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dna提取实验中70%乙醇的作用

粗暴的冥王星
俏皮的电话
2022-12-31 08:22:14

dna提取实验中70%乙醇的作用

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酷炫的万宝路
俭朴的小刺猬
2026-01-28 10:41:45

在质粒DNA的制备中,无水乙醇起到沉淀DNA继而达到浓缩DNA的目的,70%的乙醇是用来洗涤DNA的,进一步去除杂质。

在除去蛋白质沉淀后,要加入无水乙醇使质粒沉淀,离心除去上清,再加入70%乙醇清洗DNA沉淀,清洗两次左右。最后要把DNA沉淀溶于TE或ddH2O中。

扩展资料:

1、 测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。

2、 每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液(10mg/ml溶于水);立即将溴化乙锭溶液(漂浮在表层)与DNA-氯化铯溶液混匀, 溶液的终密度应为1.55g/ml(溶液的折射率为1.3860)溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内(如用锡箔完全包裹的瓶子),于室温保存。

参考资料来源:百度百科-质粒DNA纯化

最新回答
仁爱的河马
心灵美的保温杯
2026-01-28 10:41:45

因为无论用哪种方法提取,沉淀dna时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和dna分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与dna结合形成dna-阳离子盐溶于溶液中,再用无水乙醇可以将dna-阳离子盐沉淀下来,但这样一来,dna中就含有较多的盐离子,这势必会影响下一步实验的进行,所以要用70%乙醇洗涤dna沉淀(因为在70%乙醇里dna是不溶的,而盐离子却可溶),用无水乙醇则达不到这个目的!ok?

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老迟到的蓝天
2026-01-28 10:41:45
用70%的酒精是因为这个浓度对沉淀dna效果最好,并且异丙醇能溶于酒精,去除异丙醇,然后挥发酒精,似乎还能除盐。个人见解.异丙醇沉淀以后不必用70%乙醇洗。只有醋酸钠

乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目的是洗去加入的盐

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心灵美的故事
2026-01-28 10:41:45
用70%的酒精是因为这个浓度对沉淀DNA效果最好,并且异丙醇能溶于酒精,去除异丙醇,然后挥发酒精,似乎还能除盐。个人见解.异丙醇沉淀以后不必用70%乙醇洗。只有醋酸钠 乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目的是洗去加入的盐

香蕉蜗牛
细腻的银耳汤
2026-01-28 10:41:45
可以这么说,先使用95%酒精和醋酸钠或异丙醇洗涤,之后用75%酒精洗涤,目的是洗去加入的盐,乙醇浓度太高达不到脱盐效果,太低DNA会融掉,异丙醇沉淀以后有人用无水乙醇洗一遍,目的是加速DNA的干燥,因为异丙醇的挥发性没有乙醇好 ,

主要目的还是为了除盐,前面沉淀DNA时加入的盐会影响你后续的克隆操作,如酶切和PCR