怎样测定 乙醇脱氢酶(ADH)活性？
活性中心由一个锌原子，His-67， Cys-174，Cys-46，Ser-48，His-51，Ile-269，Val-292，Ala-317和Phe-319构成。锌负责结合底物酒精。Cys-146，Cys-174和His-67结合锌，Phe-319，Ala-317，His-51，Ile-269和Val-292通过氢键与NAD+稳定结合。His-51和Ile-269与烟酰胺与核糖醇形成氢键结合。Phe-319，Ala-317和Val-292与NAD+上的氨基形成氢键。关于结构锌的位点，哺乳动物的乙醇脱氢酶也有结构锌位点。在这里锌离子对蛋白质结构稳定起到至关重要的作用。用量子化学计算和分子动力学的经典方法研究的马肝醇脱氢酶（HLADH）催化和结构锌已经提示了我们它的空间结构，结构锌是由四个关系紧密的半胱氨酸配体（Cys97，Cys100，Cys103和Cys111）定位于锌离子周围近似对称的四面体上。最近的一项研究表明，锌和半胱氨酸之间的相互作用主要是通过一价的共价键结合。
乙醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒
产品英文名称：Human alcohol dehydrogenase,ADH ELISA试剂盒
上海研生生化试剂有限公司
检测标本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。提供免费代测服务。详情咨询：021-60514031
乙醇脱氢酶（Alcohol dehydrogenase，简称ADH）的系统名为：乙醇：辅酶I氧化还原酶（alcohol：NAD+ oxidoreductase），大量存在于人和动物肝脏、植物及微生物细胞之中，是一种含锌金属酶，具有广泛的底物特异性。乙醇脱氢酶够以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)为辅酶,催化伯醇和醛之间的可逆反应：CH3CH2OH+ NAD+→ CH3CHO +NADH+ H+。在人和哺乳动物体内,乙醇脱氢酶与乙醛脱氢酶(ALDH)构成了乙醇脱氢酶系,参与体内乙醇代谢，是人和动物体内重要的代谢酶。作为生物体内主要短链醇代谢的关键酶，它在很多生理过程中起着重要作用。它是一种广泛专一性的含锌金属酶。乙醇脱氢酶乙醇氧化体系是在肝脏中代谢酒精的一条主要途径。乙醇脱氢酶氧化体系包括醇脱氢酶(ADH)和醛脱氢酶(ALDH)。
乙醇脱氢酶的应用：
疾病诊断：人体内ADH主要在肝脏生成，所以肝脏疾患可能与血清ADH活性相关。用分光光度法测定血清中ADH的活性并结合临床探讨该项指标在肝脏疾病的诊断上有重要意义。通过实验测定血清ADH活性，从而反应出肝脏功能正常与否。通过对肝脏病人血清中ADH的测定表明，结果均显著高于健康人参考值。
测定酒精浓度：日常交际生活中，人们不可避免地要接触酒精。酒后驾车造成的交通事故已是屡见不鲜。另外，饮酒过量可引起酒精中毒。鉴于酒后事故及酒精中毒的严重后果，所以迅速测定血浆中乙醇浓度，对预防事故的发生及早期诊断和处理急性酒精中毒具有非常重要的临床价值。报道了一种新的酶终点法测定血浆中乙醇浓度的方法，无需去除蛋白，整个检测过程仅需90 s，可用于自动生化分析仪及手工操作，适于临床常规运用。实验中他们选用三（羟甲基）氨基甲烷—盐酸（Tris-HCL）作为缓冲体系，在碱性条件下，乙醇脱氢酶（ADH）催化乙醇转化成乙醛，同时生成还原型辅酶（NADH）。在340 nm波长处检测吸光度的变化，对照标准计算乙醇的浓度。
工业催化剂：在化学工业中,利用ADH的催化特性生产许多原材料及中间反应物。在二氧化碳转化合成甲醇的过程中，ADH就发挥了酶的催化作用。为实现CO2向甲醇的转化，研究者曾尝试了多种方法，其中酶催化法以其高效、专一及反应条件温和等优点,近年来备受关注，在CO2的固定和还原反应中已有应用。许松伟等采用甲酸脱氢酶、甲醛脱氢酶和ADH为催化剂，以NADH作为电子供体，通过三步串连反应将CO2转化为甲醇,探索出了CO2利用的新途径。
临床意义
酒精中毒：
曾有研究显示，乙醇脱氢酶可能导致患者对乙醇代谢依赖性的酗酒。研究人员初步检测到一个可能与酗酒有关的几个基因。如果这些基因变体编码的ADH2和ADH3进入慢代谢形式，可能会增加酗酒的风险。该研究发现，突变的ADH2和ADH3与亚洲人群酗酒有关。然而，事实是否真是如此，还需要继续深入研究。
药物依赖：
药物依赖是关于乙醇脱氢酶的另一个问题，研究人员认为这可能与酗酒有关。一个特别的研究表明，药物依赖与7个乙醇脱氢酶的相关基因有关。这些结果可能有助于有针对性的治疗这些特定的基因。然而，这还有待于更多的深入的研究。
质，它在人体内含量的高低多少因人而异,现在可证明的是它与人的
遗传基因有关糸,具体的产生机理尚不清楚.它的作用是分解乙醇，目
前尚没有药物可以取代脱氢酶的作用。
酒精在人体内的分解代谢主要靠两种酶：一种是乙醇脱氢酶，另一种
是乙醛脱氢酶。乙醇脱氢酶能把酒精分子中的两个氢原子脱掉，使乙
醇分解变成乙醛。而乙醛脱氢酶则能把乙醛中的两个氢原子脱掉，分
解为二氧化碳和水。人体内若是具备这两种酶，就能较快地分解酒
精，中枢神经就较少受到酒精的作用，因而即使喝了一定量的酒后，
也行若无事。在人体中，都存在乙醇脱氢酶，而且大部分人数量基本
是相等的。但缺少乙醛脱氢酶的人就比较多。这种乙醛脱氢酶的缺
少，使酒精不能被完全分解为水和二氧化碳，而是以乙醛继续留在体
内。由于很多人缺少乙醛脱氢酶，拥有乙醛脱氢酶的量也是有差别的
，所以严格的说酒精的代谢速度是没法用一个准确的速度来描述的,
只能因人而异。
