乙醇紫外吸收光谱区间高低怎么看
1、λ=589.3nm和18.35°C下,乙醇的折射率为1.36242,即吸光度。
2、如何测定乙醇含量及各种方法:
乙醇含量的测定有物理方法和化学方法。
物理方法有气相色谱法、密度瓶法、酒精计法、折射计测定法。
化学方法重铬酸钾比色法、莫尔氏盐法、碘量滴定法。
乙醇的分子式为C H OH,也可写为EtOH,Et代表乙基。是醇类的一种,是酒的主要成份,俗称酒精,它在常温、常压下是一种易燃、易挥发的无色透明液体,它的水溶液具有特殊的、令人愉快的香味,并略带刺激性。乙醇的用途很广,可用乙醇来制造醋酸、饮料、香精、染料、燃料等。医疗上也常用体积分数为70%——75%的乙醇作消毒剂等。
有紫外吸收
西格玛成键轨道-反键轨道的跃迁,孤对电子向西格玛反键轨道跃迁都会产生紫外吸收,但吸收峰较弱,且在小于200纳米处。
乙醇紫外最大吸收约为196纳米
丙二醇的吸收峰未查到
不管是红外还是紫外吸收光谱,在手头没有工具书告诉你乙醇和苯的特征峰波数的时候,你需要拿纯的苯和乙醇做出标准谱图。然后,用待测样品的谱图去对比,若有苯的特征峰出现,则说明待测乙醇样本中含有苯。
这样做可以是可以,但是如果含量太少,杂峰太多,就不好分辨,也不易做定量分析。还是用GC或者HPLC比较准确,柱子感觉应该用弱极性的,看看说明书。
酰胺类的应该在300nm以下,因为羰基在270~300nm,这是相对特征性的,当然这个也要结合吸收系数等来判断,在羰基和氮原子发生p-派共轭的情况下,派反键轨道的能量上升,而n轨道被稳定了,能量下降,因此跃迁需要能量增加,吸收波长移向低波数。
1.发色团
分子中能吸收紫外光或可见光的结构系统叫做发色团或生色团。象C=C、C=O、C≡C等都是发色团。
发色团的结构不同,电子跃迁类型也不同。一般有π→π*或n→π*跃迁。
2.助色团
有些原子或基团,本身不能吸收波长大于200 nm的光波,但它与一定的发色团相连时则可使发色团所产生的吸收峰向长波长方向移动,并使吸收强度增加,这样的原子或基团叫做助色团。一般指带有非键电子对的基团,如-OH、-OR、-NHR、-SH、-CI、-Br、 -I等。
3.蓝移和红移
某些有机化合物因反应引入含有未共享电子对的基团使吸收峰向长波长移动的现象称为长移或红移(redshift)相反,使吸收峰向短波长移动的现象称为短移或蓝移(紫移)(blue shift)。
4.浓色效应和淡色效应
使吸收强度增加的现象称为浓色效应或增色效应(hyperchromic effect)使吸收强度降低的现象称为淡色效应或减色效应(hypochromic effect)。
5.吸收光谱
又称吸收曲线,以波长(nm)为横坐标,以吸光度A或吸收系数ε为纵坐标。光谱曲线中最大吸收峰所对应的波长相当于跃迁时所吸收光线的波长称为λmax。和λmax相应的摩尔吸收系数为εmax。εmax>104的吸收峰为强带。εmax<103的吸收峰为弱带。曲线中的谷称为吸收谷或最小吸收(λmin),有时在曲线中还可看到肩峰(sh)。
二、吸收带
在紫外光谱中,吸收峰在光谱中的波带位置称为吸收带。根据电子跃迁及分子轨道的种类,可将吸收带分为四种类型。在解析光谱时,可以从这些吸收带的类型推测化合物的分子结构。1.R带它是由n→π*跃迁产生的吸收带,是含杂原子的不饱和基团,如C=O,-NO2,-NO,-N═N-等发色团的特征。特点n→π*跃迁的能量最小,处于长波方向,一般λmax>270 nm跃迁的几率小,吸收强度弱,ε<1002.K带(共轭基团),它是由共轭体系的π→π*跃迁产生的。K吸收带是共轭分子的特征吸收带,因此用于判断化合物的共轭结构。紫外-可见吸收光谱中应用最多的吸收带。特点:吸收峰的波长小于R带,一般λmax:210~250 nm(随着共轭双键的增加,吸收峰红移)跃迁的几率大,吸收强度大,ε>104。在芳香环上如有发色团取代时,也会出现K带。