醋酸铵和血是否溶血，原因

用乙酸铵作流动相离子抑制色谱，可做抑制剂，可以防止被分离物质峰异常影响定量。

乙酸铵，结构简式CH3COONH4，又称醋酸铵。白色三角晶体，分析试剂、肉类防腐剂。

用作分析试剂、肉类防腐剂，也用作制药等。还可以作为缓冲剂和提供乙酸根配体。

使用工业品乙酸铵应控制其中氯化物和重金属的含量。用以配制缓冲液,测定铝和铁。从其他硫酸盐分离硫酸铅。用于肉类防腐、电镀、水处理、制药等. 用作分析试剂、色层分析试剂和缓冲剂。

醋酸铵在水中就会完全电离出铵根离子和醋酸根离子。

当然就是强电解质啦！

参考下这个吧，虽然不一定有用，推荐你一本书，《高效液相色谱法的建立》是译著，很有用。

反相色谱中如何选择缓冲液

化合物的划分

HPLC分离的样品从其在分离体系内（或者说是流动相下）的状态来划分，可以分为中性样品和离子型样品。所谓中性样品就是在分离条件下不能解离的化合物，而离子型化合物则能够解离出离子。换句话说，离子型样品是指酸碱盐类的化合物，而中性化合物是除此之外的化合物。

有盐流动相好在那里

反相色谱（RPC）分离样品主要基于待分离化合物的极性实现分离的。在其他条件相类似的情况（分子量、空间结构）下极性强的物质保留值小。对于中性样品来说其极性取决于化合物本身，但是对于离子型化合物可以通过调整其是否解离或者解离程度来调整其极性，最终达到调整其保留值、分离度和拄效（一般保留值提前会带来拄效的提高）。

在分离含有少数化合物待检样品的情况下，使用无盐流动相是一般是可行的（可以不考虑其是否全部或者部分未中性化合物）。因为分离的化合物少，可能分离度方面的要求相对不是很重要，而保留值的调整还可以采用调整流动相的洗脱能力、流速等条件得以实现。。此时需要尝试采用有盐流动相，也就是要用到缓冲液。但是对于分离多组分的样品采用无盐流动相往往就会遇到麻烦当然如果样品中的化合物全部都是中性化合物采用有盐流动相也是很难奏效的，可是这样的时候毕竟比较少。所以，在分离多组分待检样品时如果无盐缓冲液效果不好，要首先考虑有盐流动相。

缓冲液

缓冲液是能够提供共轭酸碱对，在一定条件下稳定pH值的一种溶液。使用缓冲液就可以控制分离过程中的p H，进而控制化合物的解离程度，达到调整化合物极性的目的。

缓冲液控制pH的能力就是缓冲液的缓冲容量。其大小由三方面因素决定，分别是：所要控制的pH、缓冲盐的pKa和缓冲盐的浓度。这里就涉及你要控制的pH和选用的缓冲盐的关系，好在这方面的数据一般的色谱书中都会有提及，查一查就可以解决问题。关于缓冲盐浓度认为采用30mM是比较好的，这是一个通常的参数，一般来讲进样量越少、分子量越大、酸碱官能团越少选用的盐浓度可以越小。缓冲盐浓度越小对仪器和色谱拄越好。

缓冲液的选择

对于已知化合物来说这个比较容易。如果是一个碱性化合物，在无盐流动相下保留时间过长，那么可以采用控制流动相为低pH条件，使其达到完全解离，增加其极性，达到缩短分离时间的目的。如果分离的化合物pKa比较低（酸性化合物），在无盐流动相下保留时间比较长，可以采用控制流动相为高一些的pH条件，道理相同。对于保留时间过短的采用相反的调整方式即可，不赘述。

对于分离多个组分而且未知化合物组成的样品就显得比较麻烦了。缺少相关分离样品的资料只能从实验入手了。也就是说尝试各种pH值的流动相（期间最好有机相的比例固定），一般来说从低pH试起是一个比较好的选择，因为我做过的化合物多是碱性化合物（这点仅当参考），再有常用ODS柱子适用pH范围相对第一些。

另外，在调试分离最佳的pH条件的时候，可以采用一种盐——枸橼酸盐，其有点是在Ph2.1～6.4之间等体积混合相同浓度不同pH的缓冲液，混合后的pH值几乎是两者的平均值。声明这一点我没有试验过，从书上看来的。如果这样，在有双通道仪器上调整流动相的pH值将会非常方便。确定好了pH值，然后在换成常用的缓冲盐就OK了。

