL 2013 1 0075378.3 暨南大学分子生物研究中心，医美科技研发成果。诺贝尔医学奖细胞基因生长因子科研成分

【成分】 冻干粉：甘露糖醇、水、寡肽-1

溶媒： 水、甲基丙二醇、1,2-己二醇、对羟基苯乙酮、水解透明质酸、甘草酸二钾、光果甘草（GLYCYRRHIZA GLABRA）根取物、金、聚乙二醇-400。

【功效】 蕴含多种珍贵成分，补水保湿，紧致肌肤，让肌肤水嫩透润，纳    米金为肌肤提供养分，温和修护皮肤，由内而外使粗糙肌肤平滑细嫩，富有弹性，保持肌肤年轻态。

【使用方法】 打开瓶盖将辅酶倒入冻干粉瓶中， 轻轻摇至粉末溶解， 套上专用

喇叭嘴， 取适量涂抹于面部肌肤， 轻拍至吸收。

【适用肤质】 任何肤质均可使用。

【注意事项】 1.使用时如不慎入眼，请立刻用清水洗净； 【使用条件】 置于冰箱保鲜保存

1. 开启后3小时内用完，建议隔天使用一组

2. 每天使用一组，可加强对肌肤问题的修护

随着年龄的增加，外界环境的污染，不知何时已经留下了岁月的痕迹，斑点若隐若现，痘痘也是死缠烂打，皱纹更是不用提，也跟着凑热闹，有没有一拥而上的感觉-----

外界因素

日晒辐射变黑，环境污染；保养不当，使用劣质品，出现敏感、瘙痒、脱皮。

内在因素

随着年龄的增加，因为细胞失去原有功能和活性，新生细胞得不到良好的营养供给，老化细胞得不到正常的脱落而堆积于肌肤表层，因而皮肤质量日益下降，逐渐出现色斑沉积，皱纹增多，干燥无光，弹性减退等衰老现象。

情绪长期紧张忧郁、睡眠不足、饮食不当造成肌肤暗沉，色斑，长痘，毛孔粗大，肌肤干燥，衰老等。

六大功效  :

①修复肌肤屏障

迅速修复受损肌肤和重建角质层，促进机体细胞生长、分裂和新陈代谢。

②淡化痘印、疤痕

调节胶原蛋白降解及更新，缩短创伤愈合时间以及减少疤痕的形成。

③改善红血丝

促进血管壁的增值分化，恢复毛细血管弹性，解决血管扩张问题。

④细化毛孔

有效净化、细化毛孔，使肌肤平滑细嫩，富有弹性。

⑤保湿滋养抗衰

多种珍贵成分能促进纤维细胞的生长发育，有防皱和去皱作用。

⑥美白淡斑

降低细胞中黑色素的含量，减轻皮肤色素的沉着，提亮肤色。

开启共享护肤时代

+爽肤水  提高收缩毛孔能力150倍

+精华    双重滋养提高精华活性180倍

+乳液    提高肌肤修护能力200倍

+面霜    滋养肌肤提高保湿能力250倍

+面膜    提高肌肤补水能力300倍

+喷雾    提高舒缓肌肤能力200倍

密集修护冻干粉组合Polypeptide Multiple Repair Set

保湿滋养  温和滋养皮肤，补充肌肤水分

收缩毛孔  增加肌肤弹性，光滑紧致皮肤

舒缓肌肤  呵护肌肤角质，轻松缓和肌肤

索颜美燕窝精华冻干面膜

索颜美燕窝精华冻干面膜以全新低温冷凝干燥技术，遇水鲜活，即配即用。细纹、干燥、松驰等初老肌肤重拾坚实通透、弹润嫩滑，长期使用，肌肤保湿更持久，呈现水润健康、亮泽的状态！