苯乙烯λmax=248nmεmax=1.4x104K带苯甲醛λmax=249 nmεmax=1.1x104K带3.B带(苯型谱带)。它是芳香族化合物的特征吸收带。是由苯环本身的振动及闭合环状共轭双键π→π*跃迁而产生的吸收带,又称苯的多重吸收。特点:a.在230~270 nm呈现一宽峰,中心λmax=256 nm,且具有精细结构(在极性溶剂中测定或苯环上有取代基时,精细结构消失)b.是弱吸收,εmax=220。4.E带(乙烯型谱带)它是芳香族化合物的另一特征吸收带。E带可分为E1及E2两个吸收带,二者可以分别看成是苯环中的乙烯键和共轭乙烯键所引起的也属π→π*跃迁。E1带:λmax184nm左右,强吸收,ε≈4.7x104,由苯环内乙烯键上的π电子被激发所致。E2带:λmax203nm处,中强吸收,ε≈7x103由苯环的共轭二烯所引起。当苯环上有发色团取代且与苯环共轭时,E2常常与K带合并,同时吸收峰向长波移动。
三、Lambert-Beer定律
Lambert-Beer定律是物质对光吸收的基本定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。04紫外-可见吸收光谱与分子结构
化合物的UV-Vis特征,主要取决于分子中发色团与助色团以及它们之间的共轭情况, UV-Vis光谱在研究化合物的结构中,可以推定分子的骨架,判断发色团之间的共轭关系和估计共轭体系中取代基的种类、位置和数目。
1.有机化合物的紫外吸收光谱
1.1饱和化合物
1)饱和烃类化合物:只含有单键(σ键),只能产生σ→σ*跃迁,吸收带位于远紫外区,如甲烷和乙烷的吸收带分别在125 nm和135 nm。在近紫外区(200~400 nm)没有吸收(透明),因此在紫外吸收光谱中常用作溶剂。
2)含有杂原子的饱和化合物:除了σ→σ*跃迁,还有n→o跃迁,其吸收带在近紫外区的也不多,但若作溶剂使用,可能在200 nm以上出现末端吸收,会增强或影响被测组分在该区域的吸收,从而产生测量误差。因此测定波长须大于溶剂的截止波长。
1.2 不饱和化合物
1)简单的不饱和化合物:由于含有元键而具有π→π*跃迁,π→π*跃迁能量比σ→σ*小,但对于非共轭的简单不饱和化合物跃迁能量仍然较高,吸收峰位于远紫外区。如最简单的乙烯化合物,吸收峰在170 nm附近,ε≈104若C=C双键上连接的H原子被烷基取代,可产生σ~π超共轭效应,吸收峰红移,烷基取代数越多,红移值越大。若C=C双键上连接的H原子被助色团取代,π→π*吸收将发生红移,甚至移到紫外光区。原因是助色团中的n电子可以产生p-π共轭,使π→π*跃迁能量降低。
2)共轭烯烃:在同一分子中,若两个生色团只隔一个单键则形成共轭体系,共轭体系中两个生色团相互影响,其吸收光谱与单一生色团相比,有很大改变:即吸收峰红移,吸收强度增加。共轭体系越长,吸收峰红移越显著。
3)α,β-不饱和羰基化合物在α,β--不饱和醛、酮、酸、酯中,由于 C=O与C=C共轭,使n→π*、π→π*跃迁红移。π→π*:~200 nm至215~250 nm(ε>104) n→π*:~280 nm至310~350 nm(ε<100)芳香族化合物在近紫外区显示特征的吸收光谱。苯是最简单的芳香族化合物,具有环状共轭体系,在紫外光区有E1,E2带和B带三个吸收带,都是由π→π*跃迁产生的。B带是芳香族化合物的特征,对鉴定芳香族化合物很有价值。在苯环上引入取代基,会使苯的π→元*跃迁引起的各吸收带发生位移。苯环上有取代基时,一般引起B带的精细结构消失,并且各谱带的λmax发生红移, εmax值通常增大
比色法 供试品本身在紫外-可见光区没有强吸收,或在紫外光区虽有吸收但为了避免干扰或提高灵敏度,加入适当的显色剂,使反应产物的最大吸收移至可见光区。
