原生质体培养的原生质体鉴定与活力测定
即检验所获得的原生质体是否是真正的原生质体
（1）低渗胀破法：把原生质体放入低渗透溶液中，在显微镜下观察原生质体从低渗溶液中吸水胀破的过程。如果是真正的原生质体，因为没有细胞壁，这样在胀破后留下的残迹应该是无形的。如果原生质体还带有部分细胞壁，则原生质体从无壁部分吸水向外膨胀直至胀破，破碎后留下的残迹仍保持半圆形的细胞壁。
（2）荧光染色法：将原生质体放入离心管中，加入0.7mol/L甘露醇配置的 0.05%～0.1%荧光增白剂溶液，染色5～10min，离心、洗涤除去多余的染料，在荧光显微镜下观察。绿色光显示纤维素的存在，发出红色光的是没有纤维素的真正的原生质体 检验原生质体是活细胞还是死细胞
染色法 ：
①二乙酸荧光素（FDA）法：FDA本来没有荧光，当其进入细胞后被脂酶分解为具有荧光的极性物，不能透过质膜，而是留在细胞内发出荧光。因此能发出荧光的是具有活性的原生质体。
②酚藏花红染料法：具有活力的原生质体吸收染料显红色；无活力的不能吸收染料而显示白色。
③伊文思蓝染色法：有活力的细胞不能吸收染料为无色；而没活力的细胞则能吸收染料显蓝色。
其他法：①胞质环流法②渗透压变化③氧电极法④形态观察法
二乙酸荧光素染料毒性不大。根据查询相关公开信息显示荧光染料与细胞的结合很稳定，它对细胞几乎没有毒性作用，并且不影响被标记细胞的细胞活力，CFDA-SE是细胞实验中用于细胞标记的合适标记物，标记后，能在细胞中维持24小时，适合对标记细胞较长时间的观测。
二醋酸荧光素(FDA)可以进入细胞，但本身不荧光素。FDA在细胞非特异性脂肪酶的催化下产生荧光素，在波长为530nm、波长为480nm的激光激发下产生荧光素。死亡细胞的细胞膜不完整，产生的荧光素迅速向细胞外扩散，无法检测到具有绿色荧光的细胞。
碘化丙酯(PI)不能进入细胞膜完整的活细胞。当酵母细胞死亡或细胞膜不完整时，PI进入细胞，与DNA结合，在488nm激光的激发下检测波长约660nm的红色荧光。
因此，采用FDA/PI双染色法，利用死细胞染色后会激发不同波长的荧光的特点，可以区分死细胞和活细胞，即活细胞可以检测到FDA产生的荧光信号，而没有P产生的荧光信号的死亡细胞则相反。
B、无活力的细胞因不能使FDA分解，而无法产生荧光，B错误；
C、死细胞不能产生绿色荧光；细胞壁本身是全透性的，是否受损与题意无关，C错误；
D、FDA能自由出入完整的细胞膜，荧光素不能自由透过活的细胞膜，说明细胞膜的功能特点，即具有选择透过性，D错误．
故选：A．
