老实的老鼠
2026-01-27 06:36:16
流式pi单染检测细胞周期为什么用乙醇固定细胞
测细胞周期就可以用PI单独染色,也可以用PI加上BrdU/EdU。不论何种方法,都需要固定细胞。使用BrdU还要做细胞膜和核膜的通透,以利于抗体的进入。
一般常见的,只用PI染色的方法,都是使用酒精固定。优点是快速。而BrdU的方法则可以使用多聚福尔马林。测细胞周期就可以用PI单独染色,也可以用PI加上BrdU/EdU。不论何种方法,都需要固定细胞。使用BrdU还要做细胞膜和核膜的通透,以利于抗体的进入。
一般常见的,只用PI染色的方法,都是使用酒精固定。
害羞的鞋子
2026-01-27 06:36:16
因为无论用哪种方法提取,沉淀DNA时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和DNA分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与DNA结合形成DNA-阳离子盐溶于溶液中,再用无水乙醇可以将DNA-阳离子盐沉淀下来,但这样一来,DNA中就含有较多的盐离子,这势必会影响下一步实验的进行,所以要用70%乙醇洗涤DNA沉淀(因为在70%乙醇里DNA是不溶的,而盐离子却可溶),用无水乙醇则达不到这个目的!OK?
顺利的手链
2026-01-27 06:36:16
根据你所购买的试剂盒而定,一般是先用70%乙醇先固定,然后加RNA酶和PI,半个小时左右上机检测就可以了.需要注意的就是加酒精固定的时候要用四度预冷的酒精,缓慢的加,边加边晃动细胞,避免细胞黏连在一起. (1)细胞培养 取对数生长期的细胞,按1X10。
专一的小刺猬
2026-01-27 06:36:16
Bouin's固定液是一种常规用于外科活检固定的良好固定液,用于固定大多数器官和组织,适用于结缔组织,尤其是三色染色时候更为理想,固定效果好,组织细胞结构完整.细胞和着色鲜明,但细胞质着色差.对脂肪固定好,尤其适用于含脂肪的淋巴结、乳腺组织和脂肪瘤标本的固定.固定液偏酸,PH为3-3.5,对抗原有一定的损坏,使组织收缩,不宜于标本的长期保存.有一定的毒性,应避免吸入和与皮肤接触.固定时间12-24小时.固定后组织被染成黄色.需用70-80%的酒精洗涤.在酒精中加入饱和的碳酸锂水溶液有助于清除组织块的黄色.固定后可以直接转入95%酒精中.
因此,在Bouin's中是不能固定超多20周的,最好,固定12-24小时后直接送病理科包埋保存.