溴酚蓝和二甲苯青先出加样孔的是谁

两条带分别代表溴酚蓝和二甲苯氰。在0.5xTBE为缓冲液，琼脂糖浓度低于2%的凝胶电泳中溴酚蓝迁移速率约与长300bp的线状双链DNA相同，而二甲苯氰约与长4000bp的DNA相同。

首先你要搞明白为什么要电泳,电泳的目的是什么.我不知道你有没有亲自做过电泳,首先希望你先查询下如何DNA电泳.在DNA电泳前,

在需要电泳的DNA溶液里加上loading

buffer,目的是在电泳时可以看到指示带,有两条：跑在前面的蓝色条带是溴酚蓝,位置大约相当于300bp的DNA,后面的绿色条带是二甲苯青FF,相当于4000bp左右大小DNA的位置.

2.在制备琼脂糖胶时,需要加入EB,EB可以与DNA结合,在紫外灯下显示DNA位置,也就是你说的白色条带.

3.现在有些实验室用一些新型染料（EB有毒）,可以用蓝光而不是紫外观察条带,这个时候看到的DNA条带其实是淡蓝色的,不是白色的.

溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状dna相同,而二甲苯青ff的泳动则与长4kb的双链线状dna相同。

希望能够对你有所帮助。

二苯胺和抗坏血酸显色后出现的就是同功酶的条带了,这是利用酶的催化作用产生的颜色,其他蛋白不会显示出来.

溴酚蓝指示的条带不水平,可能原因很多,比如胶聚合不均匀,电泳电压过大,样品或点样缓冲液有问题等等都有可能.

前面的蓝色的条带是溴酚蓝，代表的片段大小是 300bp，后面的有点绿色的条带是二甲苯青，代表的片段大小在4000bp左右。

loading buffer的功能主要有两个。第一，里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用，显示电泳的进程，以便我们适时终止电泳；第二，里边的成分甘油可以加大样品密度，使样品密度大于TAE，从而沉降到点样孔中，防止样品飘出点样孔。

只是用于指示作用，防止跑胶跑过了。一般跑电泳时，片段的大小很少小于300bp，大于4000bp，目的DNA片段的电泳迁移率介于两者之间，当前面的蓝色条带迁移到4/5的位置时就可以终止电泳了，蓝色条带在胶内，那么扩增的DNA片段一定还在胶内，其位置在蓝色条带的后面。

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3,3′,5,5′-四溴苯酚磺酞。一种pH 指示剂，在pH 3.0~4.6范围，颜色由黄变蓝。常用做电泳指示染料，凝胶中电泳迁移速度在小分子核酸或蛋白质区域。

中文名

溴酚蓝

英文名

Bromophenol blueAlbutest

别称

四溴苯酚磺酞

化学式

C19H10Br4O5S

分子量

670.02

CAS登录号

115-39-9

目录

1 基本信息

2 CAS编号

3 性状描述

4 物理参数

5 用途说明

6 贮藏运输

7 危险说明

8 配置方法

溴酚蓝基本信息

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【中文全称】3，3′，5，5′-四溴苯酚磺酰酞

【别名】 四溴苯酚磺酞

【英文名称】Bromophenol blueAlbutest

【英文别名】 3,3,5,5-TetrabromophenolsulfonephthaleinBPBTetrabromophenoltetrabromosulfonephthaleinBromophenol Blue (0.1% in water)Bromophenol blue solutionBromphenol Bluetetrabromophenolsulphonephthalein

【分子式】C19H10Br4O5S

【相对分子量或原子量】670.02

【性状】 从乙酸及丙酮混合液中析出者为长六角形棱柱状结晶。近似黄色或浅玫瑰色结晶性粉末，微溶于水及乙醚，溶于乙醇或稀碱液及氨液中呈蓝色。PH变色范围 3.0(黄)~4.6(蓝紫)

【溶解情况】 微溶于水，易溶于甲醇、乙醇和苯，可自由溶于氢氧化钠溶液，同时形成溴酚蓝钠盐水溶液。

【用途】 pH指示剂，pH=3.0时呈黄色，pH=4.6时呈蓝紫色。酸碱指示剂；非水滴定用指示剂，蛋白电泳染色；病毒化验等。

【制备或来源】 将苯酚磺酰酞悬浮于醋酸中，然后徐徐加入溴，并使溴过量，在搅拌下，于50℃进行反应而得。

【其他】 溴酚蓝分解温度279℃，在210℃绿色升华物退色为橙色。

溴酚蓝CAS编号

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CAS编号：115-39-9

溴酚蓝性状描述

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浅黄色到棕黄色粉末；易溶于氢氧化钠溶液，溶于甲醇、乙醇和苯，微溶于水(约0.4g/100ml)；最大吸收波长422nm

溴酚蓝物理参数

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熔点:273℃(dec.)(lit.)

溴酚蓝用途说明

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配置溴酚蓝指示液。用途：变色范围：pH2.8-4.6（黄-蓝），酸碱指示剂；非水滴定用指示剂，蛋白电泳染色；病毒化验等。

溴酚蓝贮藏运输

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密封阴凉干燥保存

溴酚蓝危险说明

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安全等级:22-24/25

安全术语

S22Do not breathe dust.

切勿吸入粉尘。

S24/25Avoid contact with skin and eyes.

避免与皮肤和眼睛接触。

溴酚蓝配置方法

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方法1：1%的溴酚蓝

将托盘天平上称取1g溴酚蓝定溶于100ml无水乙醇中，转移入滴瓶中，贴标签备用。

方法2：0.05%的溴酚蓝

配western blot用的2*SDS上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝，2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。实际上，溴酚蓝在水中的溶解度不高，直接将0.1g溴酚蓝溶于100ml水是有困难的。下面是其较合适的配制方法：

0.05%的溴酚蓝配制方法：取溴酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围pH2.8～4.6（黄→蓝绿）。只是不知道加入NaOH会不会影响2-DE实验。估计影响不大，因为指示剂用量毕竟很少。

方法3：1%溴酚蓝

加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。