如何提高苯酚-次氯酸钠比色法测定发酵液中氨态氮准确度
一、方法要点
氨与苯酚及次氯酸钠在碱性介质中，以亚硝酰铁氰化钠为催化剂，生成蓝色的靛酚。颜色的深度与氨浓度成比例，可用分光光度法测定。显色反应受pH值、温度及次氯酸盐浓度等因素影响较大。采用pH 11.7的磷酸盐缓冲溶液，在37℃发色30min，次氯酸盐浓度为50mg／L(指测定体系的浓度，以有效氯计)，在此条件下灵敏度最高。钙、镁及其他金属离子的干扰可用EDTA掩蔽消除。
二、试剂与仪器
(1)铵标准溶液：称取3．8190g在100℃干燥过的无水氯化铵，溶于水中，转入1L容量瓶中，稀释至标线，此溶液含氨氮为1mg／mL。再吸取10mL置于1000mL容量瓶中，用水稀释至标线，此溶液含氨氮为0．01mg／mL。
(2)溶液A：溶解5g苯酚和25mg亚硝酰铁氰化钠于水中，稀释至500mL，放入棕色瓶中贮存，并置于冰箱中。
(3)溶液B：溶解2．5g氢氧化钠、18．7g、磷酸氢二钠和15.9g磷酸钠(Na3PO4·12H2O)于水中，加入含有效氯250mg的次氯酸钠溶液，用水稀释，用磷酸或磷酸钠调节至pH11．7，然后用水稀释至500mL。
(4)EDTA溶液(1％)：溶解1gEDTA于100mL水中，用浓氢氧化钠溶液调节pH 10。
(5)次氯酸钠溶液：将浓盐酸滴加于二氧化锰上，使发生的氯气通入2mol／L氢氧化钠溶液中。可得有效氯浓度为0.3～0.4mol／L的溶液。或将5％～10％漂白粉溶液用浓盐酸调至pH 6．5～7制得，两种方法制得的次氯酸钠溶液均不稳定，使用前需用硫代硫酸钠间接碘量法测定其中的有效氯。用漂白粉溶液制备次氯酸钠时，会产生大量钙的沉淀，必须滤去。
(6)分光光度计。
(7)pH-S-3型酸度计。
三、分析步骤
量取处理后的水样或试液，置于100mL容量瓶中，加1mL 1％EDTA溶液(如样液含钙、镁较多时加3mL)，摇匀，加入10mL溶液A，加10mL溶液B，摇匀，用水稀释至标线，再摇匀。置于37℃恒温水浴中30min(或20～30℃室温下4h)，用1cm比色皿，于625nm波长处，以试剂空白为参比，测定吸光度。由标准曲线查得相应的氨氮含量。
计算：
氨氮(mg.N／L)=测得氨氮量（μg)/水样体积(mL)
四、标准曲线的绘制
在6个100mL容量瓶中，分别加入0.0、1．0、3．0、5.0、7.0、9.0μg氨氮
氨气的检验方法有三种：
1、用湿润的红色石蕊试纸检验，试纸变蓝证明有氨气
2、用玻璃棒蘸浓盐酸或者浓硝酸靠近，产生白烟，证明有氨气
3、氨气检测仪表可以测量空气中氨气的浓度。
氨气是无色气体，有强烈的刺激气味，在常温下加压即可使其液化，也易被固化成雪状固体。氨气能灼伤皮肤、眼睛、呼吸器官的粘膜，人吸入过多，能引起肺肿胀，以至死亡。
1、试纸：用湿润的红色石蕊试纸检验，试纸变蓝证明有氨气。
2、酚酞：把氨气通入酚酞中，溶液变红，也是证明氨气。
3、浓盐酸：用蘸有浓盐酸的玻璃棒靠近，出现白烟（NH4Cl），证明有氨气。
4、奈斯勒试剂：用氢氧化钾和四碘合汞(II)酸钾的混合液体，可以检验氨气。
5、氨气检测仪表：可以定量测量空气中氨气的浓度。
一、光学类氨气传感器
光学类传感器主要的类型有光干涉式传感器、紫外吸收式传感器、红外吸收式传感器和光纤式传感器。对于氨气检测的两种主要的光学原理一种是基于氨气发生反应的试剂的颜色或引发指示剂颜色变化；另一种机理是检测气体对光的吸收完成传感确定气体浓度。
待测气体发生反应着色后可以利用分光光度法对其进行分析。由于氨气气体为碱性气体一定浓度下，可以令pH试纸变色，从而分析气氛中是否含有氨气，但是这种测试需要保证氨气浓度较高而且对于试纸颜色变化不能灵敏判断会产生较大误差。
光学类传感器测能够用于检测环境中氨气的含量，是一种灵敏度较高且选择性较好的气体传感器。激光器和摄谱仪是光吸收氨气检测系统的主要组成部分。激光器发射光线穿过空气，到达检测器的光会因为空气中气体组分不同和各组分特性对接的光谱产生一定的影响，完成对气体环境中氨气含量的检测，在灵敏度和选择性方面有明显的优越性。
二、金属氧化物传感器
金属氧化物气体传感器成为构成的气体传感器中比较受关注的气敏材料之一。经研究发现，氧化锡、三氧化钼、氧化钛这些金属氧化物都能够用来检测氨气。金属氧化物传感器具有坚固耐用，价格低廉，操作简单等优点，是一种非常有前途的气体传感器。
金属氧化物传感器的机理主要是通过化学吸附将氨气分子吸附到金属氧化物的传感层上，引起金属氧化物传感器上的电导发生变化，从而确定氨气的浓度。
3、导电聚合物氨气传感器
利用导电聚合物可以实现对氨气的监测，例如：聚吡咯，聚苯胺和聚噻吩等，相对于金属与金属氧化物而言，导电聚合物作为导电传感器能够在室温下工作。导电聚合物对于氨气的传感机理主要依赖于氨气与导电聚合物之间的氧化还原反应，由于这种反应的不可逆性使长时间暴露在氨气环境中的导电聚合物传感器的灵敏度逐渐降低。
当然可以 苯酚又叫石炭酸 显弱酸性 酸性比碳酸和乙酸都弱 但比HCO3-的强
在水中发生反应：:(C6H5)0H=(C6H5)O- + H+
氨水可以发生水解反应:NH3H2O=NH4+ + OH-
而H+ + OH-=H20 所以可以拉 上面的等号可不是等好 是可逆符号