用比色法测定时,由于显色时影响显色深浅的因素较多,应取供试品与对照品或标准品同时操作。除另有规定外,比色法所用的空白系指用同体积的溶剂代替对照品或供试品溶液,然后依次加入等量的相应试剂,并用同样方法处理。
当吸光度和浓度关系不呈良好线性时,应取数份梯度量对照品溶液,用溶剂补充至同一体积,显色后测定各份溶液的吸光度,然后以吸光度与相应的浓度绘制标准曲线,再根据供试品的吸光度在标准曲线上查得其相应的浓度,并求出其含量。
5 注意事项
5.1 试验中所用的量瓶和移液管均应经检定校正、洗净后使用。
5.2 使用的石英吸收池必须洁净。当吸收池中装入同一溶剂,在规定波长测定各吸收池的透光率,如透光率相差在0.3%以下者可配对使用,否则必须加以校正。
5.3 取吸收池时,手指拿毛玻璃面的两侧。装样品溶液以池体积的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无残留溶剂,为防止溶剂挥发后溶质残留在池子的透光面,可先用醮有空白溶剂的擦镜纸擦拭,然后再用干擦镜纸拭净。吸收池放入样品室时应注意每次放入方向相同。使用后用溶剂及水冲洗干净,晾干防尘保存,吸收池如污染不易洗净时可用硫酸发烟硝酸(3:1V/V)混合液稍加浸泡后,洗净备用。如用铬酸钾清洁液清洗时,吸收池不宜在清洁液中长时间浸泡,否则清洁液中的铬酸钾结晶会损坏吸收池的光学表面,并应充分用水冲洗,以防铬酸钾吸附于吸收池表面。
5.4 含有杂原子的有机溶剂,通常均具有很强的末端吸收。因此,当作溶剂使用时,它们的使用范围均不能小于截止使用波长。例如甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。另外,当溶剂不纯时,也可能增加干扰吸收。因此,在检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求,即将溶剂置lcm石英吸收池中,以空气为空白(即空白光路中不置任何物质)测定其吸光度,溶剂和吸收池的吸光度应符合表3规定。
表3 以空气为空白测定溶剂在不同波长处的吸光度的规定
波长范围(nm) 220-240 241-250 251-300 300以上
吸光度≤ 0.40 ≤ 0.20≤ 0.10 ≤ 0.05
每次测定时应采用同一厂牌批号,混合均匀的同批溶剂。
5.5 称量应按药典规定要求。配制测定溶液时稀释转移次数应尽可能少,转移稀释时所取容积一般应不少于5ml。含量测定时供试品应称取2份,如为对照品比较法,对照品一般也应称取2份。吸收系数检查也应称取供试品2份,平行操作,每份结果对平均值的偏差应在±O.5%以内。作鉴别或检查可取样品1份。
5.6 供试品溶液的浓度,除各品种项下已有注明者外,供试品溶液的吸光度以在0.3—0.7之间为宜,吸光度读数在此范围误差较小,并应结合所用仪器吸光度线性范围,配制合适的读数浓度。
5.7 选用仪器的狭缝谱带宽度应小于供试品吸收带半高宽度的10%,否则测得的吸光度值会偏低,或以减小狭缝宽度时供试品溶液的吸光度不再增加为准,对于《中国药典》紫外分光光度法测定的大部分品种,可以使用2nm缝宽,但当吸收带的半高宽小于20nm时,则应使用较窄的狭缝,例如青霉素钾及钠的吸光度检查则需用lnm缝宽或更窄,否则其264nm的吸光度会偏低。
5.8 测定时除另有规定者外,应在规定的吸收峰±2nm处,再测几点的吸光度,以核对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸光度最大的波长作为测定波长,除另有规定外吸光度最大波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内,否则应考虑试样的同一性、纯度以及仪器波长的准确度。
5.9 用于制剂含量测定时,应注意供试液与对照液的pH值是否一致,如pH值对吸收有影响,则应调溶液的pH值一致后再测定吸光度。
