苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在若降解苯酚的微生物.某工厂产生的废水中含有苯酚,为了
(1)选择分解苯酚的菌的培养基是以苯酚为唯一碳源的培养基;苯酚是唯一的碳源,当苯酚消耗尽时,菌株因缺少碳源而不能继续繁殖,所以②中不同浓度的碳源A影响细菌数量;一般采用稀释涂布平板法来测定②中活菌数目.
(2)④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源,⑤培养基的中加入苯酚作为碳源;使用释涂布平板法或平板划线法可以在⑥上获得单菌落.采用固体平板培养细菌时要倒置培养,以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基.
(3)取5支洁净培养瓶→分别加入相同培养基加等量的苯酚,→分别接种5种等量的来自不同菌株的菌种→在相同的适宜条件下培养相同时间→再检测这5支瓶内培养基的苯酚的含量,从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小.
(4)从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作:无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵:a.实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和和消毒;
b.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌;
c.为避免周围环境中微生物污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行;
d.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触.
故答案为:
(1)苯酚 A 平板菌落计数(活菌计数或菌落计数)
(2)④含除苯酚外的其他碳源,⑤以苯酚为唯一碳源 平板分离(稀释涂布平板或平板划线分离) 避免培养过程产生的水分影响微生物的生长
(3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株,一定时间后,测定培养液中苯酚含量
(4)培养基灭菌,接种环境灭菌,接种过程无菌操作
苯酚降解菌活性。菌株随温度升高其对苯酚的降解效率也会逐渐升高,因温度影响菌株降解苯酚酶活性,在 35度以后,,降解效率开始下降,因此影响苯酚降解菌活性。微生物细胞内酶可降低生化反应活化焓从而提高反应速率,而活化能与活化焓大致相等。
(2)培养基中必须添加的微生物的营养物质有5类,分别是水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子,故选AD.
(3)该实验中苯酚作为细菌培养唯一的碳源,步骤③和④中的培养基最主要的成分差异是后者添加了琼脂,培养基需用高压蒸汽灭菌,其具体要求是121℃,1.05kg/cm2,15~30分钟.
(4)利用平板划线法接种时,由图可知,划线顺序应为甲→乙→丙,最终可以得到由一个细胞繁殖而来的单个菌落.
(5)步骤④的目的是分离纯化菌种,经过步骤⑤培养后,应该从残余苯酚浓度最低的培养瓶中再分离、再培养目的菌株.
故答案为:(1)高压灭菌锅、超净工作台、接种环(针)
(2)A、D
(3)碳源 琼脂 121℃,1.05kg/cm2,15~30分钟
(4)甲→乙→丙 单个菌落
(5)分离纯化 最低
生物降解是指由生物催化的复杂化合物的分解过程。而在石油降解中微生物首先通过自身的代谢产生分解酶,裂解重质的烃类和原油,降低石油的粘度。
另外在其生长繁殖过程中,能产生诸如溶剂、酸类、气体、表面活性剂和生物聚合物等有效化合物利于驱油,然后由其他的微生物进一步的氧化分解成为小分子而达到降解的目的。
注意事项:
海洋中最主要的降解细菌属于:无色杆菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、节杆菌属、芽孢杆菌属、黄杆菌属、棒杆菌属、微杆菌属、微球菌属、假单胞菌属以及放线菌属、诺卡氏菌属。在大多海洋环境中,上述这些细菌是主要降解菌。
在真菌中,金色担子菌属、假丝酵母属、红酵母属和掷孢酵母属是最普遍的海洋石油烃降解菌。一些丝状真菌如曲霉属、毛霉属、镰刀霉属和青霉属也应被归入海洋降解菌中。土壤中主要的降解菌除了上面提到的细菌种类外,还包括分枝杆菌属以及大量丝状真菌。曲霉属和青霉属某些种在海洋和土壤两种环境中都有分布。木霉属和被孢霉属某些种是土壤降解菌。
2、配酪素培养基(加琼脂),高压灭菌,倒平板;配LB培养基或发酵培养基,灭菌,分作液体培养基,另外取一些倒斜面。
3、取1的融入土壤的水1mL涂平板,置于恒温箱,于50度或以上培养1~3天,挑选有水解圈(透明圈)的菌落用来划斜面(LB),于50度或以上进行纯化培养。
4、取纯化菌株,于液体LB中扩大培养。
5、离心,取沉淀,盐析,透析,得酶液。
6、以酪蛋白为底物,测酶液酶活,若酶活较大,则该菌株为你要的菌株了。
(2)分析题图可知,I 所示细胞有中心体,无细胞壁和叶绿体,因此I 所示的是动物细胞而不是高植物细胞;若I是一种嗅觉细胞,它只拥有一种类型的气味受体,根本原因是基因的选择表达,转录形成了推断的mRNA导致翻译形成特定的蛋白质.
(3)图1中②是线粒体,⑥是叶绿体,线粒体通过内膜向内凹陷形成脊增大膜面积,叶绿体增大膜面积的方式是由类囊体膜垛叠形成基粒;线粒体分内膜、外膜,叶绿体有内膜、外膜、类囊体膜.
