加入无水乙醇后dna 为什么会沉淀
加入无水乙醇后DNA会沉淀是因为：
1、DNA不溶于乙醇，
2、乙醇可以吸附水分子（极性相同）,使得溶液中相对的水分子减少,增大了DNA在水中的相对浓度，
3、乙醇沉淀DNA需要盐离子,用金属离子屏蔽DNA上磷酸的负电荷,降低DNA分子间的斥力,才能沉淀完全。
1.DNA不溶于乙醇
2.乙醇可以吸附水分子（极性相同）,使得溶液中相对的水分子减少,增大了DNA在水中的相对浓度.
3.附：乙醇沉淀DNA需要盐离子,用金属离子屏蔽DNA上磷酸的负电荷,降低DNA分子间的斥力,才能沉淀完全.
换句话就是DNA这个比较娇贵。
乙醇比较柔和，所以用乙醇。
在质粒DNA的制备中，无水乙醇起到沉淀DNA继而达到浓缩DNA的目的，70%的乙醇是用来洗涤DNA的，进一步去除杂质。
在除去蛋白质沉淀后，要加入无水乙醇使质粒沉淀，离心除去上清，再加入70%乙醇清洗DNA沉淀，清洗两次左右。最后要把DNA沉淀溶于TE或ddH2O中。
扩展资料：
1、 测量DNA溶液的体积，按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。
2、 每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液（10mg/ml溶于水）；立即将溴化乙锭溶液（漂浮在表层）与DNA－氯化铯溶液混匀， 溶液的终密度应为1.55g/ml（溶液的折射率为1.3860）溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内（如用锡箔完全包裹的瓶子），于室温保存。
参考资料来源：百度百科-质粒DNA纯化
DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混 合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代懈水乙醇。
但是加95%的乙醇使总体积增 大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。
折中的做法初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙醇,最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA.一般在室温下放置15-30分钟即可。
扩展资料：
酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速离心后取上清，所得DNA大小为100-150kb。甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。
玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在异丙醇中可溶状态）
表面活性剂快速制备法：用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。
碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和，离心后取上清，含少量DNA。
参考资料来源：百度百科-dna提取
提取液中加入等体积预冷的5mol/L
Licl
充分混匀，1000rpm
4℃离心15min，取上清。
加等体积异丙醇，混匀，室温放置10min，10000rpm
4℃离心15min。
弃上清，纯点加入70%乙醇洗涤一次，沉淀风干10~15min。
500ul，含RNA酶的TE（pH8.0）溶解沉淀，室温放置30min。（将质粒RNaesA混合物用酚：氯仿抽提一次，然后用氯仿抽提一次）
用2.5倍体积无水乙醇沉淀质粒，风干10min。
加1ml灭菌水溶解沉淀，加500ul
PEG-MgCl2溶液，充分混合，室温10min，12000rpm
4℃离心15min。
用70%乙醇重悬沉淀，12000rpm
4℃离心15min。
弃上清，沉淀用70%乙醇处理一次，最后将质粒，溶于500ulTE（pH8.0）中，取1ul质粒DNA，100倍稀释后测OD260，计算DNA的浓度，其余封装，-20℃保存备用。