注意事项：

1、使用时肌肤如有不适，请停止使用，并咨询专科医生；皮肤易敏感者，使用前请先做局部皮肤测试，无刺激性反应再使用。

2、面膜注入鲜水盘后，请即刻使用以免活性精华流失。

保存方法：

避免阳光照射，于阴凉处存放。

成分：

水、丙二醇、玉米谷蛋白氨基酸类、小雨燕窝提取物、甘油、金钗石斛茎提取物、库拉索芦荟叶提取物、苦参根提取物、宁厦枸杞果提取物、紫松果菊提取物、烟酰胺、透明质酸纳、咖啡黄葵果提取物、丁二醇、野葛根提取物、小球藻提取物、双丙甘醇、黄原胶、EDTA二钠、对羟基苯乙醇、1，2-乙二醇、苯氧乙醇

单片包装含：

包装袋、燕窝精华液、冻干膜布、鲜活水盘

广告语：

活的面膜 即配即用 保质保鲜

膜布吸收20倍精华液

功效：

补水保湿 提亮肌肤 细嫩透亮

膜布：

水丝新材、天然环保、晶莹剔透、水嫩服贴、持久保湿

膜布体内有数十万个小海绵状空隙，可吸收结合、吸附、储存自身重量20倍精华液

精华液：

精华充沛，活性满满

产品5项无添加放心用：

无酒精、无香精、无色素、无激素、无荧剂

有机溶剂是一类由有机物为介质的溶剂，反之为无机溶剂，溶剂按化学组成分为有机溶剂和无机溶剂。

溶剂按化学组成分为有机溶剂和无机溶剂。

是一大类在生活和生产中广泛应用的有机化合物，分子量不大，它存在于涂料、粘合剂、漆和清洁剂中。经常使用有机溶剂如，苯乙烯、全氯乙烯、三氯乙烯、乙烯乙二醇醚和三乙醇胺。

有机溶剂是能溶解一些不溶于水的物质（如油脂、蜡、树脂、橡胶、染料等）的一类有机化合物，其特点是在常温常压下呈液态，具有较大的挥发性，在溶解过程中，溶质与溶剂的性质均无改变。

有机溶剂的种类 有机溶剂的种类较多，按其化学结构可分为10大类：①芳香烃类：苯、甲苯、二甲苯等；②脂肪烃类：戊烷、己烷、辛烷等；③脂环烃类：环己烷、环己酮、甲苯环己酮等；④卤化烃类：氯苯、二氯苯、二氯甲烷等；⑤醇类：甲醇、乙醇、异丙醇等；⑥醚类：乙醚、环氧丙烷等；⑦酯类：醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸丙酯等；⑧酮类：丙酮、甲基丁酮、甲基异丁酮等⑨二醇衍生物:乙二醇单甲醚、乙二醇单乙醚、乙二醇单丁醚等；⑩其他：乙腈、吡啶、苯酚等。

真空干燥设备的种类很多，大多数干燥室能够密闭的常压干燥设备都能实现真空干燥。在真空干燥技术领域里，可以把真空干燥设备分成普通真空干燥和特种真空干燥 两大类。 普通真空干燥设备主要包括：适合于液体、浆体、粉体和颗粒物品干燥的箱式干燥设备；适合于果汁、牛奶、糖蜜、甘薯泥、番茄酱等干燥的滚筒式真空干燥设备；适合于橙汁、番茄汁、速溶茶和速溶咖啡等生产的带式真空干燥设备；适合于粉体颗粒物料的，如维生素C等干燥的真空振动流动干燥机；还有圆筒搅拌型真空干燥机、双锥回转型真空干燥机、耙式真空干燥机、圆盘刮板真空干燥机等。 特种真空干燥设备主要有：真空冷冻干燥设备、低频真空干燥设备和气相真空干燥设备等。

