邻甲苯胺的合成方法

先加碳酸钠，有气体产生的是苯甲酸和邻羟基苯甲酸，将这两个加氯化铁溶液，显紫色的是邻羟基苯甲酸，另一个是苯甲酸。剩余两个加苯磺酰氯，出现沉淀后，分别加氢氧化钠溶液，能溶解的是邻甲苯胺，不溶的是N-甲基苯胺

邻甲苯胺MSDS点 107点15邻甲苯胺的物理化学性质外观与性状：无色或淡黄色油状液体。

相对密度为1，相对蒸气密度为3点69，熔点负24点4 沸点：199点7 饱和蒸气压：0点13 (44) 溶解性。

微溶于水，溶于乙醇、乙醚、稀酸。 燃烧热 (kJ/mol)：40543 临界温度 无资料 临界压力 (MPa)：邻甲苯胺的用途用作染料中间体、有机合成及合成糖精等。

用亚硝酸。亚硝酸可以用亚硝酸钠和盐酸反应得到。先将样品水溶液冷却到0-5℃，加入亚硝酸钠固体，再滴入盐酸。

N-甲基苯胺是个仲胺，发生亚硝化反应，生成油状物。

2-甲基苯胺是芳香伯胺，生成重氮盐。向重氮盐溶液中加入苯酚并加入氢氧化钠溶液碱化，会生成非常鲜艳红色的偶氮化合物。

N,N-二甲基苯胺是叔胺，和亚硝酸可逆的生成亚硝酸盐，观察不到明显变化。

环己胺是脂肪伯胺，与亚硝酸反应先生成重氮盐，但脂肪胺重氮盐极不稳定，会立即分解生成氮气。

掌握血糖的测定原理和方法；掌握血糖的正常范围及意义；熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。

二，实验原理

家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其；进行血糖测定。邻苯甲胺方法测定血糖浓度。

实验采取前后对照的方法，对家兔注射肾上腺素和胰岛素，并通过耳缘静脉采血，获取激素注射前后的血液样本，采用邻甲苯胺法处理样本，最终与标品比色得出结论。

1.调节血糖的激素有：胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长素和甲状腺素等。胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素，其他激素均使血糖升高。

2.肾上腺素升高血糖的机制主要作用于肝细胞膜受体，通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶，同时抑制糖原合成酶，导致肝糖原分解加速。胰岛素降低血糖的机制是：降低肝细胞cAMP水平，从而抑制肝磷酸化酶，激活糖原合成酶，促进肝糖原的合成；胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成，阻遏糖异生关键酶的合成；胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散，促进糖的利用。

3.血液中的葡萄糖，在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛（或称羟甲基糠醛）。后者在与邻甲苯胺缩合，生成蓝绿色的西夫式碱（Schiffbase）。其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。与同样处理的标准葡萄糖溶液比色，即可求得待测血液中葡萄糖的含量。

三，实验材料

1.材料：家兔两只,刀片，草酸钠，小烧杯。

2.试剂：①肾上腺素(1mg／lml)②胰岛素(20单位／ml)③碘酒、消毒酒精④饱和硼酸溶液⑤邻甲苯胺-硼酸⑥5％ 三氯醋酸溶液⑦饱和苯甲酸溶液⑧标准葡萄糖贮存液⑨标准葡萄糖应用液

四，实验方法

1.取健康正常家兔一只，实验前饥饿14~16h左右，称体重。

2.耳缘静脉采血。小刀刮去耳缘的毛，用酒精棉球擦拭使其充血，再用干棉球擦干。 刀片划开耳缘静脉，使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中，注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。采集完毕后干棉球压迫血管止血。

3.给家兔注射肾上腺素（0.5mg/只），半小时后同样方法采得血液。

4.缓缓放入洁净试管内，加5%三氯醋酸3.6ml，同时摇动使之充分混匀。3000rpm离心5min，制得无蛋白血滤液（上清液）。

5.取四支试管，分别加入2.5ml邻甲苯胺试剂。并向试管1加入1ml蒸馏水，试管2加入1ml标准葡萄糖应用液，试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液，试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。

