做MTT时用的三联液配方是SDS10g，异丁醇5ml，10M HCl 0.1ml，没有异丁醇的话，用异丙醇行吗？急！！！
应该明确实验前
1。选择适当浓度的细胞接种。的内贴壁细胞的96孔培养板中，在正常情况下，包括约105个细胞。但由于该地区有很大的不同，在不同的细胞附着在MTT法，预实验检测其贴壁率，倍增时间以及种子细胞的生长曲线的条件下，确定测试孔接种细胞数和温育时间，为了确保列车终止诱导的细胞过满。因此，在为了保证MTT晶体形成的细胞数成比例呈线性关系。否则，细胞的数目的敏感性降低太多，太少没有观察到差异。
2。集合中的药物浓度。请务必看到更多的文献，参考其他人的结果，然后给出一个比较大的范围内的第一次筛选。根据自己的筛选狭窄的浓度和时间范围再细筛的结果。记住！否则，可能会使用的时间和浓度的药物的有效浓度和时间。
3。设置的时间点。 OD值吗？在不同的时间点，输入Excel工作表中，并最终在不同时间点的抑制率变化的测量，绘制图形的变化，当曲线变得平坦（高原）的时间点，应使用最好时间点（因为这个时候的细胞增殖抑制最明显的表现）。
4。孵化时间。 200UL 10 4-5电源增殖细胞的培养液中是难以维持68H，营养不足，细胞增殖阶段逐渐趋向G0期往往仍影响的结果，我们在48小时介质中被改变了。
5.MTT法只能测定相对细胞数和相对活力，不能绝对数量测定细胞。做MTT，尽量无菌操作，因为细菌也可以导致MTT比色OD值增加。
6。理论未必全是。要根据自己的实际情况进行调整。
实验对照孔加药孔孔应设置为零。零孔加培养基，MTT，二甲亚砜。控制井和计量孔必须加细胞培养基中，MTT法，二甲亚砜，和不同的是添??加到媒体控制井，而溶解该药物中加入不同浓度的药物的给药组。
8。避免血清干涉。含15％FBS培养基中培养的细胞中时，高血清物质会影响试验井的光吸收值。将测试的灵敏度测试增加背景。因此，它通常是优选的是小于10％胎牛血清的培养液中。着色后，尽量吸净培养孔残余的培养基。
实验步骤
贴壁细胞：
1。上收集的细胞数，调整浓度的细胞悬浮液加入到每个孔100ul铺板所测试的细胞调节至密度为1000-10000孔（边缘？孔填充用无菌PBS中）。
2.5％CO2，37℃孵育，直到细胞单层覆盖的底部的孔（96 - 孔平底板），添加药物的浓度梯度，在原则上，细胞的粘附给药或两小时或半天的时间，但我们常在前一天下午铺板第二天早上剂量。一般为5-7梯度，每孔品100μl，位于3-5井。建议设5，否则难以体现
3.5％的CO2，并在37°C孵育16-48小时，倒置显微镜下观察到的真实情况。
4。添加到每个的阱20ulMTT溶液（5mg/mL的，或0.5％的MTT），并培养4小时。用MTT反应的药物可以先离心丢弃培养基，用PBS仔细洗涤2-3次，然后添加到培养基中含有的MTT。
5。终止的文化，并认真吸收孔培养基。
6每孔加入150ul二甲亚砜，设置振动筛在低速振荡10分钟的晶体完全溶解。在OD490nm的酶联免疫吸附检测器测量的每个孔的吸光值。
7。同时置零孔（培养基，MTT，二甲亚砜），对照孔（细胞，相同浓度的药物溶出介质，培养基，MTT法，二甲亚砜）
悬浮细胞：
1）收集对数生长期细胞，调节细胞悬液浓度为1×106互补序列①1640（无血清）介质40ul②加放线菌素D（有毒）10UL稀释培养基升的？克/毫升，需要预先测试，以找到最佳稀释,1:10-1：20）③需要检测对象10UL④细胞悬浮液50μl（即，5×104cell /孔）的100ul加入96 - 孔板（边缘？孔填充用无菌水）。建立控制每块板（加100（原液100 1640）。
2）在37℃，5％CO2孵育16-48小时，并在倒置显微镜下观察。
3）每孔加入10微升MTT溶液（5毫克/毫升，或0.5％的MTT），并培养4 h。 （悬浮细胞推荐WST-1，培养4小时后可以直接跳到步骤4），直接酶联免疫吸附测定的OD570nm 630nm的校准测量每孔的吸光度值）
4）离心（ 1000转x10min）仔细吸掉上清液，每孔加入100微升二甲亚砜中，设置摇动器在低速振荡10分钟，完全溶解的结晶。在酶联免疫吸附测定OD570nm（630nm的校准）测量的吸光度值？为每个孔。
5）设置零孔（培养基，MTT，二甲基亚砜）对照孔（细胞，相同浓度的药物溶出介质中，在培养基中，MTT法，二甲亚砜），每个设置的3个井。
MTT准备
MTT通常情况下，最好使用4℃避光过滤器后两周内，或配制成20,10,5保存在 - 20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量包装，用黑袋或黑纸，铝箔及包装暗，避免分解。我一般都把MTT粉包装EP管，现有的服务直接添加到培养板，不需要一下子有这么多的，特别是当它绝对MTT变为灰绿色不能重复使用。
