1.5M巯基乙醇怎么配
巯基乙醇分子量为92.12,
0.6 mmol为0.6*92.12/1000=0.055272g,一般来说分析天平可以称准0.05g的。将样品转移至15ml容量瓶中,用乙醇定容至15ml,就可以获得15ml,0.6mmol的巯基乙醇溶液啦。
50mM的β巯基乙醇配置:算出来mol,然后最好用移液枪配制浓溶液,然后稀释后用,这样可以配制减少误差。比如液体的纯度是90%,密度是0.8,我们就可以知道1ml液体含有多少羟基乙醇(m=pV*0.9),然后n=m/M,最后c=n/V。
如果你要跑还原性电泳,样品需要用含有β-巯基乙醇的loading buffer沸煮5分钟,这样使蛋白间的二硫键在还原剂β-巯基乙醇的作用下被打开,得到的是蛋白的一级结构。
而非还原的电泳就是在loading buffer中不加入还原剂β-巯基乙醇,这样的电泳比较能够真实的反应蛋白当时的情况,比如二聚体或者多聚体之类的。
化学性质
乙醇的官能团是羟基(—OH),其化学性质主要由羟基和受它影响的相邻基团决定,主要反应形式是О—H键和C—О键的断裂。羟基的结构特征是氧的电负性很大,分子中的C—О键和O—H键都是极性键,因而乙醇分子中有2个反应中心。由于α-H和β-H受到C—О键极性的影响具有一定的活性,因此它们还能发生氧化反应和消除反应等。
以上内容参考:百度百科-2-巯基乙醇
SDS使蛋白质变性,用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳。也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸-蛋白复合物。在乳液聚合反应中,可充当两相溶液的乳化剂。
巯基乙醇用于打开二硫键的,使蛋白质的四级或三级结构被破坏。
甘油使样品处于下面,不易飘起,并有保护作用。
溴酚蓝用于显色,起指示作用。
扩展资料
SDS的用途
1、用作洗涤剂和纺织助剂,也用作牙膏起泡剂、矿井灭火剂、乳液聚合乳化剂、羊毛净洗剂等。
2、用作阴离子型表面活化剂、乳化剂及发泡剂。
3、GB 2760-96规定为食品工业用加工助剂。发泡剂;乳化剂;阴离子型表面活性剂。用于蛋糕、饮料、蛋白、鲜果、果汁饮料、食用油等。
4、用作药物、化妆品、合成树脂的乳化剂。牙膏、灭火器的发泡剂。用作丝毛类精品织物的洗涤剂。金属选矿的浮选剂。
5、用作洗涤和纺织助剂,也用作牙膏发泡剂,灭火泡沫液,乳液聚合乳化剂,医药用乳化分散剂,洗发剂等化妆制品,羊毛净洗剂。
6、生化分析,电泳,离子对试剂。
巯基乙醇属于蛋白质类。蛋白质(Protein)是细胞组成的基本物质,为各种α-氨基酸借酰胺键(即肽键)连接起来,形成一类高分子量多肽(蛋白质与多肽至今还没有明确的界线)。 分子量很大可以达到数百万,甚至在千万以上,结构复杂,官能团性质多样。少数蛋白质已可以制成结晶状态。多数蛋白质可溶于水,而生成胶体溶液。不过,各种蛋白质的性质不同,在溶剂中溶解度也会不同。蛋白质的水溶液,振摇后能产生肥皂样的泡沫。一般煮沸蛋白质的水溶液,蛋白质即被凝固,浓乙醇也会使蛋白质凝固 蛋白质一般不溶于有机溶剂。蛋白质可以酶解或水解成为氨基酸。蛋白质易受潮受热而分解、发霉、变质,一般均应防潮,对一些极易受温度影响而变质的蛋白质制品,需贮存于4。C的冷冻处。
1。非无菌状态的药品是不适合添加到细胞培养基中的。你最好的解决办法是购买一瓶细胞培养适用,经过厂商无菌处理的2-巯基乙醇,在保持无菌条件下分装和使用。
2。自行过滤来除菌的办法适用于很多水溶液,但是2-巯基乙醇有可能与你的滤膜存在兼容性的问题,必须仔细查看清楚相关资料。我的真实经历是使用PES(聚醚砜,一种常见的滤膜)过滤冻存细胞要用的DMSO二甲亚砜,结果二甲亚砜把滤膜都溶掉了。最后我不得不买了细胞专用的无菌二甲亚砜。
(1)胍盐:a.盐酸胍;b. 异硫氰酸胍;
作用:强烈的蛋白质变性剂;
(2)重蒸酚
★区别于饱和酚
重蒸酚加入0.1%的8-羟基喹啉(作为抗氧化剂),并用等体积的0.5mol/L Tris-Cl (pH8.0)和0.1mol/L Tris-Cl(pH8.0)缓冲液反复抽提使之饱和并使其pH值达到7.6以上,主要用于DNA的抽提。
因为苯酚是酸性的,酸性条件(pH<7)下DNA会分配于有机相,故不能用重蒸酚。本实验中Trizol溶液pH<7,故要使用重蒸酚。适合RNA的抽提。
作用:有机溶剂;蛋白质变性剂;
个人觉得不要自己配了还是买trizol 试剂盒吧,自己配的麻烦还不容易操作。