6.混匀后沸水加热8min，取出并用自来水冲洗试管使之冷却。而后置于722型分光光度计630nm比色，空白管校正零点。

7.表加试剂如下表：

ml

空白管

标准管

待测管甲（药前）

待测管乙（药后）

蒸馏水

1.0

―

－

－

标准葡萄糖应用液（1mg/ml）

－

1.0

－

－

无蛋白血滤液（药前）

－

－

1.0

－

无蛋白血滤液（药后）

－

－

－

1.0

邻甲苯胺试剂

2.5

2.5

2.5

2.5

同理，对家兔进行肾上腺素注射（剂量为5单位/公斤体重）并进行上述步骤，最终得出结果。

五，实验结果

据试验，在注射胰岛素实验中，家兔重量为2.95公斤，依照比例注射15单位的胰岛素。在注射肾上腺激素的实验中，家兔重量为2.90公斤，注射1mg的肾上腺激素。

血糖测定：（葡萄糖标准液浓度为5.50mmol/L）

空白管

标准管

注 射胰岛素前

注射 胰岛素后

注射肾上腺激素前

注射肾上腺激素后

血清/ml

-

-

0.02

0.02

0.02

0.02

葡萄糖标准液/ml

-

0.02

-

-

-

-

生理盐水/ml

0.02

-

-

-

-

-

酶酚混合液/ml

1.5

1.5

1.5

1.5

1.5

1.5

曝光值

0

0.135

0.363

0.116

0.315

0.508

由此得出：

注射胰岛素前血糖浓度为14.79mmol/L。

注射胰岛素后血糖浓度为4.73 mmol/L。

注射肾上腺激素前血糖浓度为12.83 mmol/L。

注射肾上腺激素后血糖浓度为20.70 mmol/L。

得出结论：注射胰岛素可有效的降低血糖。2．注射肾上腺素能使血糖上升。

六，讨论

实验中要注意如下问题：

1.采血及注射激素时，应尽量使家兔保持安静。家兔不安静的情况下，肾上腺素分泌增多，血糖浓度升高，对实验结果有影响。

2.采血后要及时分离出血浆，避免溶血。溶血时红细胞内糖类扩散到血浆中，会对实验结果有影响。

3.采血量要准确，不能采得太少不够实验需要的血量，也不能采得太多伤及家兔。

4.由于血细胞不断从血浆摄取葡萄糖加以利用，因此, 采血后及时进行检测，否则血糖浓度将逐渐降低。

水质 化学需氧量（COD）的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水样中化学需氧量（COD）的测定，测定范围为0～1500mg/L。

2 仪器及用具

2.1 分光光度计：HACH DR2000；

2.2 COD消化器。

3 试剂

3.1 COD消化液。

4 分析步骤

4.1 样品制备

吸取2mL混匀水样于COD消化液试剂瓶中，混合均匀。然后将试剂瓶置于COD消化器中，150℃恒温加热2小时。取出冷却至室温比色。同时用蒸馏水代替试样进行空白试验。

