液质流动相为什么选甲醇和水体系
液质流动相选甲醇和水体系是因为对于液相色谱而言,物质的分离是基于被测物在流动相和固定相间的分配比不同而获得的,不管是不是中性物质,只要它们在两相间的分配比不同就可以分离。而流动相的改变也不过是为了获取这个分配比的差异而已。
液质流动相的选择方法:
1、流动性主要看结构,极性大小,溶解性,对酸碱的敏感性等等。
大体上有机相是乙腈,甲醇,水相是甲酸水,乙酸水,甲醇水或者加点乙酸铵等。
2、再看化合物质谱条件是(+),则水相可加甲酸,乙酸,一般0.1%,也可以0.2%,可以是条件,原则是能浓度低就不要浓度高,(-),不要用酸,会有抑制。
3、液相分离效果,可以用不同的有机相:水相比例,是分离效果好就可以。
4、观察uv最佳吸收是多少?若离200nm很近,建议有机相用乙腈。
5、重要的是,水相不加任何物质就可楚风很好,建议不要加其他的。
6、液质联用所用的流动相,不能用不挥发性的物质,如:磷酸盐缓冲液等,常用甲酸盐,乙酸盐等易挥发的物质用作缓冲盐的首选。
在做液质联用测定生物样品时,若选择M
H峰可在流动相中加入一些添加剂提供H离子,如甲酸等,一般准分子离子峰较稳定。
7、液质联用的流动相要求使用挥发性的酸碱盐,常用的如下:
酸---甲酸、乙酸(<2.0%),三氟醋酸(≤0.5%)
碱---甲胺、乙胺、三乙胺(<1.0%)
盐---醋酸铵(10-5mmol/L)。
在用高效液相色谱进行药物分析方法开发的过程中,色谱柱及流动相的种类,添加剂的引入,流动相的pH值调节,温度的控制等等都会对分离选择性产生影响。
而其中,色谱柱及流动相的选择往往起着决定性的作用,对于流动相pH的控制,不仅会对色谱柱的稳定性产品影响,并且会对分离的选择性和色谱峰的对称性产生至关重要的作用,尤其是针对某些可以离子化的极性酸碱化合物来说。
一般来说pH对于中性化合物几乎没有什么影响。这是因为一般情况下中性化合物不具备解离能力,因而不会对谱图的分离选择性及峰形的对称性产生影响。
对于含有极性官能团的化合物来说,pH会影响化合物的存在状态。进而影响分离选择性及色谱峰的对称性。除此之外,一些做了改性或者Mixed-Mode类型的色谱柱,即便分析物中不含有可电离的物质,但是pH值会影响色谱柱上的官能团状态,进而也会影响到中性化合物的分析
纯净水76ml+乙腈24ml加入0.05ml乙酸意思
没按照总100%比例配制能于流相pH值要求比较高缘故没办通程序设置通道跑比例能通手配制流相
没有意义
建议自己下去查查资料
是没问题的,也有加在甲醇和乙腈,那就过有机膜. 买点尼龙膜,有机的,无机的都能过
(2)甲醇:0.1%乙酸水=30:70