(4)由干细胞形成多个卵细胞的过程,必须经过细胞的有丝分裂和减数分裂过程;若图1中I细胞是胰腺细胞,则结构③内质网所起的主要作用的是:内质网内与核膜相连,外与细胞膜相连起联系整个细胞、将细胞分出许多小空间,并与蛋白质的加工、运输有关.
(5)致癌因子有物理致癌因子,化学致癌因子,生物致癌因子,引起图1中I所示细胞代表的生物产生肿瘤的生物致癌因子是图1中6类生命形态中的Ⅴ病毒.
(6)图2中A是光合作用的光反应阶段,B是有氧呼吸的第三阶段,除了产生图中所示的物质外,同时还能产生ATP.
(7)本实验的目的是筛选降解利用苯酚的细菌菌株,实验所用的培养基应是以苯酚为唯一碳源的培养基,图3,②中的培养基中应加入苯酚作为碳源;③的作用是对菌种进行分离、鉴定、计数或保藏.
(8)若④是对照组,⑤是实验组,由于⑤中培养基中苯酚为唯一碳源微生物在⑤中生长,④培养基中没有加入苯酚做碳源,在④中不生长;分离菌种获得单菌落常用的接种方法是稀释涂布平板法或平板划线法;采用固体平板培养细菌时,培养基冷却后形成的水珠滴落在培养基上会污染培养基,所以要将培养皿倒置培养.
(9)本实验的目的是比较不同菌株降解苯酚能力的大小,因此实验的自变量是不同的菌株,苯酚的起始浓度是无关变量,因此实验的思路是:同样浓度的苯酚培养液培养不同菌株,一定时间后测定培养液中苯酚的含量.
(10)蓝细菌属于原核生物,显著的特点是没有成型的细胞核;由于蓝细菌是自养生物,因此,图4中①过程培养基的成分包括水、无机盐;此外还需要的条件适宜温度和
光照等.
(11)本实验的实验目的是用某种细菌限制蓝细菌的数量,根据实验目的设计实验步骤,图4中⑤实验组在每个培养皿中做三个重复实验,可采取的做法是在每个培养皿中选择三个不同的位置,各滴加等量的菌液;在每个培养皿中选择三个不同的位置,各滴加等量的不含溶藻细菌的溶藻细菌培养液.
(12)发现培养皿中出现褪色空斑,说明.
故答案应为:
(1)核酸
(2)有中心体,无细胞壁和叶绿体 基因的选择表达
(3)增加膜面积的方式、膜的种类
(4)有丝分裂和减数 将细胞分出许多小空间,并与蛋白质的加工、运输有关
(5)Ⅴ病毒
(6)ATP
(7)苯酚 分离、鉴定(计数、保藏)
(8)④培养基中没有加入苯酚做碳源,⑤培养基中苯酚为唯一碳源 稀释涂布平板法或平板划线法 防止培养基冷却后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基
(9)同样浓度的苯酚培养液培养不同菌株,一定时间后测定培养液中苯酚的含量
(10)没有成型的细胞核 水、无机盐 光照
(11)在每个培养皿中选择三个不同的位置,各滴加等量的菌液;在每个培养皿中选择三个不同的位置,各滴加等量的不含溶藻细菌的溶藻细菌培养液
(12)蓝细菌被溶藻细菌裂解
结合国标GB8978-1996的实施,有关工作人员将每升1000毫克以上的含酚废水进行回收处理;每升1000毫克以下的含酚废水浓缩后回收处理;每升300毫克以下的含酚废水才允许采用某种方法清除废水中苯酚,处理达标后排放。清除工业废水中苯酚的方法主要分为三大类:物理处理方法、高级氧化处理技术、生物治理方法。常用的物理处理方法包括吸附法、溶剂萃取法、膜萃取技术和膜蒸馏技术等;常用的高级氧化处理技术包括湿式催化氧化技术、光催化氧化技术和电催化氧化技术等;常用的生物治理方法包括活性污泥法、酶处理技术和固定化微生物技术等[7]。其中利用微生物降解苯酚不仅处理效率高、二次污染少,而且成本低廉、简单方便,因此生物降解法成为经济效益和环境效益俱佳的苯酚清除方法
你要先确定你要降解的农药的种类。
一般的方法是:
1、确认农药的作用机理及其分子式。
2、选择培养基:选择多种培养基,适用于细菌的、酵母的、霉菌的等等,其中加入一定量的农药,一般浓度为30~300ppm。或者直接以农药作为营养物质之一配制无机培养基。
3、土壤取样:从农药使用较频繁的区域土壤或活性污泥中取样。
4、培养:将样品接种到上述培养基中,持续培养。并在一定周期后继续传代培养并富集。而且最好是在传代过程中,逐渐增加农药的浓度。
5、纯化:将传了数代的菌种,划线接种到对应的含农药的平板培养基上。然后挑取单菌落,接到上述液体培养基中进行富集,保藏。
6、降解效能验证
7、培养基优化和培养条件优化