pmsf保存条件
PMSF 英文全称：Phenylmethanesulfonyl fluoride 中文名称：苯甲基磺酰氟 分子式：C7H7FO2S 分子量：174.19 CAS号：[329-98-6] PubChem号：4784 结构示意图：分类： Organic Chemicals Sulfur Compounds Sulfones Phenylmethylsulfonyl Fluoride使用介绍： 1） 抑制丝氨酸蛋白酶（如胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，凝血酶）和巯基蛋白酶（如木瓜蛋白酶）； 2） 10mg/ml溶于异丙醇（或无水乙醇）中； 3） 在室温可保存一年,一般保存在-20度或4度.； 4） 工作浓度：17~174ug/ml（0.1~1mM），储存液浓度为100或200mM； 5） 在水液体溶液中不稳定，30分钟就会降解一半，必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF，样品处理超过1h,补加一次。（见水分解，使用前加入） 【注意事项】 1. PMSF
剧毒，严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸
收后有致命危险。为了安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。 2. PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。 3. PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节 为碱性（pH>8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。 PMSF的储存：2-8℃可以存放数月之久。欲长期保存，可冻存在-20℃
英文名称：Proteinase
K
solutionCAS号：39450-01-6级别：PCR
Grade分子量：～18kDa活力：≥600U/ml，35℃
浓度：20mg/mlDNase,RNase：None
detected性状：液体，是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶，
来源于白色念球菌(.
Tritirachium
album.
)，具有很高的比活性。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活，反而增强和稳定酶活性，并在较广的PH范围内（PH4-12.5）均有活性。在组织或细胞核酸分离时，使核酸酶（RNA和DNA）以及反应中其他酶失活。用途：生化研究。广谱蛋白酶，95C
加热10
分钟，则完全失活。可替代
DEPC
处理
RNA
抽提用的离心管和枪头，实现灭活
RNase
A
的目的，也用于处理
RNase-Free的水。充分降解组织或细胞中蛋白质分子特别是核酸，以达到释放和萃取高质量核酸的辅助试剂。用于质粒或基因组DNA、RNA的分离以及蛋白多肽印迹实验。保存：2～8℃
1、 应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；酶（二级学科）
胰凝乳蛋白酶chymotrypsin 又叫糜蛋白酶，是一种典型的丝氨酸蛋白酶 ，脊椎动物的消化酶。 EC 3.421.1。在胰脏中以酶前体物质胰凝乳蛋白酶原的形态生物合成，随胰液分泌出去。在小肠受到胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的一定的分解，转变成活性的胰凝乳蛋白酶。属于肽链内切酶（从肽链中间特殊的肽链位点将多肽裂解成小片断； 作用位点 ——中间特殊的肽链位点），主要切断多肽链中的芳香族氨基酸残基的羧基一侧。对其氨基酸序列、高级结构，反应机制的研究还在进展中。牛的α-胰凝乳蛋白酶的氨基酸残基数245个，分子量约2.5万，第57位组氨酸、102位天冬氨酸、195位丝氨酸等三个残基在催化作用中起着中心作用。195位丝氨酸受二异丙基氟磷酸（DFP）的作用受特异的修饰而丧失活性，即所谓丝氨酸蛋白酶。与同样在胰脏里生物合成的胰蛋白酶虽然在结构和催化机制方面关系非常密切，但底物特异性完全不同。
2、激活