4.2 比色

4.2.1 按POWER 键打开仪器，仪器预热结束后输入数字键435，按READ/ENTER 键确认；

4.2.2 转动波长旋钮将波长调至620nm，按READ/ENTER 键确认；

4.2.3 将空白试样瓶放入检测槽中，按ZERO 键，调零；

4.2.4 将试样瓶放入检测槽中，按READ/ENTER 键，读取读数。结果以mg/L计。

备注：对于COD较大的水样（如精炼厂、榨油厂污水和中和水）需将水样稀释后再进行检测。

水检测方法

水质 PH值的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水样中PH值的测定。

2 原理

PH值由测量电池的电动势而得。在25℃时，溶液每变化1个PH单位，电位差改变59.16mV，据此在酸度计上直接以PH的读数表示。

3 仪器及用具

3.1 PH计；

3.2 电极。

4 试剂

4.1 标准PH缓冲溶液:PH 4.003、PH 6.864、PH 9.182；

4.2 蒸馏水。

5 分析步骤

5.1 按仪器使用说明书启动仪器，并预热半小时；

5.2 用标准PH缓冲溶液校准电极；

5.3 用蒸馏水水冲洗电极，然后将电极放入样品中，按动测量钮，待数据稳定后读取PH值。

水检测方法

水质 电导率的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水样中电导率的测定，测定范围0～10000us/cm。

2 原理

电导度（S）是用来表示水中离解成分的导电性能，它是水溶液电阻的倒数。它与水中总离解成份的总浓度、离子价数、各种离子的相对浓度、迁移度、温度等条件有关。

电导率（K）为距离1cm，截面积1cm2的二电极之间介质的电阻倒数。

3 仪器及用具

3.1 便携式电导仪：EP-10型。

4 分析步骤

用蒸馏水冲洗电导仪检测杯三次，将冷却至室温的样品倒入检测杯内，调节旋钮选择设定参数比例，按住检测按钮，读出数据。

水检测方法

水质 含油量的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水样中含油量的测定。

2 仪器及用具

2.1 恒温水浴锅；

2.2 空气烘箱；

2.3 电子天平；

2.4 分液漏斗：500mL；

2.5 平底烧瓶: 带标准磨口的250mL平底烧瓶；

2.6 冷凝回收装置：与平底烧瓶磨口配套。

3 试剂

3.1 石油醚: 分析纯。

3.2 氯化钠: 分析纯。

3.3 无水硫酸钠：分析纯。

4 分析步骤

4.1 量取混匀水样100mL于三角烧瓶中，加入2g氯化钠，轻轻摇晃使氯化钠溶解；

4.2 加入25ml石油醚充分振摇，将混合液倒入分液漏斗中，静置分层收集上层液；

4.3 用25mL石油醚分别洗涤混合液两到三次；

4.4 收集所有上层液于碘量瓶中，加入无水硫酸钠脱水，加盖静置半小时，过滤到烘至恒重的平底烧瓶中；

4.5 将平底烧瓶置于水浴锅中，连接上冷凝回收装置，回收溶剂；

4.6 再将平底烧瓶置于105℃烘箱中烘干1小时，取出冷却称重；

4.7 再复烘半小时，直到前后重量差值小于0.002g为止。

5 计算

W2-W1

含油量（mg/L） = --------------- ×1000000

V

式中：W2 ---- 平底烧瓶与油的重量，g；

W1 ---- 平底烧瓶的重量，g；

V ------ 水样体积，mL。

水检测方法

水质 碱度的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水样中碱度的测定。

2 原理

用酚酞做指示剂，用标准酸溶液滴定水样，达到终点，所测得的碱度称为酚酞碱度，此时水样中所含全部氢氧根和二分之一碳酸根与酸化合。在滴定酚酞碱度的水样中加入甲基橙指示剂，继续用标准酸溶液滴定达到终点时（包括酚酞碱度的用量），所测得的碱度称为甲基橙碱度，也称总碱度，此时水样中所含碳酸氢根全部被中和。