如果按真空干燥设备的用途划分，可以分成食品真空干燥机、药品真空干燥机、木材真空干燥机、聚合物真空干燥机、化工产品真空干燥机等。 如果按加热方式，可以将真空干燥设备分成传导加热、辐射加热、微波加热和气相加热等类型。 近些年来，真空冷冻干燥设备发展很快，其种类也比较多，分类方法主要有以下几种。冻干面积分为大、中、小三种。通常认为50㎡。以上的为大型冻干机；5～50㎡的为中型冻干机；5㎡以下的为小型冻干机。市场上供应的最小冻干机为0.1㎡。非标准冻于机还有0.02㎡的。 ②按用途分为医药用冻干机和食品用冻干机两种。医药用冻干机要求其制造精度高，所用材料好，必须符合GMP(最佳医药制造管理和品质管理规则)标准要求；功能齐全，一般都应该设置在位自动清洗装置(CIP)和在位灭菌装置(SIP)，并根据需要设置压盖机构和取样机构。食品用冻干机通常是辐射加热，对搁板的加工精度要求相对较低，冻干面积较大。

③按物料的冷冻地点分为冻干合一型和冻干分离型。冻干合一型是指物料的冷冻和干燥均在冻干箱内进行，冻干箱内的搁板里既能制冷又能加热，被冻干物料放在搁板上，主要依靠传导进行预冻和加热，辐射传热是次要的。医药用冻干机多为冻干合一型，目的是保持物料清洁卫生，防止污染。冻干分离型是指预冻在冷库、速冻机或液态容器里进行，干燥时再将预冻好的物料移到干燥箱(仓)内，目的是节约能源，节省干燥时间，提高生产效率，降低产品成本，这种冻干机以辐射加热为主，多适用于食品冻干机。

④按冷冻方式可分为静态冷冻(static freezing)、动态冷冻(dynamic freezing)、离心冷冻(centrifugal freezing)、滚动冷冻(shellfreezing)、旋转冷冻(spin freezing)、喷雾冷冻(spr。ay freezing)、气流冷冻(airblast freezing)等。具体选用何种冷冻方式，应该根据物料性质和冷冻干燥工艺要求而定。

⑤按捕水器(水气凝结器)安放的位置，分为内置式和外置式两种。内置式的捕水器安放在冻干箱内，可放在冻干箱搁板的两侧、下部或后部。内置式冷冻干燥机节省占地面积，被抽气体到捕水器去的阻力小，省去了干燥箱与捕水器之间的连接管道和阀门，经济性好。但内置式捕水器与搁板之间距离较近，影响搁板加热的均匀性，容易出现热桥，影响捕水器捕水特性，还有些内置式捕水器化霜时需要停止工作，影响了生产周期和生产效率。外置式捕水器安放在冻干箱外，需要一个独立外壳，用管道和阀门将冻干箱和捕水器连接起来，其优缺点与内置式刚好相反。

⑥按所采用的真空系统，分水蒸气喷射泵型和捕水器加机械泵型两种。水蒸气喷射泵真空系统不用捕水器，能直接大量抽出水蒸气，抽气量大、效率高，抽气量可以控制，但需要

水蒸气作为动力，锅炉产生水蒸气的压力容易波动，影响泵的性能，烧锅炉容易造成环境污染，因此只有少量食品采用这种系统。捕水器加机械泵系统中需要为捕水器配置一套制冷系统。一般单级压缩机的制冷系统，蒸发器表面最低温度为-35℃；双级压缩机的制冷系统可达到-50℃；复叠式压缩机制冷系统能达到-80℃。根据真空度的需要，在捕水器前面可配置罗茨泵加水环泵机组、罗茨滑阀泵机组、罗茨旋片泵机组，或者只配置能直排大气的各种机械真空泵。

⑦按冻干箱内搁板上的加热方式分为直接加热和间接加热两种。直接加热是用电或各种载热媒体直接加热搁板，加热速度快，节约能源，但容易造成搁板温度不均匀、难控制。间接加热需要有换热器，热媒经换热器被加热之后再用泵打入搁板进行循环加热，其优缺点与直接加热式刚好相反。

