C18 高效液相色谱柱 能测甲酸 乙酸吗

醋，味酸性温，不但是一种传统的调味品，还有广谱的医疗保健功能。食醋中含有大量的有机酸，其中含量较高的是醋酸和乳酸，它们是主要的功效成分和标志性成分。关于有机酸的测定方法，目前，大都采用液相色谱法，相关的国家标准是GB/T5009,157《食品中有机酸的测定》，其适用范围为果蔬及其制品、饮料等食品。我们在测定食醋中的醋酸和乳酸时，采用上述文献报道的方法，结果均不适用；又未见食醋中有机酸测定方法的相关国家或行业标准。本文介绍一种食醋和醋粉中醋酸、乳酸的高效液相色谱测定方法。该方法样品预处理简便有效，测定结果准确，可作为食醋及醋粉质量控制的分析方法。

分析仪器

食醋中醋酸和乳酸含量的检测-液相色谱法

APSH-6510四元高压液相色谱仪

仪器简介

APSH-6510四元高压液相色谱仪，黑科技惊艳首发，真正实现色谱分析自动化，德国品质 整机质保2年。含二元高压优势，弥足四元低压不足。四个高压流动相通道，精准、温度控制，全自动操作，更高效；

2 >应用领域 化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析

色谱条件：

色谱柱

APS-C18（4.6mm×150mm，5um）

流动相

2.5%磷酸二氢铵用磷酸调节pH2.65

流速

1.0mL/min

进样量

5μL

检测波长

210nm

检查结果

食醋中醋酸和乳酸含量的检测-液相色谱法

作用：保证目标物处于非解离态，从而提高其保留能力，改善分离。

色谱柱为Zirchrom C8柱（20cm×4.6mm，5um）；流动相为乙腈-甲醇-水（含0.5%三乙胺，磷酸调pH3.0）（28：18：54）；以黄芩苷对照品配成浓度范围为10.3～144.2ug/ml的对照品溶液。

进样，测得黄芩苷峰面积，以峰面积和对照品浓度求得回归方程为：A=1.168×105c-1.574×103，r=0.9998.精密称取黄芩颗粒0.1255g，置于50ml量瓶中，用70%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，精密量取1ml于10ml量瓶中，30%甲醇定容到刻度，摇匀即得供试品溶液。

药理作用

抗炎抗变态反应 黄芩甙、黄芩甙对豚鼠离体气管过敏性收缩及整体动物过敏性气喘，均有缓解作用，并与麻黄碱表现协同。

甙元的磷酸盐较硫酸钠盐作用强，黄芩甙元能抑制离体气管及回肠之Schul-tz-Dale反应，对豚鼠被动性皮肤过敏反应、组织胺皮肤反应亦表现抑制，在抗变态反应方面，甙元较甙作用强。黄芩此种抗变态反应，是由于伤害了肥大细胞的酶激活系统，抑制了过敏性介体的释放，因而不产生过敏反应，此外它对平滑肌本身，也有直接的松弛作用。

以上内容参考：百度百科-黄芩提取物

电源准备

打开稳压器电源开关，须待电压指示至

220V

后，才能开启其他有关设备。

2．LC-600高效液相色谱仪的准备

试剂：三氟乙酸

乙腈

超纯水（Millipore

超纯水）

冰乙酸

溶液配置：贮液瓶与流动相的准备

A

液

0.1%三氟乙酸

（三氟乙酸

1ml，超纯水

999ml）室温保存

B

液

60%乙腈

（乙腈

600ml，

超纯水

400ml）室温保存

样品液

0.01%乙酸

（冰乙酸

10

l

超纯水

100ml）室温保存

泵头冲洗液：精滤后超纯水或者是

1%色谱纯甲醇

室温保存

注：贮液瓶应用超纯水淌洗干净，备用。

流动相溶剂用洁净

G4

玻沙漏斗精滤除去微小颗粒（目前未滤过溶液）。

操作者必须清楚并注明

A、B

贮液瓶盛装为何种溶剂。

冲

洗

泵

头

：

用

注

射

管

于

软

塑

料

管

末端

抽

吸

至

有

水

流

出

，

调

节

流

速

开

关

控

制

流

速

为20-30drop/min.（

①

流动相管道排气

如果，管道中气泡较多，可通过弹击管道，排除气泡，并逆时针旋转脱气泵活塞使其松动，用注射管于流动相出口的塑料管末端抽吸至管道内气泡排除完全。操作时，我们通常已经打开了脱气机（气泡严重影响分离效果，所以观察管道中液体是否有气泡非常重要。）