MTT致癌性，使用时要小心的那种透明薄膜手套的最佳条件。被称为MTT需要无菌，MTT细菌，是非常敏感的到96孔板一个PBS 黑暗中额外的时间并不重要，毕竟，时间是短暂的，你不用担心时，你可以把关了灯手术台。
制备MTT溶解，还配备用盐水在60℃水浴中进行增溶。
PBS配方：
氯化钠8克
KCL0.2克
磷酸氢二钠1.44克
>KH2PO40.24克
调pH值7.4
给定容量1L
细胞接种（平台）
细胞30代不要使用，因为状态并不好，培养板中使用一个很好的（最好是进口板），坏板或重复使用的板仅做预实验。
最佳接种密度计算出来的按照预实验接种后，细胞生长抑制率（或增值率），因为关于OD值吗？细胞密度10000/ml的测量时间间隔呈直线关系最好的，最可靠的结果。如果店铺是太稀细胞的杀伤不会很明显，可能都过于密集的细胞凋亡，细胞生长速度过快的营养是不够的，最后导致死亡。过密或过少的细胞，细胞增殖将是过快或过慢，差线性关系，其增值率。因此，MTT细胞的密度使用更10000/ml的，100ul /孔。
细胞密度的特点，不同的细胞，如果细胞刺激作用的药物，那么细胞浓度为小点，如果你这样做对细胞有抑制作用的药物，然后取更大一点细胞浓度，因此，与对照的差异，该数据是更好。悬浮细胞的各孔中的细胞数达到105，贴壁细胞103-104。
其他的声音：
第一个单元格播种密度不能太一般每孔1000就足够了，我想，宁少勿多。特别是对肿瘤细胞。 10000 /孔是太高，所以，即使药物，MTT法不能表达的最佳点板浓度在4000-5000 /孔，太少的SD值。
2.MTT本身是一个相当厚的实验约10％，增殖率的波动也就不足为奇了。特别是新手，有20％的波动也是常见的，因此它可能是由于技术原因，特别是种板技术必须过关的。
我MTT法检测肿瘤细胞，这些细胞长一开始我100000/ML浓度的疫苗接种，结果细胞长的太满，结果梯度也没有线性关系。调整后的浓度使用了40000?80000/ML浓度MTT法，做的好点的是60000?70000/ML组的浓度。 40000 / M的基团的浓度，是因为这些细胞是以下，药物作用或只是没有一个有良好的线性关系的梯度，根据细胞生长速度，以及药物的特性（的时间依赖关系，并的浓度依赖性的药物），以确定培养的时间是48小时或72小时。
一定要注意避免细胞的细胞悬液混合沉淀下来，在每个孔中的细胞数的范围，收到了一些必要再混合均匀。移液管操作要熟练，避免人为错误。虽然更准确比移液管移液管，但如果操作不熟悉，CV将在8％左右。此外，吹了太多的时间，也影响细胞活力。因此，熟练的鞋，尽快在黑板上。
让我谈谈我的一点经验：
1。狗新花样不能太多悬挂的总的3-4倍，吸液管液量可能会比较容易混合。 10毫升优选地安装的悬浮液中3?4毫升：该悬浮液的离心管太少容易吹气泡，悬浮液的特定也是不容易被风吹到单细胞悬浮液。 。 。
移液管移液管最好在1毫升左右：吸入过量的液体，看起来液管余下的数，如吹打容易起泡吸管吸了很多量过小，强度移液是不够的，将移液不均匀。如果吸液量1毫升稻草，总液量，在约5ml的好处
吸气时，悬挂在底部，然后抬起，但吹了下来，不留液体的表面，否则容易一拳砸的气泡。
4。狗新花样，你可以数100吹打均匀（前约30-50倍的吹打加细胞基本上差不多均匀。加细胞分别接种2孔反复移液管移液3次3次后，他们把他们的枪挂在5秒内的细胞悬液，然后划出一定的速度悬浮液）。
用吸头，每孔加入到细胞中不要太猛了，否则你会发现细胞在想要添加的移液管尖中的孔的底部的势头由于收集了一堆，一般在这种不均匀的分散液接触抑制周围的孔的底部的中心，影响细胞的生长。因此，速度不能太快，也不能太慢。我习惯了增加每块板水平握手后，左一个右其次，移动的答复中，细胞可以均匀地分散这些。 （铺板技术是MTT法的关键，也是基础，我们必须练好，一旦学生振荡器和混合与旋涡细胞，最后一个单元格都死了，使用这种方法是不建议混合细胞
BR />加入MTT
个人认为MTT最关键的是你的手机号码和MTT适当的比例补充说，真正起作用的，和具体的细胞数量之间的关系和真正的工作真的不好确定，我认为MTT支付超过最低量好一些
MTT各种报告的MTT，一般是过度10UL不够的，如果你不使用96孔板， MTT按照10％的比例超过100ul培养基地。，加入MTT振荡让MTT和媒介组合，但这个应该不大。
有个别的孔，如立即加入MTT变蓝黑色，污染的可能性是很大的，另一个在前面的MTT摊薄细胞仍然需要适当的方法来过滤消毒。可以加MTT前显微镜下才能看到，如果有一个孔染菌，染菌孔附近往往是 />
血清白蛋白对大多数的药物的组合的效果，它是可能的分开的药物和MTT一起看到的将反应MTT法不能反应，不必除去水培的含有药物的溶液，直接加。
上层清液
争：