1 简述
紫外光-可见分光光度法是通过被测物质在紫外光区或可见光区的特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。
定量分析通常选择物质的最大吸收波长处测出吸收度,然后用对照品或吸收系数求算出被测物质的含量,多用于制剂的含量测定;对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法;若该物质本身在紫外光区无吸收,而其杂质在紫外光区有相当强度的吸收,或杂质的吸收峰处该物质无吸收,则可用本法作杂质检查。
物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生,因此,紫外吸收主要决定于分子的电子结构,故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环等发色基团,均可在紫外区(200~400nm)或可见光区(400~850nm)产生吸收。通常使用的紫外-可见分光光度计的工作波长范围为190~900nm,
紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。朗伯—比尔(Lambert-Beer)定律为光的吸收定律,它是紫外分光光度法定量分析的依据,其数学表达式为:
A=log(1/T)=Ecl
式中:A为吸光度;
T为透光率;
E为吸收系数;
c为溶液浓度;
l为光路长度。
如溶液的浓度(c)为1%(g/ml),光路长度(l)为1cm,相应的吸光度即为吸收系数,以 表示。如溶液的浓度(c)为摩尔浓度(mol/L),光路长度为lcm时,则相应有吸收系数为摩尔吸收系数,以ε表示。
2 仪器
紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。
为了满足紫外-可见光区全波长范围的测定,仪器备有二种光源,即氘灯和碘钨灯,前者用于紫外区,后者用于可见光区。
单色器通常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件、聚焦透镜或反射镜等组成,色散元件有棱镜和光栅二种,棱镜多用天然石英或熔融硅石制成,对200~400nm波长光的色散能力很强,对600nm以上波长的光色散能力较差,棱镜色散所得的光谱为非匀排光谱。光栅系将反射或透射光经衍射而达到色散作用,故常称为衍射光栅,光栅光谱是按波长作线性排列,故为匀排光谱,双光束仪器多用光栅为色散元件。
检测器有光电管和光电倍增管二种。
紫外-可见分光光度计依据其结构和测量操作方式的不同可分为单光束和双光束分光光度计二类。单光束分光光度计有些仍为手工操作,即固定在某一波长,分别测量比较空白、样品或参比的透光率或吸收度,操作比较费时,用于绘制吸收光谱图时很不方便,但适用于单波长的含量测定。双光束分光光度计藉扇形镜交替切换光路使分成样品(S)和参比(R)两光束,并先后到达检测器,检测器信号经调制分离成两光路对应信号,信号的比值可直接用记录仪记录,双光束分光光度计操作简单,测量快速,自动化程度高,但作含量测定时,为求准确起见,仍宜用固定波长测量方式。
λ=589.3nm和18.35°C下,乙醇的折射率为1.36242,比水稍高。乙醇电子跃迁需要能量较高,需要在近紫外光区(4-200nm)才有吸收。而紫外-可见光区在200-700nm范围内,这样就避免了对被检测物质的干扰。
一般一组样品用的都是相同的溶剂,所以测前进行一次基线校正就可以了;如果两个样品用的溶剂不同,则每测一个样品前都要用它的溶剂进行基线校正。
中药有效部位提取物在含量测定时,一般直接采用标准品的最大吸收波长。不过你要保证你的提取物已经经过一定的富集纯化,且所含杂质在此波长处没有吸收或吸收很小。
未进行排版可能看起来不大方便哈。希望能对你有所帮助。