CTAB的作用？
CTAB是一种去污剂,可溶解细胞膜,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中（（0.7 mol/L NaCl）是可溶的,当降低溶液盐浓度到一定程度（0.3 mol/L NaCl）时,从溶液中沉淀,通过离心就可将CTAB-核酸的复合物与蛋白,多糖类物质分开。最后通过乙醇或异丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或异丙醇而除去。
步骤
（1） 2%CTAB抽提缓冲液在65℃水浴中预热。
（2）取少量实验材料（约300mg）置于研钵中，用液氮磨至粉状。
（3） 加入700ul的2%CTAB抽提缓冲液，轻轻搅动。
（4） 将磨碎液分倒入1.5 ml的灭菌离心管中，磨碎液的高度约占管的三分之二。
（5）置于65℃的水浴槽或恒温箱中，每隔10 min轻轻摇动，30~60min后取出。
（6）冷却2 min后，加入氯仿-异戊醇（24：1）至满管，剧烈振荡2~3 min（若提取的是总基因组，则不能剧烈震荡。），使两者混合均匀。
（7）放入离心机中10 000 rpm离心10 min，与此同时，将600 ul的异丙醇加入另一新的灭菌离心管中。
（8） 10 000 rpm离心1 min后，移液器轻轻地吸取上清夜，转入含有异丙醇的离心管内，将离心管慢慢上下摇动30 sec，使异丙醇与水层充分混合至能见到DNA絮状物。
（9）10000 rpm离心1 min后，立即倒掉液体，注意勿将白色DNA沉淀倒出，将离心管倒立于铺开的纸巾上。
（10）60 sec后，直立离心管，加入720ul的75%乙醇及80 ul 5 M的醋酸钠，轻轻转动，用手指弹管尖，使沉淀与管底的DNA块状物浮游于液体中。
（11）放置30 min，使DNA块状物的不纯物溶解。
（12）10000 rpm离心1 min后，倒掉液体，再加入800 ul 75%的乙醇，将DNA再洗 30 min。
（13）10000 rpm离心30 sec后，立即倒掉液体，将离心管倒立于铺开的纸巾上；数分钟后，直立离心管，干燥DNA（自然风干或用风筒吹干）。
（14）加入50 ul 0.5 × TE(含RNase)缓冲液，使DNA溶解，置于37℃恒温箱约15 h，使RNA消解。
以上内容参考 百度百科-CTAB法
《转的》
CTAB
(hexadecyltrimethylammonium
bromide,十六烷基三甲基溴化铵)，是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L
NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。
注:CTAB溶液在低于15℃
时会形成沉淀析出，因此，在将其加入冰冷的植物材料之前必须预热，且离心时温度不要低于15℃。
一、CTAB提取缓冲液的经典配方:
Tris-HCl
(pH8.0)提供一个缓冲环境，防止核酸被破坏
EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子，抑制DNase活性
NaCl
提供一个高盐环境，使DNP充分溶解，存在于液相中
CTAB溶解细胞膜，并结合核酸，使核酸便于分离
β-巯基乙醇是抗氧化剂，有效地防止酚氧化成醌，避免褐变，使酚容易去除。
二、CTAB提取缓冲液的改进配方:
(1)
PVP(聚乙烯吡咯烷酮)是酚的络合物，能与多酚形成一种不溶的络合物质，有效去除多酚，减少DNA中酚的污染同时它也能和多糖结合，有效去除多糖
(2)
蛋白质的去除:酚/氯仿抽提使用变性剂变性(SDS、异硫氰酸胍等)高盐洗涤蛋白酶处理核酸分离，纯化
(3)多糖的去除:高盐法:用乙醇沉淀时，在待沉淀溶液中加入1/2体积的5M
NaCl，高盐可溶解多糖。用多糖水解酶将多糖降解。在提取缓冲液中加一定量的氯苯(1/2体积)，氯苯可以与多糖的羟基作用，从而去除多糖。用PEG8000代替乙醇沉淀DNA:在500
μL
DNA液中加入200μl
20%
PEG8000
(含1.2
M
NaCl)，冰浴20min.核酸分离，纯化
(4)
多酚的去除:在抽提液中加入防止酚类氧化的试剂:β-巯基乙醇、抗坏血酸、半胱氨酸、二硫苏糖醇等加入易与酚类结合的试剂:如PVP(聚乙烯吡咯酮),PEG(聚乙二醇)，它们与酚类有较强的亲和力，可防止酚类与DNA的结合
(5)
盐离子的去除:70%的乙醇洗涤核酸吸附,沉淀和溶解使用合适的吸附材料吸附核酸，其它的杂质均被洗掉，达到纯化DNA的目的另一种方式加入1/10体积的NaAc(pH5.2,3M)，用预冷的乙醇或异丙醇沉淀RNA吸附或沉淀后应用70%的乙醇洗涤，以除去盐离子等若长期储存建议使用TE缓冲液溶解TE中的EDTA能螯合Mg2+或Mn2+离子，抑制DNasepH值为8.0，可防止DNA发生酸解。
三、基因组DNA提取常见问题
DNA中含有蛋白、多糖、多酚类杂质。DNA在溶解前，有酒精残留，酒精抑制后续酶解反应，DNA中残留有金属离子，有RNA的存留。对策:重新纯化DNA，去除蛋白、多糖、多酚等杂质，重新沉淀DNA，让酒精充分挥发，增加70%乙醇洗涤的次数(2-3次)，加入RNase降解RNA。
(1)DNA样品不纯，抑制后续酶解和PCR反应。DNA提取常见问题:材料不新鲜或反复冻融、未很好抑制内源核酸酶的活性、提取过程操作过于剧烈，DNA被机械打断，外源核酸酶污染反复冻融。尽量取新鲜材料，低温保存材料避免反复冻融，液氮研磨或匀浆组织后，应在解冻前加入裂解缓冲液。在提取内源核酸酶含量丰富的材料的DNA时，可增加裂解液中螯合剂的含量，细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔。所有试剂用无菌水配制，耗材经高温灭菌。将DNA分装保存于缓冲液中,避免反复冻融。
(2)DNA降解，DNA提取常见问题。实验材料不佳或量少，破壁或裂解不充分，吸附或沉淀不完全，洗涤时DNA丢失。尽量选用新鲜(幼嫩)的材料，动植物要匀浆研磨充分G+菌，酵母裂解前先用生物酶或机械方式破壁。高温裂解时，时间适当延长(对于动物细胞,细菌可增加PK的用量)。增加吸附的时间、或低温沉淀小心操作。
Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏。
EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性。
NaCl 提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中。
Cβ-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除基因组DNA。CTAB 4g
NaCl 16.364 g。
1M Tris-HCl 20ml( PH8.0)。。
0.5M EDTA 8ml，先用70ml ddH2O溶解, 再定容至200ml灭菌。
冷却后0.2-1% 2-巯基乙醇（400ul）氯仿-异戊醇（24：1）：先加96ml氯仿，再加4ml异戊醇，摇匀即可。
扩展资料：
适当的加一下热，比如50度或者60度，可以快速溶解，般这个温度对试剂的品质没有什么影响如果不是浓度太高的话。
如果浓度太高，可能冷却后又会沉淀析出来。
在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl) CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物而不沉淀核酸。通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。
2×CTAB提取缓冲液成分：2%(w/v)CTAB，100mM Tris (pH 8.0)，20mM EDTA,1.4 MNaCl,，0.2%(v/v) 还原剂(随用随加) 。
参考资料来源：百度百科——十六烷基三甲基溴化铵
2.65℃水浴，45min，期间颠倒数次。
3.加入Tris饱和酚/氯仿（1：1），颠倒混匀5min；12000rpm 离心10min
4.取上清（约500ul）于新的离心管中，加入等体积的氯仿/异戊醇（24:1），充分混匀。
5.12000rpm，10min；取上清，加入1ml -20℃预冷的无水乙醇，置于-20℃，30-40min。
6.12000rpm，10min；弃上清，加入500ul ddH2O 溶解沉淀。
7.加入120ul 浓度为100ug/ml 的RNase，使终浓度为20ug/ml，混匀，室温放置10min。
8.将上述DNA溶液加入到纯化柱子，静置5分钟，12000rpm离心，2min，收集溶液。
9.向离心后的液体中，加入25ul 3M NaAC（pH5.2）和525ul 异丙醇，混匀室温放置5min。
10.12000rpm，8min，弃上清，用70%乙醇洗涤两遍沉淀。
11.去除干净多余的乙醇，用100ul ddH2O溶解。
12.置于-20℃，保存。
2xCTAB提取液（含0.2%的β-巯基乙醇）：CTAB-2g；NaCl-8.18g；EDTA0.74g 1M Tris-HCl 10ml（pH8.0）；200ul β-巯基乙醇。
3M 醋酸钠：40.8g 三水醋酸钠，加入40ml ddH2O 溶解，用冰醋酸调到pH5.2，最后定容到100ml。
或
NaAc，Na+中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，而易于聚集沉淀。
http://wenku.baidu.com/view/b622001e650e52ea55189866.html
提取DNA配方
CTAB为十六烷基三甲基溴化铵，
CTAB提取缓冲液的经典配方
Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏；
EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性；
NaCl 提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中；
Cβ-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除基因组DNA。
CTAB 4g
NaCl 16.364 g
1M Tris-HCl 20ml( PH8.0)
0.5M EDTA 8ml，先用70ml ddH2O溶解, 再定容至200ml灭菌
冷却后0.2-1% 2-巯基乙醇（400ul）氯仿-异戊醇（24：1）：先加96ml氯仿，再加4ml异戊醇，摇匀即可。
提取RNA配方
2% CTAB（W/V）
2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP（W/V）
100 mM Tris-HCl（pH8.0,DEPC处理的水配置）
25mM EDTA
0.5g/L 亚精胺Spermidine
2.0M NaCl，2%巯基乙醇（V/V，使用前加入）
由于在高温灭菌条件下，Tris-HCl要和DEPC发生反应，所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC 处理的水配制即可。
晚上好，稀释CTAB的良溶剂是纯水，也可以溶于极性质子溶剂比如甲醇、乙醇和IPA，微溶于乙二醇醚和丙二醇醚。配置3%的CTAB就是3克CTAB+97克纯水或者IPA即可，需要注意的是CTAB是阳离子弱酸性表面活性剂，它与水互溶时要提前除去硬水成份防止缔合沉淀，请小试并酌情参考。
Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境，防止核酸被破坏；EDTA结合Mg2+或Mn2+离子，抑制DNase活性；NaCl 提供一个高盐环境，使DNP充分溶解，在于液相中； CTAB溶解细胞膜，并结合核酸，使核酸便于分离；
β-巯基乙醇是抗氧化剂，有效地防止酚氧化成醌，避免褐变，使酚容易去除。这些成份虽然对皮肤有灼伤作用，但程度不会很大，如果溅到皮肤上，用清水冲洗即可，不会严重伤害皮肤。