1加DMSO液体吸掉，但培养液，紫色晶体吸收之前，该第一的平板离心机，2000转，5分钟，然后吸掉上清液（如果是悬浮细胞，此方法建议在2500rpm 10分钟离心分离的悬浮细胞，并做MTT的最好的圆底96孔板中的96 - 孔板，注意不要结晶颗粒吸掉上层清液后，建议每孔吸出150-160ul）
2。每次我都会MTT和孵育4小时，然后离心1000G 5分钟枪小心吸去上清液，或将一小部分蓝水晶吸出，所以还是建议翻转颠倒了！
另外，我们可以直接在板翻转颠倒（垫层滤纸）2-3倍的方式“吸”是不容易使细胞脱离出来。轻拍，或倾斜一点帮助吸液管，紫色晶体几乎没有可见的列，但你自己的细胞贴壁的前提下，比较监狱，半贴壁生长的细胞容易脱落。药物作用时间长，阴性对照组的细胞可能是由于过多离开MTT加入后形成的结晶漂起来，所以不能直接排放
MTT，这一步必须小心，不要使用贴在墙上倒立的方式，因为是不强大的单元格将被倒掉，从而影响OD值吗？悬浮细胞，不拍打上清液。 ，离心后，不拍打这种方法杀了人。
5。加入MTT反应完成后3-4h后，在96孔板的作用是从孵化器中删除要轻柔，避免振荡结晶，它溜了。您可以尝试在96孔板倾斜30度角，然后的枪口慢慢吸一些细胞排球吸，有些人会用移液器吸头吸病人，枪口下的强度和方向，以确保每个孔是不要让吸头接触到孔??底，一次后倾斜孔板，不反复倾斜的平直，这样也会使晶体脱落。
6。移液与医用注射器登上教训针对角线的经验教训沿着培养基MTT的墙壁，好像我1毫升针小心地吸可靠的比其他的方法，一般不吸紫色晶体。
避免上层清液和改进的方法
一般容易发现，即使贴壁细胞在96孔板离心式离心机，的MTT溶解在DMSO，结果是没有好，不能得到预期的结果重复性差。
解决方法1：以下文献方法：周建军等，评价抗癌物质活性的改良MTT法，中国期刊的药品，1993,24（10）:455-457 BR />
具体方法如下：
三溶解液：10％SDS，溶于蒸馏水中，5％异0.012mol/LHCL的。
三联溶解解决方案：SDS10g，异丁醇5毫升的10M盐酸0.1毫升双蒸水溶解配成100mL溶液
操作：细胞悬浮在培养板中，加一定密度的解决方案，90ul /孔管理，然后（悬浮细胞）在同一时间或4h后（贴壁细胞）通过加入不同浓度的药物10UL /空穴，位于三井。另外，每块板另一个没有零孔（仅添加到培养基中，无细胞和药物）培养2d后加入MTT溶液20ul /孔，和文化继续4小时，然后加入上述的三重液体品100μl/孔，在37℃静置过夜，用酶测定的标准仪器孔A570值？
优点：简化操作，提高了可靠性。
解决方法2：日本同事有一个新的试剂CCK-8试剂，CCK -8试剂可用于简单和准确的细胞的增殖和毒性分析其基本原理是：含有的试剂WST-8 [化学名称：2 - （2 - 甲氧基 - 4 - 硝基苯基） - 3 - （4 - 硝基苯基）-5 - （2,4 - 二磺酸苯基）-2H-四唑单钠盐]，这在电子载体1 - 甲氧基-5 - 甲基硫酸盐吩嗪二甲基（1 - 甲氧基PMS）线粒体脱氢酶的作用降低的高度水溶性的黄色染料（甲臜染料）A的产生与活细胞的数目的数目成正比，所以此功能可以用于直接的细胞增殖和毒性分析CCK-8试剂已预先装入的细胞增殖和毒性分析所需的组件，未经稀释，然后缓冲区或中等，没有任何放射性同位素和有机溶剂的CCK-8试剂。因此，没有特别的技能，你可以让每一个用户准确，可重复的实验结果。
★优势 / a>
1，简单的一个步骤的结果
2，节省时间，不需要预制开放
3，安全没有必要放射性同位素，有机溶剂
>
4，迅速消除溶解除沉操作
5，高灵敏度，灵敏度比MTT
6，重复性几个不错的步骤，无损，准确
是比较昂贵的，如果充分的资金，这是件好事。
★细胞增殖实验使用：
1，接种细胞悬液100μL96孔板，预先放置在37℃，在5％CO 2培养箱培养。
2在每个孔中引入CCK-8试剂10μl的。
培养板在孵化器1-4个小时。
4，测定吸光度在450nm波长为600nm或600nm的波长参考。
解决方法3：使用MTS / a>
解决方案4：
加入DMSO
放弃孔内液体，最好不要更换相同数量的实验DMSO加入DMSO清洁，直接加入到DMSO首先，除去上清液，沉淀将难溶于培养基颜色检测测量时，将影响最终的结果，但前提是不能使细胞与吸掉，因为错误是远大于培养基中没有放弃一个干净的错误，所以，以确保细胞的前提下，尽可能不虹??吸的培养液虹吸如果培养溶液不是一次性清洁空白孔应留下的培养液相同量的，所以检测时的培养液的影响，可以除去尽可能多的DMSO的量为100ul或150ul
1。添加的DMSO后使用振荡器轻轻振摇5 - 10分钟时间控制密切越好，放置时间长了会影响结果，该值将过大，其结果是不可靠的。
2。后加入DMSO排球反复抽吸溶，尽快解散后检测。实验孔是小的，它建议，这种方法，因为其更好的效果比振荡溶解。
