甲苯胺蓝染色法是怎么做的

甲苯胺蓝染色液染色方法

甲苯胺蓝 是常用的人工合成染料的一种属于醌亚胺染料类，是碱性染料， 甲苯胺蓝 中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色，可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测。不推荐用于软骨、胃粘膜等难染组织的染色。

肥大细胞的染色:

（1）组织脱蜡至水。

（2）蒸馏水浸洗2-3次。

（3） 甲苯胺蓝染液 染20-30min。

（4）稍水洗，洗去多余染色液。

（5）95%酒精分色，在镜下控制分色效果。

（6) 用100%酒精脱水。

（7） 二甲苯 透明， 中性树胶 封片。

肥大细胞染色结果：肥大细胞颗粒呈红紫色，胞核呈蓝色。

细胞涂片染色 ：

（1）细胞涂片后，立即放入95%的乙醇中固定，取出放在纸巾上。

（2）滴加1～2滴稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。

（3）后将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。

（4）无需干燥，直接镜检。

细胞涂片染色结果：细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；核仁呈紫红色；红细胞呈橘红；细胞质、单核细胞呈淡蓝色。

原位杂交染色 ：

（1）用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度，凭经验一般稀释比例大于1:10。

（2） 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。

（3） 在蒸馏水或去离子水浸泡数次。

（4） 按需求进行压片固定。

神经元细胞的染色：

（1）将载有细胞的玻片取出放入4％多聚甲醛中固定1h左右；

（2）到时间后取出用PBS冲洗1～2次即可；

（3）然后加入提前预热的1％甲苯胺蓝溶液，在50度左右的气浴或水浴中染色20～30min；

（4）用梯度酒精已次脱水，分别为75％、90％、100％，也可自定梯度；

（5）在镜下控制分色效果，这一步不太好掌握；

神经元细胞染色结果：可见尼氏小体深蓝色颗粒，细胞核呈淡蓝色，背景基本无色。

北京索莱宝科技有限公司 自产产品 1%甲苯胺蓝染色液 ，货号为 G1220 ，主要用于生化实验中肥大细胞的检测。

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口腔红斑是癌前病变，所以一旦确诊以后，应该手术切除治疗，一般手术切除会比冷冻治疗更为可靠一些。红斑表现为天鹅绒样的鲜红色表面，比较光亮、光滑。如果是间杂型的红斑，会在病损区出现散在的白色斑点，红白相间。如果是颗粒状的，会出现小结节似的小点，通常情况下不难诊断。当诊断为红斑病时，就应该做彻底的治疗，而甲苯胺蓝染色是一种简单快速的检查口腔黏膜早期癌肿的方法，所以一般需要到专业的口腔黏膜病科进行检查，建议与扁平苔藓和白斑进行区分，白斑一般比较明显，会出现白色的斑点，而扁平苔藓的病损是左右对称的，所以要做好鉴别。要特殊染色，只是我们!用特殊试剂，这个就是活检啊，一般常规染色是可以,但是您的常规染色不行，还有我们只有通过常规染色看个大概,才知道要进一步特殊染色，现在常规染色不能确诊，需要 特殊染色，

甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,为碱性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测，例如色素性荨麻疹

指通过胃镜钳取胃黏膜组织，经包埋、切片、染色，镜检观察是否存在幽门螺杆菌（Hp）的一种检查方法。甲苯胺蓝染染色检查hp是指通过胃镜钳取胃黏膜组织，经包埋、切片、染色，镜检观察是否存在幽门螺杆菌（Hp）的一种检查方法。甲苯胺蓝染色, 容易地观察到Hp呈弯曲样的杆菌位于黏膜上皮表面或胃小凹内, 与Hp单抗染色一致。

