为什么母体血清IgG抗体效价测定时需应用2-巯基乙醇(2-Me)或二硫苏糖醇(DTT

巯基乙醇有毒性，呼吸多了会中毒，滴到了手上有致命危险。

巯基乙醇：危险品，经皮肤、吞咽吸收有致命危险；刺激眼睛、呼吸道粘膜，引起慢性咽炎。水白色易流动液体，具有少许硫醇气味。

应用领域：用作增塑剂及杀虫剂，也用于染料的制造。

扩展资料：

用途：

α-巯基乙醇主要用于血清学检查凝集试验。其临床意义：当其实验值>1∶50为阳性健康搜索，布氏杆菌病符合率为93.88%。

β-巯基乙醇主要用于生产低聚合度聚氯乙烯的链转移剂，腈纶的终止剂。也可用于合成高分子材料的调聚剂、聚合催化剂、交联剂及树脂固化剂等，也可用于合成橡胶、照相、医药、油漆、纺织、金属钝化剂等行业。

β-巯基乙醇在生物实验上的意义：二硫键被打开后可以使蛋白质的四级或三级结构被破坏。由于β-巯基乙醇能够打开蛋白质的结构，它常常被用于蛋白质分析。而β-巯基乙醇也常常被用于保护蛋白质中自由的半胱氨酸巯基之间不会错误形成二硫键。

作为还原剂，2-巯基乙醇常常可以与二硫苏糖醇（DTT）或三(2-甲酰乙基)膦盐酸盐（TCEP）互换使用。β-巯基乙醇是少数几种被发现可以延长小鼠寿命的化合物。在微克量级水平上，2-巯基乙醇被观察到对实验鼠的生命具有多种可能的正面效应。

参考资料来源：百度百科-巯基乙醇

其它理化性质： 1.4996

健康危害： 吸入 、摄入或经皮肤吸收后会中毒。中毒表现有紫绀、呕吐、震颤、头痛、惊厥、昏迷，甚至死亡。对眼、皮肤有强烈刺激性。可引起角膜混浊。

环境危害： 对环境有危害，对水体可造成污染。

燃爆危险： 本品可燃，有毒。

危险特性： 遇高热、明火或与氧化剂接触, 有引起燃烧的危险。受高热分解放出有毒的气体。加入保护剂 防止某些生物活性物质的活性基团及酶的活性中心受到破坏。如最常见的巯基，是许多活性物质和酶催化的活性基团，极易被氧化，故提取时常加入一些还原剂。一些易受重金属离子抑制生理活性的物质，加入某些金属螯合剂，把有害金属离子螯和掉，而保持被提取物的活性。 [螯合剂和巯基试剂] 巯基试剂在生化反应中有两个用途，一是防止蛋白质或酶等分子中的SH-基氧化成S-S，二是某些酶反应中维持体系的还原环境。经常应用的巯基试剂有二硫丁醇类化合物（如二硫苏糖醇DTT、二硫赤酰糖醇DTE）和2-巯基乙醇，谷胱甘肽也经常应用。一般来说二硫丁醇类是常选用的巯基试剂，不仅是因为挥发性低，难闻的气味较少，而且氧化电位低，比2-巯基乙醇浓度低很多的情况下，可以使其他二硫化合物完全还原。螯合剂用于控制反应中金属离子浓度或去除金属离子，常用的螯合剂有EDTA（乙二胺四乙酸）、EGTA、1,10-二氮杂菲、柠檬酸和磷酸等。

二硫键是2个-SH基被氧化而形成的-S-S-形式的硫原子间的键。打开二硫键就是破坏这种氧化作用，加入适量的还原剂就可以达到目的。但随着还原剂被空气中的氧气氧化，二硫键也会重新形成。

外观：无色透明液体。

香气：具有少许硫醇气味。

熔点(℃)： -100

沸点(℃)： 157~158

相对密度(水=1)： 1.1143

相对蒸气密度(空气=1)： 2.69

饱和蒸气压(kPa)： 0.133(20 °C)

闪点(°C)： 73

pKa：Value: 9.64±0.10 (25 °C)

溶解性：易溶于水，乙醇和乙醚等有机溶剂，与苯可以任意比例混溶。

水中溶解度：1 mg/mL 敏感性：对空气敏感，易吸潮 用途用于合成树脂及用作杀霉菌剂、杀虫剂、增塑剂、水溶性还原剂等。 聚合级高纯巯基乙醇可用作氯乙烯、丙烯腈等的调取剂，以及聚合催化剂、聚合物交联剂、固化剂。该品得到美国食品药物管理局的批准，可用作丙烯腈、苯乙烯、甲基丙烯酸甲酯三元树脂制食品包装用吹塑容器时的添加剂。 生物学应用2-巯基乙醇可以打开蛋白质中存在的二硫键：cysS-Scys + 2 HOCH2CH2SH → 2 cysSH + HOCH2CH2S-SCH2CH2OH