3，或者在37度把培养箱中培养15分钟，溶解结晶
振荡，让甲溶解，以便更好地测量的吸光度振荡96孔板具体地说，振荡器，目的：凿孔泡沫。气泡的存在下，由于其光的反射和折射效果（原则读者是通过特定波长的测量样品中的特定物质样品的吸光度推测）的浓度，会导致结果抵消了测定OD值吗？
至于测定给出的波长是不同的颜色溶液，DMSO，溶解紫（红）色，490nm处的最大吸收值，而在ATCC的MTT试剂盒使用的是不DMSO，它的测定波长为570（在ELISA实验，OPD为底物测得的波长为492，选择的TMB底物溶液是450）SDS和酸化异丙醇选择570nm的，并建议作为参照波长等于655nm。
DMSO溶解经过10分钟内测，越放颜色越深，SDS溶解液测定吸光值，其值在三天内保持不变。
细胞密度太大测定吸光度细胞密度过大，吸光率也小另一个细胞状态的关系，细胞状态不好的吸光度值低少量的细胞，或短的时间内培养的OD值会比较低。每个洞之间的差异尤为明显说明可能存在的污染，空白孔的OD值过高，很可能是细菌的污染。
井直接OD值差别一般应在0.1-0.15不同的考虑：1。种子细胞不统一或疫苗接种时，应保证每一个孔一般为1000-10000元以及细胞细胞计数，加入细胞悬液培养基中定容，轻轻吹打几次，使细胞均匀分布的，因此，这是更好的不是直接加入预定体积的细胞悬浮液，接种疫苗应加入含有血清的介质2。粘附时间:18-24小时，如果没有，而不是悬浮细胞可虹吸
/>一般，为了实验的精度，和各浓度可提供5-6井可以最终的统计，可以除去的最大值和最小值，或荒谬的值？其特征在于，所述数据被除去，这些离谱数字细胞污染，是否在培养过程中细胞的死亡，文化，蒸发过度的附加组件的MTT溶液是不准确的，在5％二氧化碳培养箱中培养，在37°C，无论是时间常数（1-4小时）有密切的关系，当然的OD值的测定仪器状态是正常的，是非常重要的！（一般热身20分钟）。
MTT吸光度误差在0.2至0.8之间。分析化学相关的兰伯特Beer定律，朗伯 - 比尔定律骨密度分析偏差，通常在标准曲线的情况下是不是线性的，尤其是吸光物质的浓度较高时，可以清楚地看出通过原点到浓度轴弯曲的现象（吸光度轴弯曲）情况称为朗伯 - 比尔定律的偏离定量的曲线的弯曲部，将产生较大的误差。骨密度分析仪测量不准确的误差的主要来源。光度计具有一定程度的测量误差。这些错误可以是来自于光源不稳定，变化的实验条件下偶然不准确的读数。
光度计透射的标尺刻度是均匀的。吸光度标尺刻度不均匀。波动对传动比一定值时，读出的相同的工具吸光度读数波动不再是一个固定的值。吸收更大的错误读数波动而引起的透光率或大或小，浓度测量误差大，更大的吸光度，最好的光度当选的吸光度读数不下降在中间规模的要被测量的透射率T在15％至65％的范围内的溶液，或在两端时的吸光度，A是在0.2?0.8之间，为了确保较小的相对误差的甲= 0.434（或透射比T = 36.8％），最小相对误差的测量。
其他的声音：
最好的570nm波长过滤器，MTT吸光度测量。在此波长的峰值，在其他词语具有大致490nm处与其他波长的高灵敏度，但我的经验的灵敏度降低了一半。
2 BIO-TEK，我们使用ELx800，一般值2是可靠的，如果该值是要考虑它是否是一个错误在实验过程中，我已经看到了花园的一些职位OD值可能与活细胞数在0.2-1.2范围内具有良好的线性关系，复孔太大的区别，但OD值在0.3-0.9范围内的好，如果你的OD值？此范围之外的，做实验，细胞计数可能不适合，你应该调整细胞的数量。边缘效应
/>
孔一般只有空白，非培养细胞，或这四条线中的数据将是高或低的由圆圈包围的96孔板，96孔板的培养箱中因为缺乏湿度，和孵化器具有一定的温度，由于温度梯度，使得边缘的孔蒸发更快，导致的各个组成部分中的培养基中的浓度增加，导致这种现象的不同的细胞状态，它是必要的，以保证湿度的培养箱中，并以降低的频率和持续时间的开关培养箱。方法：所有周围的圆形孔的孔板，“否”，的影响是非常大的，最外面的圆必须添加水，PBS或培养液中，只要你能防止水分蒸发。
如何计算的IC50后的寇方法：
（1）lgIC50 = XM-I（P- （3-PM-PN）/ 4）
XM：LG的最大剂量
I：LG（最大剂量/相邻剂量）
P ：正反应速率和
PM：最大的阳性率
PN：最小阳性率
例如：各组浓度0.1,0.01， 0.001,0.0001,0.00001,0.000001，稀释10倍，与最大浓度为0.1的抑制率分别为0.95，0.80，0.65,0.43,0.21,0.06到
计算公式：
PM =在
Pn的0.95
= 0.06
P = 0.95 +0.80 +0.65 +0.43 +0.21 +0.06 = 3.1
XM = lg0.1 = -1
LGI = lg0.1/0.01 = 1