3 仪器及用具

3.1 三角烧瓶：250mL；

3.2 滴定管：50mL。

4 试剂

4.1 盐酸标准溶液: 0.1mol/L。

4.2 酚酞指示剂: 10g/L的95%乙醇溶液。

4.3 甲基橙指示剂：1g/L的水溶液。

5 分析步骤

5.1 酚酞碱度的测定（P-碱）

量取100mL水样于三角烧瓶中，加三滴酚酞指示剂，若不显色，说明酚酞碱度为零，若显红色，用盐酸标准溶液滴定至红色刚好褪去为终点，记录盐酸标准溶液用量（V1）。

5.2 总碱度的测定（T-碱）

在测定酚酞碱度后的水样中，再加入1滴甲基橙指示剂，继续用盐酸标准溶液滴定至刚好出现橙红色为终点。记录下盐酸标准溶液的用量（包括酚酞碱度用量）V2。

6 计算

c×V2

酚酞碱度（meq/L） = ---------------

100

c×V3

总碱度（meq/L） = ---------------

100

式中：c ---- 盐酸标准溶液浓度，mol/L；

V2 --- 用酚酞指示剂时，滴定消耗盐酸标准溶液体积，mL；

V3 ----- 用甲基橙指示剂后，滴定消耗盐酸标准溶液体积，mL。

注：设水中的碱度全部由氢氧化物、碳酸盐、重碳酸盐形成，并认为不存在其它弱无机酸和有机酸，并假定氢氧化物与重碳酸根不共存的条件下，水中氢氧化物、碳酸根、碳酸氢根的关系如下表 滴定结果 氢氧化物碱度以（CaCO3）计 碳酸盐碱度以（CaCO3）计 碳酸氢根碱度以（CaCO3）计 P=0 0 0 T 2P<T 0 2P T－2P 2P=T 0 2P 0 2P>T 2P－T 2（T－P） 0 P=T T 0 0 毫克当量/升（meq/L）值100.08×÷2即为以碳酸钙计的毫克/升（mg/L）值。

水检测方法

水质 氯离子的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水样中氯离子的测定，其范围小于100mg/L。

2 原理

在中性介质中。硝酸银与氯化物反应生成氯化银白色沉淀，当水样中氯离子全部与硝酸银反应后，过量的硝酸银与铬酸钾指示剂反应生成砖红色铬酸银沉淀。

3 仪器及用具

3.1 三角烧瓶：250mL；

3.2 滴定管：50mL；

4 试剂

4.1 硝酸银标准溶液: 0.1mol/L。

4.2 铬酸钾指示剂: 100g/L的水溶液。

5 分析步骤

量取100mL水样于三角烧瓶中，加三滴铬酸钾指示剂，用硝酸银标准溶液滴定至砖红色为止，同时以蒸馏水做空白试验。

6 计算

c×（V1－V0）×35.45

氯离子含量（mg/L） = ------------------------- × 1000

100

式中：c ---- 硝酸银标准溶液浓度，mol/L；

V1 --- 试样滴定消耗硝酸银标准溶液体积，mL；

V0 ----- 空白滴定消耗硝酸银标准溶液体积，mL；

35.45----- 氯离子的摩尔质量，克/摩尔。

注：0.1mol/L硝酸银标准溶液的标定

称取于500～600℃灼烧至恒重的基准试剂氯化钠0.15～0.17g于三角烧瓶中，加入60mL蒸馏水，铬酸钾指示剂2滴，用0.1mol/L硝酸银标准溶液滴定由黄色变为黄红色不消失即为终点。

m×1000

C（AgNO3）= ------------------------

V×58.442

式中：m ---- 氯化钠的重量，g；

V --- 硝酸银溶液的体积，mL；

58.442 ----- 氯化钠的摩尔质量，g/mol。

水检测方法

水质 溶解氧的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水中溶解氧的测定。

2 仪器及用具

2.1 便携式溶解氧测定仪：JPB-607型；

2.2 溶解氧电极：DO-952型。

3 试剂

3.1 5%亚硫酸钠溶液: 称取5克亚硫酸钠溶于100毫升蒸馏水中。

4 分析步骤

4.1将仪器的测量/调零电源开关拨至“测量”档，溶氧/温度测量选择开关拨至溶氧档，盐度调节旋钮向左旋至底（0g·L-1）；

4.2仪器预热5分钟，然后将电极放入5%新鲜配制的亚硫酸钠溶液中5分钟，等读数稳定后，调节调零旋钮，使仪器显示为零。由于电极的残余电流极小，如果没有亚硫酸钠溶液，只要将电极放在空气中，然后将测量/调零电源开关置于调零，调节调零档，调节调零旋钮，使仪器显示为零；