胰凝乳蛋白酶是在胰脏中被合成。开始合成的是胰凝乳蛋白酶原（胰凝乳蛋白酶的前体），不具有酶活性。在随胰液进入小肠后，被胰蛋白酶剪切为两部分（两部分之间依然通过二硫键相连），随后被剪切的胰凝乳蛋白酶原可以互相剪切去一段短的肽段，形成由二硫键相连的三条多肽链的具有完整活性的胰凝乳蛋白酶。
这种激活机制保证了胰凝乳蛋白酶只在体内特定地点获得催化活性，避免对机体造成损伤。
3、催化机制和动力学
胰凝乳蛋白酶是在哺乳动物及其他动物体内的消化系统中发挥作用。它是通过催化一个水解反应（在没有酶催化的情况下，反应速度非常慢）来剪切肽键。胰凝乳蛋白酶的偏好受质包括酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸以及亮氨酸和甲硫氨酸。与其他蛋白酶相似，胰凝乳蛋白酶也可以在体外水解酯键；因此可以用一些受质类似物，如N-乙酰-L-酪氨酸对硝基苯酯，来作为酶反应试剂。
胰凝乳蛋白酶上195位丝氨酸残基的羟基氧是一个强的亲核物，可以进攻肽键上的羰基碳，使酶与底物共价连接形成短暂的酶－底物中间体，随后不稳定的肽键发生断裂。这一催化机制的发现是基于对酶与底物类似物（N-乙酰-L-酪氨酸对硝基苯酯）反应动力学的研究；由于反应产物对硝基苯酚显黄色，就可以通过在405nm下测量反应混合物的吸光值来计算产物浓度。
胰凝乳蛋白酶的催化反应可以分为两个阶段：开始时的快速反应和随后遵从米氏方程的稳定反应，又被称为“乒乓”机制。这一反应模式可以用胰凝乳蛋白酶催化的两个步骤来解释，即先乙酰化底物形成酶－底物中间物；再去乙酰化，酶回复到初始状态。
水解蛋白质肽键的一类酶的总称.按其水解多肽的方式,可以将其分为内肽酶和外肽酶两类.内肽酶将蛋白质分子内部切断,形成分子量较小的月示和胨.外肽酶从蛋白质分子的游离氨基或羧基的末端逐个将肽键水解,而游离出氨基酸,前者为氨基肽酶后者为羧基肽酶.按其活性中心和最适pH值,又可将蛋白酶分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶.按其反应的最适pH值,分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶.工业生产上应用的蛋白酶,主要是内肽酶.
蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中.微生物蛋白酶,主要由霉菌、细菌,其次由酵母、放线菌生产.
催化蛋白质水解的酶类.种类很多,重要的有胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等.蛋白酶对所作用的反应底物有严格的选择性,一种蛋白酶仅能作用于蛋白质分子中一定的肽键,如胰蛋白酶催化水解碱性氨基酸所形成的肽键.蛋白酶分布广,主要存在于人和动物消化道中,在植物和微生物中含量丰富.由于动植物资源有限,工业上生产蛋白酶制剂主要利用枯草杆菌、栖土曲霉等微生物发酵制备.
蛋白质水解酶是水解蛋白质的
非LPMSF
楼主看错了
1mmol/L PMSF：每升中含有1毫摩尔的苯甲基磺酰氟
用途：酶抑制剂，其特异性作用于酶的某些基团，降低酶的活性甚至使酶完全丧失活性的物质。
PMSF：Phenylmethanesulfonyl fluoride，也称Phenylmethylsulfonyl fluoride 或 α-Toluenesulfonyl fluoride。
中文名：苯甲基磺酰氟。
分子式：C7H7FO2S
分子量：174.19
美国化学文摘服务社(Chemical Abstracts Service，CAS)为化学物质制订的登记号：329-98-6
High Purity Grade，纯度＞99％，室温保存
本产品为白色至微黄色粉末。
可抑制丝氨酸蛋白酶例如胰蛋白酶（trypsin）和胰凝乳蛋白酶（chymotrypsin），也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰胆碱酯酶。有效浓度为0.1-1mM。
难溶于水，且在水溶液中非常不稳定。可溶于异丙醇、乙醇和甲醇。
PMSF对人体有毒，请注意小心防护。
为了安全和健康，操作时应穿实验服并戴一次性手套。
例如一种编号为“3.4.21.4”的胰蛋白酶,
第一个数字“3”表示水解酶
第二个数字“4”表示它是蛋白酶水解肽键
第三个数字“21”表示它是丝氨酸蛋白酶,活性位上有一重要的丝氨酸残基
第四个数字“4”表示它是这一类型中被指认的第四个酶。
规定,每种酶的名称应明确写出底物名称及其催化性质。若酶反应中有两种底物起反应,则这两种底物均需列出,当中用“:”分隔开。
