分析纯的三氟乙酸的保质期是多少

三氟乙酸实验室如何存放？ 我是做蛋白质相关实验的，用到三氟乙酸

多吃点碱性的东西应该好点吧,主要还是做实验时做好防护工作,带好手套口罩,必要时带防毒面具,原理热源和酸类物质

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超纯水冲洗柱——流动相分离样品——超纯水冲洗柱 ——纯乙睛保存柱

1． 电源准备

打开稳压器电源开关，须待电压指示至 220V 后，才能开启其他有关设备。

2． HP1100 高效液相色谱仪的准备

试剂：三氟乙酸

乙腈(Fisher 公司产品色谱纯)

超纯水(Millipore 超纯水)

冰乙酸

溶液配置：贮液瓶与流动相的准备

A 液 0.1%三氟乙酸 （三氟乙酸 1ml，超纯水 999ml）室温保存

B 液 60%乙腈 （乙腈 600ml， 超纯水 400ml）室温保存

样品液 0.01%乙酸 （冰乙酸0.01ml，超纯水 100ml）室温保存

泵头冲洗液：精滤后超纯水或者是 1%色谱纯甲醇 室温保存

注：贮液瓶应用超纯水清洗干净，备用。

流动相溶剂用洁净硼砂漏斗精滤除去微小颗粒。

操作者必须清楚并注明 A、B 贮液瓶盛装为何种溶剂。

冲 洗 泵 头 ： 用 注 射 管 于 软 塑 料 管 末 端 抽 吸 至 有 水 流 出 ， 调 节 流 速 开 关 控 制 流 速 为20-30drop/min.。

① 流动相管道排气

如果管道中气泡较多，可通过弹击管道，排除气泡，并逆时针旋转脱气泵活塞使其松动，用注射管于流动相出口的塑料管末端抽吸至管道内气泡排除完全。操作时，我们通常已经打开了脱气机（气泡严重影响分离效果，所以观察管道中液体是否有气泡非常重要。）

② 开机

③ 进入 HP1100 操作系统

a.双击 WIN-95 操作界面中左下角 Instrument 1 online 图标，进入 HP1100 工作站软件操作界面。单击工作站操作界面上方 Run control 菜单，在下拉菜单中找到 Sample Info 子菜单，单击。在 Sample Info 信息框内定义操作者、样品前缀及编号、保存路径等参数。在保存路径项下，将可定义子目录分别输入操作者拼音缩写，以方便检索时互不干扰。

b.等待工作站操作界面中泵、柱温箱、检测器各指示图标由灰色转变为绿色后，单击泵、检测器各图标可从其各自弹出的菜单中设定流动相各溶剂比例、流速等。

（1）

为了配制一定pH的缓冲溶液，首先选定一个弱酸，它的pKaφ尽可能接近所需配制的缓冲溶液的pH值，然后计算酸与碱的浓度比，根据此浓度比便可配制所需缓冲溶液。

以上主要以弱酸及其盐组成的缓冲溶液为例说明它的作用原理、pH计算和配制方法。对于弱碱及其盐组成的缓冲溶液可采用相同的方法。

缓冲溶液在物质分离和成分分析等方面应用广泛，如鉴定Mg2+ 离子时，可用下面的反应：

白色磷酸铵镁沉淀溶于酸，故反应需在碱性溶液中进行，但碱性太强，可能生成白色Mg（OH）2沉淀，所以反应的pH值需控制在一定范围内，因此利用NH3·H2O和NH4Cl组成的缓冲溶液，保持溶液的pH值条件下，进行上述反应。

常用缓冲液配制

枸橼酸-磷酸氢二钠

甲液:取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。

乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。

取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml，混合，摇匀，即得。

氨－氯化铵缓冲液

取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml， 再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0，即得。

氨－氯化铵缓冲液

取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氨溶液35ml，再加水稀释至100ml，即得。

醋酸－醋酸钠缓冲液

取无水醋酸钠20g，加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。

2)冰上解育20~30 min。

3)微型离心机，室温离心15 min。沉淀物如可见，为黏稠的带黄褐色的胶状物。用一精细的巴氏吸管吸出上清。努力除去尽可能多的上清。如取100ul样品进行沉淀，沉淀物将是可见的。

4)加3倍体积（原样品体积的丙酮（室温)。样品在室温下静置约10 min, 使TCA+DOC溶于丙酮。

5)室温离心15 min。其时，沉淀物的大小和物理特性类似于一点灰尘。约10ug或更多一点的蛋白质即可看见。有时，会得到白色的盐类（如KCl等）沉淀物。用极精细的巴氏吸管移去上清。沉淀物置冰上干燥10 min(敞开1.5-ml离心管的盖)。干燥的沉淀物可长时间（>1 个月）地保存于-20℃。

6) 用含 2-巯基乙醇的样品缓冲液（lx)(对于标准的小型平板凝胶装置，用 6ul) 溶解沉淀物。如仍有少量的TCA 残留物，溴酚蓝将转呈黄色。这无关紧要，因为电泳时有足够的缓冲能力来中和痕量 TCA。如沉淀物中有残留的 KCl, 将样品缓冲液加于沉淀的蛋白质时，将会形成絮状的白色沉淀（十二烷基硫酸钾）。如十二烷基硫酸钾发生沉淀，就很难将样品加于 SDS 凝胶，但样品一旦加到凝胶上，电泳将会很好地进行。

7) 若需分子量标准参照物，则可用不含 2-巯基乙醇的 lxSDS 样品缓冲液将蛋白质分子量（MW) 标准配制成每毫升含 0.5 mg 总蛋白的储液。分成小等分试样 (50ul) 储存于-20℃。对于银染，可取 2ul 分子量标准+4ul 含 2-巯基乙醇的样品缓冲液，至终体积为6ul。