4.3 将电极从溶液中取出，用蒸馏水水冲洗干净，用滤纸小心吸干薄膜表面水分，放入空气中等读数稳定后，调节校准旋钮，使读数指示值为纯水在此温度下饱和溶解氧值。各种温度下饱和溶解氧值见附表；

4.4 校准之后，将电极浸入被测液中，此时仪器的读数即为被测水样的溶解氧值。

备注：1.下表中的栏2是氧溶解氧度（Cs）。以每升水含若干毫克氧表示：在101.3kPa压力下。纯水中含有带饱和水蒸汽的空气时，含氧量为20.94%(v/v)。

2.氧在水中的溶解度随含盐度的增加而降，其关系是线性关系，实际上水的含盐量可高达35g/L，含盐量以每升水中含多少克盐表示之。下表中所列的△C3，是进行校准时每升每克盐浓度要减去的数值。因此，氧在含有mg/L盐水中溶液解度，要用对应的纯水的氧溶解度减去n△C3的数值可求得。

氧在不同温度和氯化物浓度的水中饱和含量表（气压101.3kPa） 温度(℃) C3（mg/L） △C3（mg/L） 温度(℃) C3（mg/L） △C3（mg/L） 0 14.64 0.0925 20 9.08 0.0481 1 14.22 0.0890 21 8.90 0.0467 2 13.82 0.0857 22 8.73 0.0453 3 13.44 0.0827 23 8.57 0.0440 4 13.09 0.0798 24 8.41 0.0427 5 12.74 0.0771 25 8.25 0.0415 6 12.42 0.0745 26 8.11 0.0404 7 12.11 0.0720 27 7.96 0.0393 8 11.81 0.0697 28 7.82 0.0382 9 11.53 0.0675 29 7.69 0.0372 10 11.26 0.0653 30 7.56 0.0302 11 11.01 0.0633 31 7.43 12 10.77 0.0614 32 7.30 13 10.53 0.0595 33 7.18 14 10.30 0.0577 34 7.07 15 10.08 0.0559 35 6.95 16 9.86 0.0543 36 6.84 17 9.66 0.0527 37 6.73 18 9.46 0.0511 38 6.63 19 9.27 0.0496 39 6.53 水检测方法