lgIC50 = -1-1 *（3.1-（3-0.95- 0.06）/ 4）= -3.6025
IC50 = 0.00025
（2）Bliss法：自己的检查书
（3）IC50计算软件，请参阅下文附件
（4），使用EXCEL趋势线寻求IC50约LD50的方法与此类似！
（5）网上寻求IC50或EC50： HREF =“htt??p://chiryo.phar.nagoya-cu.ac.jp/javastat/JavaStat-j.htm”目标=“_blank”>http://chiryo.phar.nagoya-cu.ac.jp/javastat / JavaStat-j.htm
结果统计
数值应用SPSS软件进行方差分析，P <0.05显著差异（P <0.01）的差异是非常显著的时间为横轴，吸光度值上的垂直轴绘制以x±s行细胞生物学，具体评价式IC50的细胞死亡的抑制率％= OD控制基团-OD实验组/ OD控制组
可以做excel表格两两比较，T-测试，你可以参考你的数据应该是指多个样本T检验，方差分析软件SPSS或SAS。
/>口复用：
板使用一个很好的（最好是进口板），坏板或重用板仅做预实验。一般贴壁细胞生长的重用培养板效果不是很好，因为培养板表面涂了一层的贴壁细胞的物质，在生产，可能会失去清洁后悬挂或半悬浮培养细胞的生长也建议不要使用太多次，甚至进口的板子，次数不超过3次，最终测量值的1/3，什么最好的价值。
板块强烈建议不要重复使用：泡沫酸，但泡完酸板是非常有利于细胞的生长，会有不良帖子壁，细胞生长缓慢，等.2，非常彻底的消毒有关的董事会，如果存在的话，那么运行的风险.3重复使用洗板。不干净，在训练过程中容易出现杂质
再利用的做法：
洗涤2％的NaOH浸泡4小时，然后浸泡4小时1％盐酸，水为15倍，用蒸馏水洗涤三次，干燥，UV照射过夜（UV多于两个小时消毒罐）
实践：
气泡酸2-4小时，老师让我们做了四个多小时（普通玻璃仪器过夜）。捞出，冲洗，干燥，紫外线照射过夜。估计收集在一起与其他钴60辐照灭菌。
/>做法：
做MTT用水和清洁剂的水冲洗板，然后用洗衣粉水（注意最好让清洁剂的第一打开）几个小时。，冲洗
齿轮机构可用于传递空问任意两轴问的运动和动力，具有传动比恒定、效率高、运行平稳等优点，是现代机械中应用最广泛的一-种传动型式。汽车上用到街轮传动的部件有驱动桥、变速器、发动机、方向机等总成，不同部件由于工作要求的不同，而采用形式不同、大小不一的齿轮，如圆柱齿轮、圆锥齿轮、双曲线街轮等、车辆齿轮油是车辆变速器、驱动桥等齿轮传动机构所用的润滑油，为保证传动的顺利进行，在使用中必须严格按规定要求选用相应的齿轮油，否则会降低齿轮装置的使用寿命，甚至造成早期损坏。1 车辆齿轮传动机构的工作特点及对齿轮油的性能要求
车辆传动装置中的齿轮在工作过程中要传递较大的工作载荷，而且常常要同时承受圆周方向、直径方向和轴线方向等多个方向的作用力，受力情况非常复杂；齿轮啮合时，两齿廓沿啮合点的公切线方向还会产生一定的相对滑动。特别是双曲线齿轮，两齿轴线在空中交错，齿长方向仍是弧形，齿面载荷可高达1．7GPa，冲击载荷可高达2．8GPa，且齿面要以很高的速度滑移，产生强烈的摩擦，使得齿面局部温度骤升，很容易出现齿面烧结或齿面胶合等损伤。在如此苛刻的工况下，为保证齿轮机构能够正常工作，齿轮油必须满足如下性能要求：
1．1 良好的极压性
即在摩擦面接触压力非常高、油膜容易破裂的润滑条件下，能够防止出现齿面烧结或齿面胶合等摩擦损伤。极压性的改善必须依靠极压添加剂，它是一种分子中含有氯、硫、磷等元素的化合物，这些化合物在摩擦表面的温度达到足够高时，便与齿轮金属表面发生化学反应，生成氯化铁、硫化铁、磷酸铁薄膜，此固态膜的临界剪切强度低于基本金属，摩擦副滑动时的剪切运动就在固态膜中进行，从而防止金属表面出现摩擦损伤。
1．2适当的粘度
车辆齿轮在正常运转条件下，齿面经常处于弹性流体动力润滑状态，此时，齿轮油的粘度对承载能力有重要影响。油的粘度高，弹性流体动力润滑油膜厚度大．齿轮油的承载能力高，有利于齿面保护，但是粘度不是越高越好。因为齿轮工作时搅动齿轮油，液体内摩擦产生摩擦热，会使油温升高，导致齿轮整体温度和齿面温度随之升高，油膜容易被破坏。因此，要求齿轮油的粘度要适当，具体说应满足如下要求：在最低工作温度下的最大粘度须能保证汽车不经预热可以顺利起步，在一般运行：I：况下齿轮油内摩擦消耗不应使所传递的功率明显下降，在最高工作温度时的粘度须保证齿轮的可靠润滑。
1．3 良好的粘温性能
即随着工作温度的变化，粘度变化要尽可能小，以保证在低温时具有足够的流动性，保证汽车起步时有足够量的油带到齿面及轴承处，防止出现摩擦损伤。在高温时粘度不致降低太多，能形成足够厚的润滑油膜。
车辆齿轮油除要满足以上性能要求外，还应具有良好的热氧化安定性、抗泡性，对金属腐蚀性要小，储存安全性要好等
2 车辆齿轮油的分类
