乙醇沉淀跟胶回收哪个浓度高

水提醇沉淀法（水醇法）：先以水为溶媒提取药材有效成分，再用乙醇沉淀除去杂质的方法。利用水、乙醇对有效成分和无效成分溶解度的不同使之分离精制。

(一) 工艺依据：通常含醇量 50~60%时淀粉、多糖沉淀。60%或70%以上，除鞣质、树脂外，大部分被除掉。

(二) 操作

中药，加水煎2~3次，过滤，滤液浓缩至1：1~1：2（ml：g）或相对密度1.08-1.15，

加适量乙醇，使含醇量达一定要求（50~60%，60~70%）冷藏（10~48小时），滤过。

(三) 影响因素

1.醇沉浓度的选择

一般45%醇沉可去淀粉、糊精等无效成分，50%醇沉后制颗粒、片、胶囊较多；60~70%醇沉制合剂、口服液，澄清度好。50~60%、70~80%二次醇沉多用在注射液、滴眼液等，而60~80%的沉淀经丙酮等洗涤后，可得多糖。

2.所用乙醇浓度的选择

根据经验，乙醇的浓度与药液需要达到的乙醇浓度之间差20%～25%最佳。浓度太低，乙醇用量大浪费，回收不方便，且沉淀成絮状，难以下沉，效果差；浓度太高，得到的醇提液较少，沉淀中含有大量的有效物质，且加入高浓度乙醇，易造成局部浓度过高，形成大块沉淀，将有效成分包裹，随沉淀除去。

3.药液浓度

药液浓缩后的相对密度如果太小，由于药液比较稀，形成的沉淀不易聚结，难以下沉，且浪费乙醇；如相对密度太大，药液因长时间煎煮浓缩，易使苷类、萜类、维生素等成分破坏，且造成淀粉糊化，醇沉时形成大块，包裹有效成分。

4.药液温度

药液温度高，遇冷的乙醇后，骤冷易聚结成团状沉淀，且沉淀增长很快，防碍了有效物质的提出，故效果不理想；药液温度低，相对难以导致沉淀聚结，效果最佳。一般浓缩后放冷至室温。

5.加醇方式

加醇应采用慢加快搅的方法，以使加入的乙醇迅速分散，避免局部浓度过高，形成大块沉淀。且应按一个方向搅动，以免使药液乳化，不易使沉淀下沉分层。如用来醇沉的乙醇浓度不等，应按浓度从小到大的顺序加入。

