用无水乙醇分离绿叶中的色素
可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素,但不是用它来分离,我们用的是层析液分离,光合色素在层析液中的溶解度不同.溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢.所以叶绿体色素分离用层析液.
光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中,可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素.
不同的光合色素在层析液中的溶解度不同.溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢.所以叶绿体色素分离用层析液.
可能光合色素在无水乙醇中的溶解度差不多.
无水乙醇可以提取叶绿素中的色素,而丙酮的作用是萃取色素。因为色素易溶于有机溶剂。
纸层析法提取叶绿素步骤:
①将新鲜菠菜叶片洗净擦干,去叶柄及叶脉.称取样品 8g,剪碎置研钵内,加入 8mL丙酮及少许固体碳酸钠,迅速研磨成匀浆;然后再加入 20mL丙酮充分研磨。
②在一玻璃漏斗底部垫一小团脱脂棉,将匀浆通过脱脂棉过滤至已装有 20cm3石油醚的分液漏斗中,再用少量的丙酮冲洗叶片残渣及研钵,合并滤液。
③ 沿分液漏斗的壁小心加入 40cm3蒸镏水,轻轻摇动,使色素转移到上面的石油醚层静置数分钟,待分层清楚后弃去下面的丙酮一一水层.如发生乳化现象可加入 2-3cm3饱和NaCl 溶液.
④ 在分液漏中再加入 40cm3蒸镏水,轻轻摇动,以洗去石油醚中残留的丙酮,共洗两次.然后将叶绿素的石油醚提取液放入具塞锥形瓶中,置暗处或用黑纸包好备用.