车辆齿轮油采用性能分类和粘度分类两种方法目前世界各国广泛采用荚旧石油学会(AP1)的性能分类和美国汽车工程师协会(SAE)的粘度分类方法，我国也等效采用上述分类的规格标准，参照1982年美国API汽车变速器和驱动桥润滑剂的性能分类及SAE的J306规格，制定了GB7631．7—89标准及分类办法
根据新的分类标准，我国70年代开发的馏分型车辆齿轮油，使用硫一磷一氯一锌犁添加剂，其产品质量水平大致相当于APl的GL－3和GL一4，我国开发的使用硫一磷型添加剂的新一代车辆齿轮油，其性能符合API中GL一5的规格标准，而且每一质量档次的油品均有不同的粘度等级(牌号)供应，即90、140、75w、80W／90、85W／90、85w／l40等牌号，完全可以满足各种车辆(包括进口车辆)的使用要求。
3 车辆齿轮油的选用原则
正确选用齿轮油必须做到两点： 一是根据街轮的类型和工作条件确定油品的质量档次；二是根据最低使用环境温度和齿轮传动装置的运行最高温度来确定粘度等级(牌号)
3．1 质量档次的选择
汽车齿轮油质量档次的选择{三要应依据齿轮的类型及其：r作条件 如果主减速器是双曲线齿轮且齿面负荷在2000MPa以上滑移速度超过l0m／s、油温高达120～130℃以上的车辆，如北京切诺基、红旗和进口高级轿车，必须选用含有大量极压剂的重负荷车辆齿轮油(GL一5)；如果主减速器是双曲线齿轮、但负荷较小(不超过2000MPa)、齿面滑移速度在1．5～8m／s的车辆，如：EQl090、桑塔纳、夏利等，应选中负荷齿轮油(GL一4)；某些结构比较紧凑的越野车和进I]载货乍，如红岩cQ一261、奔驰20206、斯太尔等，主减速器虽为螺旋伞齿轮传动，但工作条件也比较苛刻．它们也必须使用中负荷齿轮油(GL一4)，不可使用极压抗磨性很低的普通车辆齿轮油；若后桥主减速器是螺旋伞齿轮、且工作条件苛刻程度一般的车辆，如：CA30A、JNl50等，选用普通车辆齿轮油(GL一3)即可。
车辆的手动变速器、分动器的齿轮都是圆柱直齿轮或斜齿轮，负荷一般低于2000MPa，转速较快，容易形成流体(轻负荷)或弹性流体(重负荷)润滑油膜，同时各档齿轮交替工作，所以工作条件比主减速器温和．选用含非活性抗磨剂的或少量极压抗磨刹的普通车辆齿轮油(GL一3)即能满足润滑要求 转向机构的齿轮传动部分一般和手动变速器使用同一种润滑油
3．2粘度等级的选择
1：辆街轮油粘度等级的选择主要依据使用时的环境温度，保证齿轮在最低环境温度和装置的最高运行温度下都能得到可靠}润滑。通常，我国南方地区可选川90号或l40号油，东北及西北寒Ⅸ。宜选用80W／90或75W／90号多级汕，其余中部地区宜选用；85w／90或85W／l40号多级油
4 选用车辆齿轮油的注意事项
为使车辆中的踏轮装置能导到可靠润滑，保证车辆始终保持良好得工作状况，前先必须依据主减速器齿轮的类型及工作条件，正确选用相应质量档次的齿轮油。不能用高(或低)质量档次的齿轮油来替代低(或高)质量档次的油。
某些驾驶员和汽车维修人员，由于不了解双曲线齿轮油的特点，片面地认为双曲线齿轮油比普通斯轮油性能好．因此，在遇到没有现成的普通齿轮油时，或为了“爱护”车辆，而用双曲线齿轮油来代替普通齿轮油．加入汽车变速箱殊不知这仅仅会带来不必要的经济损失(因双曲线齿轮油较贵)，而且会造成变速箱齿轮的腐蚀性磨损，不利于变速器的正常工作
因为双曲线齿轮在啮合传动过程中，传递的压力很高、相对滑移速度很大，因而产生很高的瞬时温度(600～800℃)，而一般的油性添加剂在l00℃左有就会从摩擦表面脱落，油膜被破坏。在这种极压条件下．为防止磨损、擦伤和胶合，必须降低金属接触面的摩擦，所以双曲线齿轮油中加入了含氯、硫、磷等元素的有机化合物作为极压添加剂。在极压条件下，这些添加剂在摩擦面的高温部分与金属反应，生成了剪应力和熔点都比金属低的化合物，即在啮合齿面上生成了一层假润滑层，从而防止接触表面咬合或熔合。这种假润滑层是由摩擦表面金属与添加剂分子中各种活性基因起化学作用而形成的、多数情况下，极压添加剂的效果取决于形成的金属硫化物、氯化物以及磷与金属的化合物．由此可以看出：它是依靠腐蚀”金属表面而起到极压抗磨作用的。其中，含硫添加剂对有色金属，尤其对铜及其合金有较强的腐蚀作用，含氯添加剂作用时生成的氯化铁膜易发生水解，生成盐酸，对金属产生腐蚀，对于普通渐开线齿轮传动，由于齿面单位压力较低、且工作温度不高(一般低于90。C)，所以油膜不易破裂，润滑条件较好，故不必使用极压添加剂。若使用双曲线齿轮油，从上述极压添加剂的作用机理可知，势必会有部分添加剂产生作用，从而 使齿轮产生不必要的腐蚀损伤。
因此在选用齿轮油和其他润滑油时，不能简单的 将油品性能的好坏与油品的质量档次联系起来。正确 的做法应该是根据各类齿轮机构不同的传动特点，选 用性能(包括质量档次和粘度级别)合适的齿轮油。只有这样，才能保证传动机构始终处于良好的运行状态之中。