上面说的是pH范围的选择。在确定了分离最适合的pH之后，就是确定用那种缓冲盐了。一般从两个方面考虑，一是溶解度，要求在所用的有机相比例下易溶解，否则容易造成系统内缓冲盐析出；二是要考虑截至波长的问题。磷酸盐是比较常用的，可以有两个缓冲范围2.0~3.0和6.2～8.2，截至波长小于200nm。注意：缓冲盐中的杂质可能严重影响其截至波长。碳酸盐也不错，但是在低pH会有CO2放出，可能导致缓冲效果降低。

缓冲液的制备

流动相的pH就指的是流动相中缓冲液的pH值。不要把有机相混入缓冲液之后再调其pH。

流动相或者缓冲液过滤的问题。有人倾向于先过滤缓冲液然后混合有机相使用。也有的是有机相与缓冲液混合之后统一过滤。虽然各有缺点，但我认为第二种做法更好些。因为毕竟这样做最仪器和柱子更为保险些，虽然有可能在抽了过程中有可能引起部分溶剂挥发，但我认为可以忽略之。

缓冲液不易长时间防止，尤其是夏天，会生细菌。2天内使用比较合适。

系统冲洗

用缓冲液的系统用过后一定、务必要冲洗。用过渡流动相是一种好办法。过渡流动相就是分析用流动相中去掉无机盐。但是有机相比例较少的最好不要用过渡流动相冲洗。

结束语

采用有盐流动相是反相色谱普中常用的方法，尤其适合分离离子型化合物。只是也有其缺点就是仪器维护上稍微费事点。这种方法不能解决分离中的所有问题，有些复杂样品必须借助于梯度洗脱或者离子对色谱。

DNA的沉淀：

采用无水乙醇沉淀DNA是实验室的常用方法。

在DNA溶液中，DNA分子与水分子呈水合状态，当加入乙醇后，乙醇可以夺去DNA分子周围的水，从而使得DNA分子失水而易于聚合。 乙醇的优点是可以任意比和水融合，而且不会和DNA发生化学反应，DNA分子在乙醇中能够稳定保存，因此可以作为沉淀DNA的良好试剂。

一般用2倍体积的无水乙醇沉淀DNA,使乙醇最终含量为67%左右（关键）。当沉淀RNA时一般用2.5倍的体积。因此也可以用95%的乙醇等代替，但是此时终体积将会较大，且DNA在溶液中会有一定的损耗。因此当多次沉淀时，做好采取折中的方法，即初次用95%的乙醇沉淀后，之后采用无水乙醇代替。

另外也可以用0.6倍体积的异丙醇（IPA）沉淀。与乙醇相比，异丙醇比较疏水，极性较弱，因此盐离子会与DNA分子共沉淀，不利于去盐，但却因此可以去除蛋白质、糖等杂质（高浓度的盐可以使糖存在于溶液中从而去除）。而乙醇可以有效去除盐离子。另外，乙醇易挥发，所以通常会先用异丙醇沉淀，再用乙醇多次洗去盐。

沉淀时间一般是15-30分钟即可。

沉淀过程中一般会加入醋酸钠或氯化钠，因为在pH为8时，DNA分子带负电荷，盐释放的正电荷可以与其反应，从而促进其聚合沉淀。当然盐离子浓度也不可太高，否会影响后续反应，如酶切等，故得多次脱盐。

加入醋酸铵，增大了溶液中醋酸根离子的浓度，会抑制醋酸的电离，使得氢离子浓度下降。

电离平衡：具有极性共价键的弱电解质（例如部分弱酸、弱碱。水也是弱电解质）溶于水时，其分子可以微弱电离出离子；同时，溶液中的相应离子也可以结合成分子。一般地，自上述反应开始起，弱电解质分子电离出离子的速率不断降低，而离子重新结合成弱电解质分子的速率不断升高，当两者的反应速率相等时，溶液便达到了电离平衡。此时，溶液中电解质分子的浓度与离子的浓度分别处于相对稳定状态，达到动态平衡。