⑧按加热所采用的工质，分油、水、水蒸气加热以及电加热几种。油的价格高，载热量少，循环量大；水在搁板流道内容易结垢，降低通道截面积，影响换热效果；水蒸气的温度和压力不好控制；电加热搁板温度均匀性不好。因此，近年来各厂都配制各种适合于制冷和加热两用的冷热媒工质，如乙二醇、Rll等。

⑨按生产方式分连续式和间歇(周期)式两种。连续式冻干机造价高，生产量大，适合于单一品种物料大规模生产；间歇式冻干机的优缺点与连续式刚好相反。

片剂的常用辅料有填充剂或稀释剂，包括淀粉、糖粉、糊精、乳精、可压性淀粉、微晶纤维素、无机盐类。黏合剂和润滑和剂，包括蒸馏水、乙醇、淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素和乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素。崩解剂，包括干淀粉、羧甲基淀粉钠、低取代基羟丙基纤维素。润滑剂，有硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、氢化植物油、聚乙二醇类和月桂醇硫酸镁

可以，我们实验室活的冻干疫苗就用过牛奶做为冻干剂。保护剂可改变生物样品冷冻干燥时的物理、化学环境，减轻或防止冷冻干燥或复水对细胞的损害，尽可能保持原有的各种生理生化特性和生物活性；冻干保护剂不仅影响冻干过程中的细胞存活率，还影响到保藏期间蛋白质及细胞的稳定性。常用保护剂有糖类、白蛋白、聚乙二醇等等。脱脂奶粉属于非渗透型保护剂不能进入细胞，它使溶液呈过冷状态，即可在特定温度下降低溶质浓度，从而起到保护作用。

冻干面膜又称为冻干粉面膜，是比一般面膜补水效果更好一些的。因为他是将面膜原液、保湿剂等成分和膜布纤维融合再用真空冷冻干燥形成的固态干膜面膜。这种面膜会比传统面膜更能够保存好面膜中的有效活性成分的，因此它的补水保湿的效果自然会更好一些。

冻干面膜的使用方法和普通面膜一样，都是在清洁脸部之后将面膜取出敷在脸上就可以了，停留15-20分钟取下用清水冲洗干净后再进行后续护肤。一般冻干面膜在首次使用时，要连续使用三天，之后每周用两到三次即可。

对于冻干面膜，了解的人还是比较少的，但是这其实也是一款补水效果较好的面膜，在购买时只要选择正规品牌一般都不会出现问题。但是需要注意，每一款面膜都不是适用每个人的，所以建议先购买少量进行试用会比较好。

安娇炅郓霖酣僮诣俭幽玮许注赐西针喾频记昀溶

菠萝蛋白酶的提取纯化及化学修饰对其活性的影响

目的要求

1、掌握从原料物中提取活化分离菠萝蛋白酶的方法。2、学习酶活力测定的方法。

3、了解某些因素对菠萝中菠萝蛋白酶热稳定性的影响。

4、掌握用聚乙二醇对菠萝蛋白酶进行化学修饰的原理。

5、比较修饰酶与未修饰酶的活力。

二、实验原理

1、本实验先从新鲜的菠萝汁中使用单宁沉淀法提取出菠萝蛋白酶，菠萝蛋白酶将酪蛋白水解产生酪氨酸，通过测定吸光度的变化，可以测得菠萝蛋白酶的活力。

2、 以陶瓷层析结合超滤法纯化菠萝蛋白酶，吸附材料化学性质好，可用于柱层析。

3、温度恒定时,菠萝中菠萝蛋白的热失活遵循一级蜕变规律dE/dt=-Kd*t,失活半寿期是常数，可以用作衡公菠萝蛋白酶热稳定性的指标。

本实验应用动力学方法，以菠萝蛋白酶的热失活半衰期为热稳定性的指标，定量研究了梭酸盐和Ca2+,Zn2+士对菠萝中菠萝蛋白酶热稳定性的影响，以期找到一种高效、可行的增强菠萝蛋白酶热稳定性的方法。