一、按来源可以分为

1.天然染色剂：主要是苏木素，胭脂红，地衣红，番红花。

2.合成染色剂：是从煤焦油中提取的苯衍生物。

在生物染色中还使用一些无机化合物，如硝酸银，氯化金，磺，锇酸，高锰酸钾等。

二、按主要用途分为

1.胞核染色剂：苏木素，胭脂红，甲苯胺蓝，美蓝，孔雀绿等。

2.胞浆染色剂：伊红，淡绿，橘黄G,酸性品红,苦味酸等。

3.脂质染色剂：苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑，硫酸尼罗蓝及油红等。

三、按染色剂分子中的发色团可分为九类

1.亚硝基类：发色团为亚硝基（-NO)如萘酚缘-B。

2.硝基染料：发色团是硝基（-NO2）如苦味酸。

3.偶氮类：发色团为偶氮基（-N=N-）属于这一类的染色剂的橘黄G,刚果红,俾士麦棕和许多苏丹类的脂质染色剂。

4.醌亚胺类：这类染料含有两个发色团，一个是印胺基（-N=），一个是醌型苯环，如硫堇，美蓝，甲苯胺蓝O,硫酸尼罗蓝,中性红,碱性藏红花O，焦油紫等。

5.苯甲烷染料：发色团是醌型苯环，如孔雀缘，浅绿，碱性品红，酸性品红，结晶紫，甲基缘等。

6.山叮染料：发色团是醌型苯环，如派罗宁，伊红Y等。

7.蒽醌染料：此类染色剂含有色原蒽醌，如茜素和胭脂虫酸。

8.噻唑类。

9.喹啉类。

8，9类染色剂使用极少。

四、按染色剂的化学性质分类 染色剂的干粉是稳定的盐类，它们在溶液中则电离成酸性或碱性染色剂。如酸性染色剂，能够产生氢离子（H+)或其它阳离子(Na+),而其本身成为带负电荷的阴离子者。这类染色剂一般用于染细胞浆，如伊红Y，苦味酸，橘黄G等。碱性染色剂，能产生氢氧根离子（OH-)或其它负离子(如Cl-),而本身成为带正电荷的阳离子者。这类染色剂常用于染细胞核,如碱性品红等。 1.酸性染色剂：色原——助色团——Na→[色原-助色团]+Na+。常用的如伊红，酸性品红，苦味酸，橘黄G，刚果红，水溶性苯胺蓝，淡绿等酸性染料常用以染细胞浆等碱性成份。 2.碱性染色剂：色原——助色团——Cl→[色原-助色团]+Cl。常用的如苏木素,卡红,次甲基蓝,甲苯胺蓝,硫堇,美蓝等碱性染料常用以染细胞核等酸性成份。 严格地说，酸性染色剂的溶液并不一定呈酸性。同样，碱性染色剂的溶液也未必呈碱性。所谓酸性和碱性染色剂仅指它们电离后其分子的主要染色部分是阳离子还是阴离子。因此称为阳离子型染色剂或阴离子型染色剂更为适当。 常规H.E染色中苏木素染液的PH值约为7，此时胞核的化学成份电离产生H+，而其本身成为带电荷的阴离子，所以被阳离子型的碱性染料剂所着色。伊红染液为弱酸性。细胞的化学成份从溶液中获取H+而成为带正电荷的阳离子，因此与阴离子型的酸性染色剂（伊红）相结合，染作红色，这就是H.E染色分别显示核和胞浆的机制。 3.中性染色剂：这是酸性染色剂和碱性染色剂的复合物，又可称为复合染料。是由碱性染料（色碱的盐）和酸性染料（色酸的盐）配制而成。其中染色剂的分子很大，所以往往水中溶解度较低，需用酒精做溶剂。血液学中的血液涂片经常使用的瑞氏染色剂及姬姆萨染色剂就是这种混合染色剂。其中的各种不同成分可分剔使核、胞浆和颗粒着色。

结构图 CAS: 3209-30-1 分子式: C28H20N2O10S2·2Na 中文名称: 甲苯胺蓝 2,2'-[(9,10-二氢-4,8-二羟基-9,10-二氧代-1,5-蒽二基)二亚氨基]双(5-甲基苯磺酸)二钠盐 英文名称: Toluidine blue Benzenesulfonic acid, 2,2'-[(9,10-dihydro-4,8-dihydroxy-9,10-dioxo-1,5-anthracenediyl) diimino]bis(5-methyl-, disodium salt Dimethyl toluth ionine, chloride 甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,为碱性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测，例如色素性荨麻疹 染色方法: (一)1.甲苯胺蓝液 甲苯胺蓝0.5g 蒸馏水定容至100ml 2.冰醋酸液 冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml 染色步骤 1.组织切片常规脱蜡至水 2.入甲苯胺蓝液30min 3.稍水洗 4.入冰醋酸液分化，直到胞核和颗粒清晰。 5.稍水洗，用冷风吹干 6.二甲苯透明，中性树胶封固 (二) ①切片脱腊至水。 ②蒸馏水浸洗3次。 ③0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。 ④水洗，洗去多余染液。 ⑤各级酒精脱水。 ⑥二甲苯透明，中性树胶封固。 结果：在胃粘膜腺上皮表面，腺腔内均可见到幽并肩战斗让螺杆菌（HP），有的呈弯曲杆状或逗点状，HP可散在出现，也可成团聚集出现，这要根据不同病例而异。 试剂的配制：称取0.1g甲苯胺蓝，溶于100ml 0.1M醋酸盐缓冲液中，置室温5天后，即可使用染液于室温下可保存3个月，若放于4℃冰箱则可保存半年左右，但该液的染色效果在早期为最佳，若染液存放时间较长，则染色偏淡，应适应延长染色时间。 TOLUIDINE BLUE, 甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,为硷性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测，例如色素性寻麻疹亚甲基蓝 基本信息英文名Methylene Blue别名3,7-Bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium chloride产品名称亚甲基蓝分子结构分子式C16H18ClN3S分子量319.85CAS 登录号122965-43-9 亚甲基蓝在好氧细菌检测方面的知识:好氧细菌经过进行有氧呼吸产生大量的二氧化碳,使环境(添加亚甲基蓝的培养液)变弱酸性,亚甲基蓝由氧化态的蓝色变成还原态的无色,所以可以检测好氧细菌的存在.同时也是一种PH指示剂。

苯胺蓝为酸性染色剂，甲苯胺蓝为碱性染色剂。

苯胺蓝(英文Aniline blue)是一种混合酸性染料，平常所用很难有一定的标准。此染料一般很难溶于水，也不易溶于酒精（1.5％）。植物制片中可与番红合用，作为组织染色；也可作藻类植物染色。因为这种染料的成分很不一致，染色效果不易掌握。

甲苯胺蓝，是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,为碱性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。