首先大类是按工作原理分：
1、叶片式泵
叶片式泵可分为：离心泵、混流泵、轴流泵、旋涡泵。
离心泵又可分单级泵、多级泵。
单级泵可分为：单吸泵、双吸泵、自吸泵、非自吸泵等。
多级泵可分为：节段式、涡壳式。
混流泵可分涡壳式和导叶式。
轴流泵可分为固定叶片和可调叶片。
旋涡泵也可分为单吸泵、双吸泵、自吸泵、非自吸泵等。
2、容积式泵
容积泵可分为往复泵、转子泵。
容积式泵是依靠工作元件在泵缸内作往复或回转运动，使工作容积交替地增大和缩小，以实现液体的吸入和排出。工作元件作往复运动的容积式泵称为往复泵，作回转运动的称为回转泵。前者的吸入和排出过程在同一泵缸内交替进行，并由吸入阀和排出阀加以控制；后者则是通过齿轮、螺杆、叶形转子或滑片等工作元件的旋转作用，迫使液体从吸入侧转移到排出侧。
容积式泵在一定转速或往复次数下的流量是一定的,几乎不随压力而改变；往复泵的流量和压力有较大脉动，需要采取相应的消减脉动措施；回转泵一般无脉动或只有小的脉动；具有自吸能力，泵启动后即能抽除管路中的空气吸入液体；启动泵时必须将排出管路阀门完全打开；往复泵适用于高压力和小流量；回转泵适用于中小流量和较高压力；往复泵适宜输送清洁的液体或气液混合物。总的来说，容积泵的效率高于动力式泵。
3、喷射式泵
是靠工作流体产生的高速射流引射流体，然后再通过动量交换而使被引射流体的能量增加。
动力式泵靠快速旋转的叶轮对液体的作用力，将机械能传递给液体,使其动能和压力能增加，然后再通过泵缸，将大部分动能转换为压力能而实现输送。动力式泵又称叶轮式泵或叶片式泵。离心泵是最常见的动力式泵。
动力式泵在一定转速下产生的扬程有一限定值,扬程随流量而改变；工作稳定，输送连续，流量和压力无脉动；一般无自吸能力，需要将泵先灌满液体或将管路抽成真空后才能开始工作 ；适用性能范围广；适宜输送粘度很小的清洁液体，特殊设计的泵可输送泥浆、污水等或水输固体物。动力式泵主要用于给水、排水、灌溉、流程液体输送、电站蓄能、液压传动和船舶喷射推进等。
4、泵的其它分类
泵除按工作原理分类外，还可按其他方法分类和命名。例如，按驱动方法可分为电动泵、汽轮机泵、柴油机泵和水轮泵等；按结构可分为单级泵和多级泵；按用途可分为锅炉给水泵和计量泵等；按输送液体的性质可分为水泵、油泵和泥浆泵等。
泵还可以按泵轴位置分为:
1)立式泵
2)卧式泵
按吸口数目分为:
1))单吸泵 (single suction pump)
2))双吸泵 (double suction pump)
按驱动泵的原动机来分:
1.电动泵
2.汽轮机泵
3.柴油机泵
4.水轮泵
今天择校君就大家所关注的学籍问题做一个全面的解析，希望对您选择国际学校有所帮助。
国际学校学籍问题最全解析
“学籍”为何物？
学籍是指一个学生属于某学校的一种法律上的身份或者资格，登记学生姓名的册子，专指作为某校学生的资格。学籍之于学生，就如同身份证之于中国人一样重要，谁也不想成为黑户。
如果是走常规其中所有环节都由学校的教务部门代劳了，所以关于学籍的处理问题我们都知之甚少。
只有非常规求学路径如休学、退学、转学、借读、读国际学校才会涉及到学籍的处理。由于没有学籍的学生就不能以应届生的身份报名参加高考，所以家长们都比较上心。
国际学校学籍问题最全解析
“学籍”的作用？
1.没有学籍的学生，在学籍管理系统中就不具有这种“学生身份”。可能导致学生无法办理与学籍相关的各种管理服务业务，甚至影响升学。
2.只有在学籍管理系统中有档案信息，学生才有报考中高考的资格。但是也必须符合“人籍一致”，如果学生在深圳借读初中，学籍在上海，则中考必须回上海考。
3.只有有学籍注册的学生，其最高学历可以在“学信网”上查到最高学历。但是对于出国留学的家庭来说，学信网上查不到之后的学历，可以拿国外毕业证书做学历认证，依然有效。
国际学校学籍问题最全解析
学籍对国际学校学生的影响？
对纯外籍国际学校学生的影响：满足入读这类学校的孩子本身持有的是外籍身份，我们不需要担心学籍问题。
对公办民办学校国际班学生的影响：这类学校走的是双轨路线，即国内高考+国际考试，故毕业以后可以拿到所谓的“双证”。但是国内的毕业证书会备注（融合课程），较传统体制内高中毕业证有别。这类学校会给学生注册国内学籍的同时，也会注册国外学籍
目前，经深圳市教育局批准的民办高中"国际课程实验班"有18所：
国际学校学籍问题最全解析
据择校君了解，就读国际学校的孩子所学课程是国际课程，基本上已经不再适合参加高考，虽然这学学校提供学籍，但家长在为孩子规划时一定要有所侧重，最好选其中一条路即可。
对私立/民办国际课程学校学生的影响：学校会直接注册海外学籍或者报名海外考试资格，保证最终孩子可以拿到国外的毕业证或者考试证书，确保入读海外大学，明确表示没有国内国籍。