二硫键被打开后可以使蛋白质的四级或三级结构被破坏。[2]由于2-巯基乙醇能够打开蛋白质的结构，它常常被用于蛋白质分析。而2-巯基乙醇也常常被用于保护蛋白质中自由的半胱氨酸巯基之间不会错误形成二硫键。

作为还原剂，2-巯基乙醇常常可以与二硫苏糖醇（DTT）或三(2-甲酰乙基)膦盐酸盐（TCEP）互换使用。

2-巯基乙醇是少数几种被发现可以延长小鼠寿命的化合物。[3]在微克量级水平上，2-巯基乙醇被观察到对实验鼠的生命具有多种可能的正面效应。 制备早期采用氯乙醇与硫氢化钠反应制得。环氧乙烷与硫化氢按摩尔比1：3.5配合，以强碱性阴离子交换树脂为催化剂，在42℃左右反应。所得粗品含量约52%，还含少量硫二甘醇（沸点282℃），较易分离获得2-巯基乙醇。2-巯基乙醇可以通过环氧乙烷和硫化氢反应来生成。 危害毒性分级：高毒

急性毒性：口服-大鼠 LD50: 244 毫克/公斤；口服-小鼠 LD50: 190 毫克/公斤

刺激：皮肤-兔子，10毫克/24小时，重度；眼睛-兔子，2毫克，重度

健康危害： 吸入 、摄入或经皮肤吸收后会中毒。中毒表现有紫绀、呕吐、震颤、头痛、惊厥、昏迷，甚至死亡。对眼、皮肤有强烈刺激性。可引起角膜混浊。

环境危害： 对环境有危害，对水体可造成污染。

燃爆危险： 本品可燃，有毒。

危险特性： 遇高热、明火或与氧化剂接触, 有引起燃烧的危险。受高热分解放出有毒的气体。 操作处置与储存安全操作的注意事项：避免接触皮肤和眼睛。 避免吸入蒸气或雾滴。切勿靠近火源。严禁烟火。采取措施防止静电积聚。

安全储存条件： 使容器保持密闭，储存在阴凉、干燥通风处。打开了的容器必须仔细重新封口并保持竖放位置以防止泄漏。建议贮存温度 2- 8 oC。 其他2-巯基乙醇可以与醛或酮反应，生成相应的氧硫杂环化合物，这使得2-巯基乙醇可以作为羰基的保护基。

常用还原剂，有抗氧化作用，进口分装。DTT和巯基乙醇相比，作用相似，但DTT的刺激性气味要小很多，毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时，两者效果相近。但DTT价格略高一些。产品来源：上海浩然生物技术有限公司

1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液

【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。

【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。

含二硫键蛋白加1-2mMDTT。

DTT是一种硫醇还原剂，当其浓度达到50mM时可促进大多数蛋白的半胱氨酸残基被还原。一般1-2mM起到保护蛋白－SH的作用，10mM以上就可以破坏已经形成的二硫键。

还原剂可以使蛋白质的二硫键打开，比如2-巯基乙醇（beta-ME）、二硫苏糖醇（DTT），二硫键是2个-SH基被氧化而形成的-S-S-形式的硫原子间的键。

功能

二硫键与蛋白质高级结构的生物活性有关，同时与蛋白质的复性也有关联。如核糖核酸酶A经巯基乙醇（还原剂）和尿素（蛋白质变性剂）处理后，发生变性作用，4对二硫键断裂，多肽链伸展开来，高级结构发生变化，失去生物活性。

如果用透析法将大量还原剂和变性剂除去，在微量还原剂存在下，4对二硫键在原来的位置重新形成，伸展开的多肽肽链会自发折叠成天然构象，生物活性得到恢复。此试验也证明蛋白质高级结构的信息存在于一级结构中。

以上内容参考：百度百科-二硫键

而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白.这个技术首先是1967年由shapiro建立,他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小,电荷因素可以忽视.

SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二.三级结构.而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使绊胱氨酸残基间的二硫键断裂.在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的蛋白量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异.

SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统,于连续缓冲系统相比,能够有较高的分辨率.

浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带.当样品液和浓缩胶选TRIS/HCL缓冲液,电级液选TRIS/甘氨酸.电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子.蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中.电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层.