he染色的操作步骤是什么?
he染色的操作步骤:
将石蜡切片置于烘箱中60℃烤1~2h;
石蜡切片常规二甲苯,乙醇脱蜡至水,
苏木素染10分钟,
流水冲洗,去余色,
0.7%盐酸乙醇分化数秒钟,
流水冲洗,切片变蓝约15分钟,
7.95%乙醇30秒钟,
8.酒精性伊红染30秒,
I 95%乙醇30秒钟,
II 95%乙醇30秒钟,
I 100%乙醇30秒钟,
II100%乙醇30秒钟,
石碳酸二甲苯30秒钟,(1: 4石碳酸1-二甲苯4)
I二甲苯30秒钟,
II二甲苯30秒钟,
中性树胶封片。
HE染色操作流程:
HE染色,即是苏木精-伊红染色法,是形态学最常用的染色方法,在质量较佳的HE染色切片上,各种组织或细胞的一般形态结特点都可以观察到。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色流程(1)二甲苯(Ⅰ) 15min (2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min (3)100%乙醇(Ⅰ) 5min (4)100%乙醇(Ⅱ) 5 min (5)80%乙醇 5min (6)蒸馏水 5 min (7)苏木精液染色 5 min (8 ) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s (9) 1%盐酸乙醇 1-3 s (10) 稍水洗 10-30 s (13)蒸馏水过洗 1-2 s (14) 0.5%伊红液染色 1-3 min (15) 蒸馏水稍洗 1-2 s (16) 80%乙醇稍洗 1-2 s (17) 95%乙醇(Ⅰ) 2-3 s (18) 95%乙醇(Ⅱ) 3-5 s (19) 无水乙醇 5-10 min (20) 石炭酸二甲苯 5-10 min (21) 二甲苯(Ⅰ) 2 min (22) 二甲苯(Ⅱ) 2 min (23) 二甲苯(Ⅲ) 2 min (24) 中性树胶封固 注:①第(10)、(11)步可省去,(12)步冲水时间需延长至20-30min.②第(20)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇.* 冷冻切片HE染色步骤:(1)冰冻切片固定 10~30 s (2)稍水洗 2 s (3)苏木精液染色(60℃) 30~60 s (4)流水洗去苏木精液 10 s (5)1%盐酸乙醇 3 s (6)稍水洗 2 s (7)促蓝液返蓝 10 s (8)流水冲洗 15~30 s (9)0.5%曙红液染色 30~60 s (10)蒸馏水稍洗 2 s (11)80%乙醇 2 s (12)95%乙醇 2 s (13)无水乙醇 2 s (14)石炭酸二甲苯 3 s (15)二甲苯(Ⅰ) 3 s (16)二甲苯(Ⅱ) 3 s (17)中性树胶封固.注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇.染色结果:细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色.4.12 切片脱水透明 切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖.如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色.切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石碳酸二甲苯进行脱水.石碳酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去.
1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,4μm切片。
2.切片常规用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸馏水洗2min。
3.苏木素染色5min,自来水冲洗。
4.盐酸乙醇分化30s(提插数下)。
5.自来水浸泡15min或温水(约50℃)5min。
6.置伊红液2min。
7.常规脱水,透明,封片:95%乙醇(I)min→95%乙醇(Ⅱ)1min→100%乙醇(I)1min→100%乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(I)1min→二甲苯(Ⅱ)1min→中性树脂封固。
下午好,二甲苯和纯石膏粉中的二水硫酸钙之间不发生化学反应,也不与其他无机填料例如二氧化硅和碳酸钙等等反应。非酸碱的非极性烃类溶剂几乎都不与石膏粉反应很稳定可以直接用于溶剂型白色油漆溶解稀释。
B、吸烟产生的烟雾含有许多有害物质,如尼古丁等,属于居室空气污染物,故B不选;
C、劣质粘合剂释放出的有害物质甲醛、二甲苯等,属于居室空气污染物,故C不选;
D、烹调时产生的油烟中含有一氧化碳、二氧化硫等,属于居室空气污染物,故D不选;
故选A.
加饱和的碳酸氢钠溶液,分液,再向水层中加入硫酸,分离出苯甲酸
向油层加入氢氧化钠溶液再分液,向水层中加入盐酸,分离出间甲基苯酚
油层即为间二甲苯
原因是硝基的体积较大,当硝基的邻位有两个甲基时,由于空间拥挤而使硝基上氮-氧双键的P轨道不能与苯环上的P轨道对称轴完全平行,即硝基氮-氧双键与苯环的共平面性受到破坏,减弱了硝基、苯环与羟基的共轭离域,致使酸性相应降低,这是甲基空间效应作用的结果,而前面化合物上的甲基离硝基较远,没有明显影响,所以产生上述结果。