形成条件：

溶液中电解质电离成离子和离子重新结合成分子的平衡状态。

具体一点说，在一定的条件下（如温度，浓度），当溶液中的电解质分子电离成离子的速率与离子重新结合成分子的速率相等时，电离的过程就达到了平衡状态,即电离平衡。

一般来说，强电解质不存在电离平衡而弱电解质存在电离平衡。

影响电离平衡的因素：

1．温度：电离过程是吸热过程，温度升高,平衡向电离方向移动。

2．浓度：弱电解质分子浓度越大，电离程度越小。

3．同离子效应：在弱电解质溶液中加入含有与该弱电解质具有相同离子的强电解质,从而使弱电解质的电离平衡朝着生成弱电解质分子的方向移动，弱电解质的解离度降低的效应称为同离子效应。

4．化学反应：某一物质将电离出的离子反应掉而使电离平衡向正方向（电离方向）移动。

5．弱酸的电离常数越大，达到电离平衡时电离出的H+越多，酸性越强；反之，酸性越弱。多元弱酸的电离是分步进行的，每一步电离都有各自的电离常数，且各级电离常数逐级减小，一般相差较大，所以其水溶液中的H+主要是由第一步电离产生的。

6．对弱碱来说，也有类似弱酸的规律。

7．分步电离中，越后面电离出的离子数越少。

氢氧化钠20克/L；碳酸钠20克/L；磷酸钠70克/L；氯化钠2克/L；工作电压：8－15V；2.电源极性正接

二、活化液：

硫酸（H2SO4）80克/L；硫酸铵100克/L

先称量硫酸铵放入1000ml烧杯中，加蒸馏水500ml搅拌溶解，慢慢加硫酸后，加海洋污染至1000ml；1.工作电压：8－15V；2.电源极性正或反。

三、碱性铜液：

硫酸铜250g/L；乙二胺250g/L；氨三乙酸150g/L；硝酸铵50g/L；硫酸钠20g/L

1、配后为蓝色，PH值6－8，金属离子含量68/C；2.工作电压8－14V；3.电源的极性，正接；4.适合难镀材料的刷镀。

四、高速酸铜液：

硫酸铜40g/L；硝酸铜430g/L

1.深蓝色，PH值91.5-2.5；2.金属离子含量123g/C；3.工作电压：10－15；电源极性：正接注：加入硫脲0.2g/：L可提高亮平整度。

五、特殊镍液：硫酸镍400g/L；氯化镍20g/L；盐酸20g/L；乙酸68g/L

配后为深绿色，PH值12；工作电压：10－18V源术性：反接；先用18V电压冲击一遍被镀表面，然后再降至12V

六、快速镍：

硫酸镍200g/L；氨沙沙（25%）100ml/L；柠檬酸铵23g/L；乙酸铵23g/L；草酸铵0.1g/L

配后为蓝绿色，PH值7－8；金属含量52g/C；工作电压：8－14V；电源极性：正接。

七、光亮镍液：

氯化亚锡10g/L；盐酸40ml/L；温度：室温；时间：3－5分钟

八、敏化液：

氯化亚锡10g/L；盐酸40ml/L；温度：室温；时间：3－5分钟

注：（1）配制溶液用去离子水；（2）药品必须是试剂型：（3）氯化亚锡必须先溶于盐酸；（4）旧液可少量加入锡粒；（5）当旧液中有白色沉淀产生时可加入盐酸，若仍不能使溶液澄清。则应进行过滤。

九、活化液：（一）

硝酸银3g/L（为催化剂）；氨水（25%）8g/L；温度：室温；时间：3－5分钟

注：1.要用去离子水配制；2.清洗用去离子水；3.配液先将硝酸银于沙沙后，在搅拌下缓缓加入氨水，当溶液由浑浊变清时停止添加氨沙沙；4.用时不要将敏化液带入5.避光保存；6.溶液变成黑褐色说明药液失效。