水质铁离子的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水中铁离子的测定。

2 仪器及用具

2.1 分光光度计：HACH DR2000；

2.2 专用样品瓶：25mL。

3 试剂

3.1 乙酸铵缓冲溶液：250g乙酸铵溶于150mL蒸馏水中，再加入700mL冰乙酸。

3.2 邻菲咯啉溶液：1g邻菲咯啉溶于蒸馏水中，加20滴浓盐酸，用蒸馏水定容至1000mL。

3.3 溶液A：乙酸铵缓冲溶液：邻菲咯啉溶液=1：2的体积比混合。

4 分析步骤

4.1 样品制备

量取50mL混匀水样于100mL容量瓶中，加入30mL溶液A，用蒸馏水定容至100mL混合均匀。同时用蒸馏水代替水样进行空白试验。5～10分钟内比色。

4.2 比色

4.2.1 按POWER 键打开仪器，仪器预热结束后输入数字键255，按READ/ENTER 键确认；

4.2.2 转动波长旋钮将波长调至510nm，按READ/ENTER 键确认；

4.2.3 倒25mL空白试样于样品瓶中，放入检测槽中，按ZERO键，调零；

4.2.4 将混合均匀的试样倒入样品瓶中，放入检测槽中，按READ/ENTER 键，读取读数。读数×2为试样Fe2+含量，结果以mg/L计。

水检测方法

水质 悬浮物的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水中悬浮物的测定。

2 仪器及用具

2.1 分光光度计：HACH DR2000；

2.2 专用样品瓶：25mL。

3 分析步骤

3.1 按POWER 键打开仪器，仪器预热结束后输入数字键630，按READ/ENTER 键确认；

3.2 转动旋钮将波长调至810nm，按READ/ENTER 键确认；

3.3 倒25mL蒸馏水于样品瓶中，放入检测槽中，按ZERO键调零；

3.4 将混合均匀的试样倒入样品瓶中，放入检测槽中，按READ/ENTER 键，读取读数，结果以mg/L计。

水检测方法

水质余氯的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于自来水中余氯的测定。

2 原理

水样中的余氯与邻联甲苯胺反应显黄色，与标准玻片进行比色测定。

3 仪器及用具

3.1 立式比色器：SLS-3型；

3.2 比色管：50mL。

4 试剂

4.1 邻联甲苯胺溶液：将150mL浓盐酸用蒸馏水稀释至500mL，精确称取1.35g邻联甲苯胺盐酸盐溶于500mL蒸馏水中，在不停搅拌下，将此溶液溶于500mL稀盐酸中，贮于棕色瓶内，放置暗处。

5 分析步骤

在50毫升比色管中加入被测水样至刻度，然后加入邻联甲苯胺溶液2.5毫升混合均匀。静置10分钟进行比色，如水温低于15～20℃时，则将水样浸入温水中加热至15～20℃以上再进行比色。空白水样取样后不加试剂。

水检测方法

水质 浊度的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水样浊度的测定。

2 仪器及用具

2.1 分光光度计：HACH DR2000；

2.2 专用样品瓶：25mL。

3 分析步骤

3.1 按POWER 键打开仪器，仪器预热结束后输入数字键750，按READ/ENTER 键确认；

3.2 转动旋钮将波长调至450nm，按READ/ENTER 键确认；

3.3 倒25mL蒸馏水于样品瓶中，放入检测槽中，按ZERO键调零；

3.4 将混合均匀的试样倒入样品瓶中，放入检测槽中，按READ/ENTER 键，读取读数，结果以FTU计。

水检测方法

水质总磷的测定

钼酸铵分光光度法

1 主题内容与适用范围

本标准规定了用过硫酸钾为氧化剂，将未经过滤的水样消解，用钼酸铵分光光度测定总磷的方法。

总磷包括溶解的、颗粒的、有机的和无机磷。

本标准适用于地面水、污水和工业废水。

2 原理

在中性条件下用过硫酸钾使试样消解，将所含磷全部转化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。

3 仪器及用具

3.1 具塞(磨口)比色管：50mL

3.2 加热板

3.3 刻度吸管： 5mL，2mL，1mL

3.4 紫外分光光度计

3.5 烧杯：1000mL

4 试剂

本标准所列试剂除磷酸二氢钾为工作基准试剂外，其余均为分析纯，水为蒸馏水。

4.1 过硫酸钾溶液: 50g/L。 将25g过硫酸钾溶于水并稀释至500mL。

4.2 钼酸铵溶液: 26g/L。称取13g钼酸铵，精确至0.1g。称取0.35g酒石酸锑钾，精确至0.01g。溶于在200mL水中，加入300mL硫酸溶液，混匀，冷却后用水稀释至500mL，混匀，存于棕色试剂瓶中（冷藏可保存两个月）。

4.3 抗坏血酸溶液：100g/L。称取50g抗坏血酸，精确至0.1g。溶于蒸馏水中，用水稀释至500mL，贮于棕色试剂瓶中（冷藏可稳定几周，如不变色可长时间使用）。

4.4 磷标准贮备溶液：1mg/mL。溶解磷酸二氢钾（使用前在105℃下干燥2h）1.0967g于蒸馏水中，移入250mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。