(四)操作要点

1 药液浓缩：减压低温浓缩；浓缩前后可调节pH，以保留有效成分，如生物碱在酸性下溶解；浓缩程度适宜，浓度太高，易使水溶性低的成分损失（苷元、香豆精）。

2 加醇方式：慢加快搅逐步提高醇浓度。分次醇沉或以梯度递增方式逐步提高乙醇浓度的方法进行醇沉（有利于除杂，减少杂质对有效成分包裹）。

3 醇用量的计算

乙醇用量计算公式: C2*(V+X)=C1*X

对同一品种可用回收乙醇作第二次沉淀，注意回收乙醇浓度有变化，一般在80~85%，精馏达90%以上，须计算后加入或再补加浓乙醇。

4 冷藏与处理：含醇药液慢慢降至室温时，移至冷库于5~10℃静置冷藏（不能结冰，杂质易停留在晶格中不易沉淀）。滤过时，吸取上清夜滤过，下层沉淀慢慢滤过。

6.醇沉是很实用的技术，沉淀会包裹有效成分，增加洗涤可增加有效成分的转移率。

7.与之相适应的纯水法除淀粉和粘液质等，很少用，不太合理。

溶解度降低析出沉淀，

固液分离后使水提液得以精制的方法。

一般操作过程是：

将中药水提液浓缩至

1

︰

1

～

1

︰

2

（

ml

︰

g

）

，药液放冷后，边搅拌边缓慢加入乙醇使达规定含醇量，密闭冷藏

24

～

48h

，滤过，滤液回

收乙醇，得到精制液。操作时应注意以下问题：①药液应适当浓缩，以减少乙醇用量。但应控制浓缩程度，

若过浓，有效成分易包裹于沉淀中而造成损失。②浓缩的药液冷却后方可加入乙醇，以免乙醇受热挥发损

失。③选择适宜的醇沉浓度。一般药液中含醇量达

50

％～

60

％可除去淀粉等杂质，含醇量达

75

％以上大部

分杂质均可沉淀除去。④慢加快搅。应快速搅动药液，缓缓加入乙醇，以避免局部醇浓度过高造成有效成

分被包裹损失。⑤密闭冷藏。可防止乙醇挥发，促进析出沉淀的沉降，便于滤过操作。⑥洗涤沉淀。沉淀

采用乙醇（浓度与药液中的乙醇浓度相同）洗涤可减少有效成分在沉淀中的包裹损失。

水提醇沉法（水醇法）系指在中药水提浓缩液中，加入乙醇使达不同含醇量，

某些药物成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀

，固液分离后使水提液得以精制

的方法。一般操作过程是：将中药水提液浓缩至

1

︰

1

～

1

︰

2

（

ml

︰

g

），药液放

冷后，边搅拌边缓慢加入乙醇使达规定含醇量，密闭冷藏

24

～

48h

，滤过，滤液

回收乙醇，得到精制液。操作时应注意以下问题：

①

药液应适当浓缩，以减少

乙醇用量。但应控制浓缩程度，若过浓，有效成分易包裹于沉淀中而造成损失。

②

浓缩的药液冷却后方可加入乙醇，以免乙醇受热挥发损失。

③

选择适宜的醇

沉浓度。一般药液中含醇量达

50

％～

60

％可除去淀粉等杂质，含醇量达

75

％以

上大部分杂质均可沉淀除去。

④

慢加快搅。应快速搅动药液，缓缓加入乙醇，

以避免局部醇浓度过高造成有效成分被包裹损失。

⑤

密闭冷藏。可防止乙醇挥

发，促进析出沉淀的沉降，便于滤过操作。

⑥

洗涤沉淀。沉淀采用乙醇（浓度

与药液中的乙醇浓度相同）洗涤可减少有效成分在沉淀中的包裹损失。

醇提水沉法（醇水法）系指先以适宜浓度的乙醇提取药材成分，将提取液

回收乙醇后，加适量水搅匀，静置冷藏一定时间，沉淀完全后滤除的方法。药

材用乙醇为溶剂提取，可避免淀粉、蛋白质、黏液质等成分的浸出，加水处理

后可除去醇提液中树脂、脂溶性色素等杂质。应用此方法要慎重，避免醇溶性

有效成分因水溶性差而被一起沉淀除去。

可以，但是最好使用醋酸铵，也可以不加，回收效率可能会低一点，操作步骤：

方法一：

将忆确定的回收产物溶液于加有300 µL TE缓冲液的灭菌的1.5 mL Eppendorf管中。

加入等体积酚-氯仿-异戊醇，摇晃均匀。

12000 rpm离心5 min。

小心将水相移到另一1.5 mL Eppendorf管中，加入2.5~3倍体积（780 µL即可）预冷无水乙醇，以及10%水相体积的3 M NaAC（pH 5.2）。

置液氮3 min，取出后可置于－20℃放几min。小心防止管子爆裂。

12000 rpm离心10 min。

迅速弃上清，一般在管底会有针尖大小的沉淀物，小心用无水乙醇清洗后置于恒温器上干燥（55℃）5~10 min至无乙醇气味，再加入20 µL ddH2O溶解。

取20 µL电泳定量后－20℃储存备用。

方法二：

先把乙醇-20度预冷，酶切完后加入2倍体积的无水乙醇，-20度放置10min以上，12000rpm离心10min，管底出现白色沉淀，倒掉上清，换用70%乙醇重复一次，再用水溶解白色沉淀既可，损失率蛮大，回收率只有40%，或者更低。

因为异丙醇沉淀的时候要加盐来提高RNA的沉淀效率，异丙醇会使以前几步溶液中的盐（比如trizon的水相中dao的）和沉淀时加入的醋酸铵一起沉淀下来，需要用酒精清洗两遍把这些盐溶解掉，否则可能会影响以后的反应。

前面提取的RNA经异丙醇沉淀后，总会含有一些未除去的蛋白和其它杂质分子，这些蛋白和杂质分子如果不除尽的话，就会直接影响所提取的RNA的纯度和稳定性。

为此，就需要用70%乙醇洗涤沉淀(因为在70%乙醇里RNA是不溶的，而一些蛋白和其它杂质分子却可溶)，并且最好是洗涤2次，然后高速离心后，倒去上清，即可得到较纯的RNA沉淀。用无水乙醇则达不到这个目的。

扩展资料：

RNA和DNA一样，也是由各种核苷酸通过3′，5′-磷酸二酯键连接构成的多核苷酸链，但与DNA有一系列差异。

在化学组成方面，RNA含核糖而不含脱氧核糖。含尿嘧啶而不含胸腺密啶。例外的是，每个tNA分子含有一个胸腺嘧啶，这是在RNA链合成后由尿嘧啶甲基化生的，此外，前面已提到，少数DNA含有少量核糖，但这些个别的例外并不能以此否定两类核酸组成上的差异。

RNA一级结构的概念虽与DNA相同.但其基本结构单位是核糖核苷酸而不是脱氧核糖核苷酸。此外，部分RNA5′端或3′端有特殊的核苷酸序列，而且RNA一级结构中没有DNA那样复杂的顺序组织。

参考资料来源：百度百科-核糖核酸