活化液：（二）

氯化钯3g/L（为催化剂）盐酸10ml/L：水蒸馏

十、化学镀铜液：

硫酸铜4.9g/L；酒石酸钾纳34g/L；甲醛（37%）13g/L；氢氧化钠6.8g/L；碳酸钠3.2g/L；氯化镍1g/L；PH值：12；温度：15－25度

溶液配制：

（1）将硫酸铜、酒石酸钾钠、氢氧化钠、碳酸钠、氧化镍，分别用适量的去离子水溶解；

（2）将硫酸铜溶液与酒石酸甲钠溶液相混合；

（3）加入氢氧化钠、碳酸钠溶液；

（4）加入氯化钠镍溶液；

（5）用去离子水规定体积；

（6）加入甲醛后即可使用。

注：1.防止污染药液；

2.定期更换药液，及时清除药液中的铜颗粒及其它金属；

3.溶液不用时用稀硫酸将溶液PH值降至9－10存放，使用前再用氢氧化钠溶液调到正常PH值

4.补加药品时应配成稀溶液在搅拌下加入；

5.对多次使用的溶液定期更换分旧液。

十一、化学镍配方：

硫酸镍20g/L；次磷酸钠30g/L；柠檬酸钠10g/L；氯化钠30g/L；氨水－调整PH值至要求；PH值：8.5－9.5；温度：30度

十二、泡铜水配方：

1.古铜色：硫酸铜30g/L；氯化铵20g/L；氯化化钠20g/L；氯化锌1g/L；醋酸(36%)3－ml/L；室温。基材：铜

2.金黄色：硫化钾0.8g/L；硫化铵1g/L；硫化钡0.3g/L；硫化钠4g/L；高锰酸钾0.13g/L；双氧水（30%）0.7g/；定时补充双氧水；室温；基材：铜。

3.金黄色：硫酸钡0.25g/L；硫化钠0.6g/L；硫化钾0.75g/L；室温。基材：铜

4.蓝色：硫酸铜130g/L；氯化铵13g/L；氨水（28%）30ml/L；醋酸（36%）10ml/L；室温。基材：铜

5.蓝色：氢氧化钠25g/L；碳酸铜50g/L；温度：60－75度。基材：合金铜

6.褐色：硫化钡9g/L：碳酸铵2g/L；室温。基材：铜

7.褐色：硫化铵0.5g/L；氧化铁12g/；室温。基材：合金铜。涂布后放置

8.红色：硫酸铜25g/L；氯化钠200g/L；温度：500度。时间：5－10分钟。基材：铜

9.古绿色：氯化铵350g/L；醋酸铜200g/L；室温。基材：合金铜关键词:金属 配方 非金属

对于极性偏低的小分子，APCI 电离效果可能会好一些，但这个更取决于化合物自身的结构。

如果用ESI，下列措施可以帮助提高离子化效率，

1、用较细开口的喷雾针，产生更多更小的液滴，提高离子/分子转化比。

2、在正离子模式下，加甲酸的效果可能要好于醋酸和三氟乙酸。酸根负离子会与样品正离子结合降低离子化效率，三氟乙酸尤甚。

3、慎重选择添加剂。实验表明，商品化的LC-MS级醋酸铵、甲酸铵含有表面活性剂，抑制电离。实验中若需要，可以用氨水加酸调节而成。

4、一定要仔仔细细地调整仪器参数。

常见问题分析：

1、低流速会不会提高离子/分子转化比：要看喷雾针开口直径和样品线速度之比，这个依赖理论和经验值。对于指定的分析物和流动相，离子/分子转化比主要取决于电喷雾初始液滴的大小，这也是纳喷雾，微喷雾质谱响应度高于常规电喷雾的原因，在含高比率水相情况下，纳、微喷雾的优势更为明显。另一方面，在细径柱上分离样品，具有浓缩效应，有利于提高ESI响应值，提高对弱离子化样品的检测能力。

2、在常规分析中，正离子模式时加点酸，负离子模式加点碱。但也有例外，以最常用的+ESI-MS为例。在电喷雾过程中，伴随着电化学反应（Oxidation），产生高浓度的H+，样品即使溶解在中性甚至碱性溶液中，也能够被质子化继而被检测。流动相中加酸，很多时候是色谱分离需要。流动相添加剂（mM），如常用的醋酸、醋酸铵，三乙胺，三氟乙酸，一般对样品具有离子化抑制作用。在LC-MS分析中，色谱分离是关键一步，如果能找到合适的柱子，能够用很温和的条件分离你的样品，实验已经成功了一半。

3、正离子怕三乙酸 负离子怕三氟乙酸、七氟丁酸

4、一般酸性化合物流动相中加盐：如甲酸铵、乙酸铵，或碱（氨水）来增强化合物的离子化，一般采用负离子检测模式。

5、碱性化合物流动相中一般加酸：甲酸或乙酸，以增强化合物的离子化，一般用正离子方式检测。