4.5 磷标准工作溶液：10ug/mL。吸取5mL磷标准储备溶液于500mL容量瓶中，以蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

5 分析步骤

5.1 空白试样

按（5.2）的规定进行空白试验，用水代替试样，并加入与测定时同体积的试剂。

5.2 测定

5.2.1 消解

吸取5mL混匀水样于50mL具塞比色管中，加入 5mL过硫酸钾溶液（4.1），用蒸馏水稀释至25mL，将比色管置于沸水浴中加热30分钟，取出冷却至室温。

5.2.2 发色

分别向各份消解液中加入1mL抗坏血酸溶液（4.3），2mL钼酸铵溶液（4.2），用蒸馏水稀释至50mL，充分混合均匀。

5.2.3 分光光度测量

室温下放置30分钟后，使用光程为10mm比色皿，在700nm波长下，以蒸馏水为参比液，空白试液调节零点，测定吸光度后，从工作曲线（5.2.4）上查得磷的含量。

5.2.4 工作曲线的绘制

取6支具塞比色管分别加入0.0；0.50；1.0；2.0；3.0；4.0mL磷标准溶液（4.5）。然后按步骤(5.2)进行处理，以蒸馏水为参比液，空白试液调节零点，测定吸光度后，和对应的磷的含量绘制工作曲线。

6 计算

总磷含量以C（mg/L）表示，按下式计算：

m×X

C = --------

V

式中：m ---- 试样测得含磷量，ug；

X --- 样品稀释倍数；

V ---- 测定用试样体积，mL。

注：1、对于总磷较大的水样（如精炼厂、榨油厂污水和中和水）需将水样稀释50倍后再进行检测；排放水采样量为10mL。

2、若消解后的试样有悬浮物需过滤后再发色。

水检测方法

水质总硬度的测定

1 主题内容与适用范围

本方法适用于水样中总硬度的测定。

2 原理

在PH=10时，乙二胺四乙酸二钠（EDTA）和水中的钙镁离子生成稳定络合物，指示剂铬黑T也能与钙镁离子生成葡萄酒红色络合物，其稳定性不如EDTA与钙镁离子所生成的络合物，当用EDTA滴定接近终点时，EDTA自铬黑T的葡萄酒红色络合物夺取钙镁离子而使铬黑T指示剂游离，溶液由酒红色变为蓝色，即为终点。

3 仪器及用具

3.1 三角烧瓶：250mL；

3.2 滴定管：50mL；

3.3 刻度吸管：1mL。

4 试剂

4.1 乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准溶液: 0.05mol/L。

4.2 硬度缓冲溶液: （1）称取16.9g氯化铵，溶于143mL浓氨水中。（2）称取0.78g硫酸镁(或0.644g氯化镁或0.381无水硫酸镁)及1.179g乙二胺四乙酸二钠溶于50mL蒸馏水中。合并（1）&（2）并用蒸馏水定容至250mL。（可保存一个月）

4.3 铬黑T指示剂：5g/L。称取0.5g铬黑T和2g氯化羟胺(盐酸羟胺)，溶于95%乙醇并定容至100mL。

5 分析步骤

5.1 取澄清水样100mL于三角烧瓶中，加入1mL硬度缓冲溶液，3滴铬黑T指示剂；

5.2 用乙二胺四乙酸二钠标准溶液激烈振荡滴定至溶液由玫瑰红变为天蓝色为止。

5.3 同时用100mL去离子水或蒸馏水做空白试验。

6 计算

c×（V-V0）

总硬度（meq/L） = --------------- ×1000

100

式中：c ---- 乙二胺四乙酸二钠标准溶液浓度，mol/L；

V0 --- 空白试验滴定消耗乙二胺四乙酸二钠标准溶液体积，mL；

V ----- 试样滴定消耗乙二胺四乙酸二钠标准溶液体积，mL；