4、修饰的菠萝蛋白酶对温度和pH值的稳定性均比天然酶有很大程度的提高。菠萝蛋白酶是一种巯基蛋白酶,但它的稳定性较差,影响了它的应用。此外,菠萝蛋白酶易受有关因素的影响而失活。聚乙二醇(PEG) 为一种无毒且具亲水性的免疫惰性大分子，本实验采用聚乙二醇对菠萝蛋白酶进行修饰,提高了其对环境的稳定性,使其半衰期延长。

实验材料

试剂和材料

1、新鲜菠萝(0.735kg)、0.1mg/ml牛血清蛋白

2、柠檬酸钠、单宁、0.1%EDTA溶液、1.5%氯化钠溶液、1%酪蛋白溶液、1mol/L氢氧化钠溶液、0.05mol/L磷酸缓冲液、激活剂

3、Brolain试剂、牛血清白蛋白、0.1mol/L柠檬酸盐缓冲液、PEG活性酯。

（二）实验仪器

1、榨汁机；

2、离心机；

3、紫外可见分光光度计（1cm石英比色皿）；

4、恒温水浴锅（37℃）；

5、试管、试管架；

6、烧杯、容量瓶；

7、移液管；

四、试验方法

（一）从菠萝中提取菠萝蛋白酶

操作步骤：

将菠萝切碎→加柠檬酸钠，榨汁→菠萝汁→纱布过滤→澄清液→2000r/min，7min离心→上清液→加Vc,0.2%单宁溶液搅拌15min,静置40min4200r/min,5min离心→沉淀物→加100ml0.1%EDTA溶液，200ml1.5%氯化钠液→4200r/min,5min离心→酶复合物→加适量1.5%氯化钠溶液，4000r/min,7min离心→酶复合物沉淀→冻存备用

菠萝蛋白酶活力的测定

1、取酶制品溶解于0.05mol/L磷酸缓冲液（PH7.0)至10ml,离心得上清液；

2、取5支试管，分别标号1、2、3、4、5，各加1ml溶液酶和0.9m激活剂；

3、另取5支试管，分别对应标号1、2、3、4、5，各加1ml缓冲液和0.9ml激活剂；

4、将10支试管置于37℃水浴；

5、然后按下表操作

试管号 1 2 3 4 5 6 7 8

标准酪蛋白

（0.1mg/mL） 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 0

待测酶蛋白

（mL） 0 0 0 0 0 0 0 1.0

磷酸缓冲液

（mL） 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0

考马斯亮蓝

（mL） 4 4 4 4 4 4 4 4

通过测定不同试管中菠萝蛋白酶的吸光度A的值，进而确定酶活力的大小。

（三）聚乙二醇对菠萝蛋白酶的化学修饰

1.1修饰酶的制备

60gPEG6000溶于400mL干燥吡啶,加入1.01g琥珀酸酐后60℃保温2h,然后在60℃减压蒸馏除去溶剂。加入苯直至残余物溶解,再加100mL冷己烷,4℃振荡2h过滤,残渣溶于蒸馏水后透析。PEG活性酯和菠萝蛋白酶按摩尔比50：1投料,加入到0.1molPL柠檬酸盐缓冲液中,4℃反应4h。产物在pH4.6的柠檬酸缓冲液中透析,冻干后得到白色的PEG-菠萝蛋白酶(修饰酶)。

1.2 TNBS法测定修饰率

取1mL蛋白酶溶液(1mgPmL),加入1mL4 %的碳酸氢钠溶液,1mL10%的十二烷基磺酸钠溶液,20min 后加入1mL0.1%的TNBS 溶液,40℃保温2h ,用0.5mL 1mol/L的盐酸终止反应。325nm测光吸收值。同样浓度蛋白酶溶液在修饰后与修饰前的光吸收值之比即为残留氨基率。修饰率=1-残留氨基率