国际学校学籍问题最全解析
对于明确读国际学校不要国内学籍的家长，原来的学籍怎么处理？
学生在国内的学籍终止，如果要在中国官方网站上查明学生的学历，也就只能查到具备学籍的最高学历，既如果高中放弃学籍，那么可查到的最高学历就是初中学历。但是不影响孩子转读国际高中，体制内外对学历的认证是两条轨道。
国际学校学籍问题最全解析
读了国际高中，放弃国内学籍，还想高考有机会吗？
这或许是困扰很多家庭不敢轻易选择国际高中的一大原因，一旦放弃国内学籍，国际高中中途想放弃没有退路。
据择校君了解，学生读了国际学校以后，再度转回国内高中学习是可以的，不存在没有学籍不能入学的情况。
转学完成后，学籍状态不变，在转入学校办理相关手续后变为在校生状态。需要注意的是，处于"休学"状态的学生，须在原就读学校办理复学手续后再办理转学手续。所以，为就读国际课程，在国内学校办理了"出国"、"其他离校"、"退学"、"休学"的家长和学生也可以完全放心。
国际学校学籍问题最全解析
以下几种途径可以参考：
1.保守的家长可以先报到，保留高中学籍，再想办法休学。一般休学是半年最长一年。可以这个周期作为观察期。
2.如果本身没有参加中考，或者中考后放弃报到注册，那么意味着不再享有国内高中学籍。后期如果继续想高考是可以的，只能以社会考生的身份，而不是应届生的身份。
国际学校学籍问题最全解析
想要了解更多国际学校学籍问题可加择校君微信私聊！文章来源：深圳国际择校全攻略！
1、叶片泵：叶片泵泵叶轮高速旋转机械能转化液体能压能由于叶轮弯曲且扭曲叶片故称叶片泵根据叶轮结构液体作用力同叶片泵：
①离泵：靠叶轮旋转形惯性离力抽送液体泵；
②轴流泵：靠叶轮旋转产轴向推力抽送液体泵属于低扬程、流量泵型般性能范围：扬程1-12m；流量0.3-65m3/s比转数500-1600；
③混流泵：叶轮旋转既产惯性离力产轴向推力抽送液体泵；
2、容积泵：利用工作室容积周期性变化输送液体塞泵、柱塞泵、隔膜泵、齿轮泵、螺杆泵等；
3、其类型泵：射流泵、水锤泵、电磁泵等。
二、离泵类
离泵按结构形式类：
1、按主轴位类：
①卧式泵：主轴水平放置；
②斜式泵：主轴与水平面呈定角度放置；
③立式泵：主轴垂直于水平面放置
2、按叶轮吸入式类：
①单吸泵：液体侧流入叶轮单吸叶轮；
②双吸泵：液体两侧流入叶轮双吸叶轮
3、按叶轮级数类：
①单级泵：泵轴装叶轮；
②级泵：同泵轴装两或两叶轮液体依流每级叶轮
4、按泵壳体剖式类：
①段式泵：壳体按与主轴垂直平面剖；
②节段式泵：段式级泵每段泵体都；
③式泵：壳体通泵轴轴线平面按剖平面位：水平式泵：剖面水平面卧式泵；垂直式泵：剖面与水平面垂直立式泵；斜式泵：剖面与水平面呈定夹角斜式泵
5、按泵体形式类：
①蜗壳泵；
②双蜗壳泵
6、特殊结构形式泵：
①潜水电泵：泵电机制体能潜入水工作泵体般单级或级立式离泵轴流泵
②液泵：属单级或级立式离泵电机、泵座位于液面部泵体淹没液体电机通传轴带叶轮旋转主要用于食品等行业
③管道泵：直接安装水平管道或竖直管道运行泵进口口条直线且数情况进口与口口径相同适用于工业系统途加压、空调循环水输送及城市高层建筑给水
④屏蔽泵：电机泵合体采用电机泵共轴形式电机内外转间采用屏蔽套隔离泵除进口外结构完全封闭保证泵输送液体绝泄漏
⑤磁力泵：电机力通磁性联轴器传递给泵其磁性联轴器内转磁钢带叶轮磁性联轴器内、外磁钢间采用隔离套屏蔽泵密封、泄漏泵型
⑥自吸泵：首向泵灌入少量液体起自行水泵卧式离泵、旋涡泵等喷灌应用较
⑦高速泵：泵工作原理高速部流切线泵高速离泵两种结构形式变速式通电机变频直驱式高速泵增速箱高速泵电机变频直驱式转速900r/min由变速箱使泵主轴增速转速更高高转速超24000r/min
⑧直联泵：泵利用力机轴做主轴省泵悬架部
⑨深井泵：属级立式离泵用取水设备电机、泵座位于井口部泵体淹没井水电机通与输水管同传轴带叶轮旋转供水水源城市及农田灌溉用
⑩水轮泵：由水轮机水泵按定式组提水机械水带水轮机转力驱水泵叶轮旋转达提水目。
三、轴流泵类
1、按泵轴安放式类：
①立式轴流泵：主轴垂直于水平面放置；
②卧式轴流泵：主轴水平放置；
③斜式轴流泵：主轴与水平面呈定角度放置
2、按叶轮轮毂体固定式类
①固定叶片式轴流泵：叶片角度固定调用于型轴流泵；
②半调式叶片轴流泵：停机拆叶轮调节叶片角度；
③全调式轴流泵：通调节机构泵运行自行调节叶片角度；
四、混流泵类
混流泵蜗壳式混流泵导叶式混流泵两种
1、蜗壳式混流泵：外形与结构式与单级单吸离泵相似；
2、导叶式混流泵：外形与结构式与轴流泵相似
五、容积泵类
容积式泵按工作元件作往复运或转运往复泵转泵两类。通塞、柱塞工作元件作往复运容积式泵称往复泵通齿轮、螺杆、叶轮转或滑片等工作元件旋转产工作腔容积变化使液体断吸入侧转移排侧泵称转泵齿轮泵、螺杆泵、液环泵、挠性叶轮泵、旋转塞泵、径向或轴向转柱塞泵等。