②

开机

③

进入LC-600高效液相色谱仪操作系统

④

数据记录的终止与保存

3．

关机

1）N2000色谱工作站的关闭

在

N2000的主操作界面上分别单击关闭泵、检测器图标，或通过菜单关闭。关闭电脑主机及显示器。将所有使用仪器用布盖好。关闭排气扇、空调与稳压器开关。

2）

清洁卫生

实验完毕后，打扫仪器室桌面与地面清洁，保持桌面整洁。

3）

仪器使用记录

记录当天的仪器使用情况于指定记录本上，包括仪器使用起止时间与出现问题的解决方案，并签上操作者的名字.以上为－－-液相色谱仪的使用方法

超纯水冲洗柱——流动相分离样品——超纯水冲洗柱 ——纯乙睛保存柱

1． 电源准备

打开稳压器电源开关，须待电压指示至 220V 后，才能开启其他有关设备。

2． HP1100 高效液相色谱仪的准备

试剂：三氟乙酸

乙腈(Fisher 公司产品色谱纯)

超纯水(Millipore 超纯水)

冰乙酸

溶液配置：贮液瓶与流动相的准备

A 液 0.1%三氟乙酸 （三氟乙酸 1ml，超纯水 999ml）室温保存

B 液 60%乙腈 （乙腈 600ml， 超纯水 400ml）室温保存

样品液 0.01%乙酸 （冰乙酸0.01ml，超纯水 100ml）室温保存

泵头冲洗液：精滤后超纯水或者是 1%色谱纯甲醇 室温保存

注：贮液瓶应用超纯水清洗干净，备用。

流动相溶剂用洁净硼砂漏斗精滤除去微小颗粒。

操作者必须清楚并注明 A、B 贮液瓶盛装为何种溶剂。

冲 洗 泵 头 ： 用 注 射 管 于 软 塑 料 管 末 端 抽 吸 至 有 水 流 出 ， 调 节 流 速 开 关 控 制 流 速 为20-30drop/min.。

① 流动相管道排气

如果管道中气泡较多，可通过弹击管道，排除气泡，并逆时针旋转脱气泵活塞使其松动，用注射管于流动相出口的塑料管末端抽吸至管道内气泡排除完全。操作时，我们通常已经打开了脱气机（气泡严重影响分离效果，所以观察管道中液体是否有气泡非常重要。）

② 开机

③ 进入 HP1100 操作系统

a.双击 WIN-95 操作界面中左下角 Instrument 1 online 图标，进入 HP1100 工作站软件操作界面。单击工作站操作界面上方 Run control 菜单，在下拉菜单中找到 Sample Info 子菜单，单击。在 Sample Info 信息框内定义操作者、样品前缀及编号、保存路径等参数。在保存路径项下，将可定义子目录分别输入操作者拼音缩写，以方便检索时互不干扰。

b.等待工作站操作界面中泵、柱温箱、检测器各指示图标由灰色转变为绿色后，单击泵、检测器各图标可从其各自弹出的菜单中设定流动相各溶剂比例、流速等。

（1）

在用高效液相色谱进行药物分析方法开发的过程中，色谱柱及流动相的种类，添加剂的引入，流动相的pH值调节，温度的控制等等都会对分离选择性产生影响。

而其中，色谱柱及流动相的选择往往起着决定性的作用，对于流动相pH的控制，不仅会对色谱柱的稳定性产品影响，并且会对分离的选择性和色谱峰的对称性产生至关重要的作用，尤其是针对某些可以离子化的极性酸碱化合物来说。

一般来说pH对于中性化合物几乎没有什么影响。这是因为一般情况下中性化合物不具备解离能力，因而不会对谱图的分离选择性及峰形的对称性产生影响。

对于含有极性官能团的化合物来说，pH会影响化合物的存在状态。进而影响分离选择性及色谱峰的对称性。除此之外，一些做了改性或者Mixed-Mode类型的色谱柱，即便分析物中不含有可电离的物质，但是pH值会影响色谱柱上的官能团状态，进而也会影响到中性化合物的分析