（四）某些因素对菠萝中菠萝蛋白酶热稳定性

1.1 菠萝蛋白酶热稳定性实验方法

新鲜菠萝榨汁100mL加人到55℃预保温的一定浓度梭酸盐溶液中，不同保温时间测定菠萝蛋白酶活力，按热失活遵循一级蜕变规律dE/dt=-Kd*t方法求出菠萝蛋白酶的半衰期。

1.2 有机羧酸盐对菠萝蛋白酶热稳定性的影响。

pH7.0时草酸钠对菠萝蛋白酶有明显稳定作用，100 mmol/l草酸钠使tl/2延长6倍，丁二酸、酒石酸甲钠也有一定的保护作用。醋酸钠、柠檬酸钠、硼酸钠都有一定程度的保护作用，且浓度变化对保护作用的影响不大。

结果与讨论

1、修饰率的测定

测定结果按下式进行计算:修饰率= 1 - 残留氨基率= 1

- 修饰后的光吸收值P修饰前的光吸收值= 1 - 0. 502P0. 887 =

0. 4340 = 43. 40 %

2、菠萝蛋白酶在提取分离和干燥过程中，酶的活性中心巯基易被氧化而使酶活性降低。在提取过程中适当加入某些抗氧化剂，对阻止酶被氧化失活有良好作用。作为菠萝蛋白酶活性保护剂，硫代硫酸钠与半胱氨酸组合使用，可获较好的效果。

3、维系酶分子三维构象的作用力包括:氢键、疏水相互作用、静电相互作用、范德华力，有些还包括共价二硫键，蛋白质分子不管是变性、还是增强稳定性，都是通过影响这些作用力来实现的。但总的来看，氢键、疏水相互作用在增强酶的稳定性方面起着主要作用。

4、本实验通过用琥珀酸酐法活化后的PEG修饰菠萝蛋白酶,经聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子量,并对其生化性质与混合酶和天然酶进行了对比研究。所得到的修饰酶在对温度和pH值的稳定性上均比天然酶有一定程度的提高，这说明PEG分子对酶有一定的保护作用,推测这种作用应来自分子间的作用力。

参考文献:

1、赵武岭,吴玮,李藏铭,等. 果实菠萝蛋白酶的动力学研究[J ] . 中国

农业大学学报,1999 ,4(1) :11 - 13.

2、章佩芬,郭勇,罗焕敏. 菠萝蛋白酶的研究与应用进展[J ] . 华西药学

杂志,2002 ,17(2) :128 - 129.

3母敬郁,麦荫乔,李小梅,等. 甲基化聚乙二醇(5000) 修饰超氢化物

歧化酶的研究[J ] . J. N. Bethuneuniv. Med. ,SCL ,1995 ,2 (12) .

4、梁楚泗,李树瑜,杨政蓓. 毛花猕猴桃蛋白酶的提纯和性质[J ] . 植物

资源与环境,1999 ,8(3) :1 - 6.

（五）结果讨论

从上述结果可知菠萝蛋白酶的比活力较低，可能的原因有：

1、所加入的有机酸单宁的量对菠萝蛋白酶沉淀有的影响；

2、在实验中是否把单宁溶液弄混而导致菠萝蛋白酶很少沉淀析出；

3、菠萝蛋白酶对热不稳定，试验中温度的控制是否合理；

4、在活力测定的步骤中所加入的酪蛋白的量不足，导致结果偏低；

5、在活力的测定步骤中，设置了几个梯度，最后的结果中应该有至少两支试管中的溶液的吸光度的值相同，但本组实验没有得到这种结果。6、活力测定中，由于操作不当，导致部分沉淀溶解在了上清液中，溶液微浑浊，对吸光度的测定有影响。

马荷妤跃龄严聂隽彤研祐豪峥西矢庚锈娑姬贽涌