蛋白质的沉淀反应，乙醇引起的变性与沉淀为什么加盐酸

首先，只有高浓度乙醇长时间作用才会使蛋白质变性，低浓度的乙醇会使蛋白质的亲水结构（氢键）破坏而沉淀析出，类似于盐析。其次，变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了，应为变性即意味着结构的永久改变。你的试验中乙醇的最终浓度是95%*1ml/3ml=32%，而且最后蛋白会再溶解。因此，这个实验不足以证明蛋白质变性。

后来继续加盐酸是为了使pH值偏离等电点，增大蛋白质的溶解度，进而使蛋白质再溶解。

蛋白质的空间结构发生变化，从而引起蛋白质理化性质和生物功能改变。

乙醇在医学方面可做为一种消毒剂，乙醇作用于细菌细胞首先起到脱水作用，乙醇分子进入到蛋白质分子的肽链环节，使蛋白质发生变性沉淀；这种作用在70%的含量下显得更强。乙醇可导致蛋白质分子间易形成氢键。

变性原因：

变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响，改变其分子内部结构和性质的作用。一般认为蛋白质的二级结构和三级结构有了改变或遭到破坏，都是变性的结果。能使蛋白质变性的化学方法有加强酸、强碱、重金属盐、尿素、丙酮等；能使蛋白质变性的物理方法有加热(高温)、紫外线及X射线照射、超声波、剧烈振荡或搅拌等。

以上内容参考：百度百科-蛋白质变性

其次，乙醇使得蛋白质的二级、三级、四级结构变化，但是不改变蛋白质的一级结构，也就是说，蛋白质还是原来的两性物质（既有酸性又有碱性，所以能够溶于酸和碱）。

好了

1号管有乙醇，还有缓冲液（缓冲液就是由酸碱组成的），1号管沉淀了，你要说明这是因为乙醇而不是缓冲液啊。

所以你需要二号三号管来证明，酸和碱都没有使蛋白质沉淀（因为变性的蛋白质被酸碱溶解了），而且中和之后就发现沉淀出现了，说明沉淀是因为乙醇而不是酸碱。

至于甲基红，是为了指示酸碱度，你不是要中和嘛，没有指示剂你怎么滴定？

取3支试管，编号。依顺序加入试剂：

试管一：5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、pH4.7缓冲溶液各1mL

试管二：5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、0.1mol/L的NaOH溶液各1mL

试管三：5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、0.1mol/L的HCl溶液各1mL

振摇混匀后，观察各管有何变化。放置片刻，向各管内加水8毫

升，然后在第2、3号管中各加一滴甲基红．再分别用0.1当量／升醋酸溶液及0.1当星／升碳酸钠溶液中和之。观察各管颜色的变化和沉淀的生成。每管再加0.1当量／升盐酸溶液数滴，观察沉淀的再溶解。解释各管发生的全部现象。

首先，只有高浓度乙醇长时间作用才会使蛋白质变性，低浓度的乙醇会使蛋白质的亲水结构（氢键）破坏而沉淀析出，类似于盐析。其次，变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了，应为变性即意味着结构的永久改变。你的试验中乙醇的最终浓度是95%*1ml/3ml=32%，而且最后蛋白会再溶解。因此，这个实验不足以证明蛋白质变性。

后来继续加盐酸是为了使pH值偏离等电点，增大蛋白质的溶解度，进而使蛋白质再溶解。

蛋白质含量，离子强度，溶液pH值，乙醇浓度，溶液温度。

1。蛋白质含量，愈高，共沉多；反之，分离愈彻底。当然有度。溶液太稀了，成本高。

2。离子强度：这与介电强度有关。

3。溶液pH值：调到目标蛋白等电点周围。

4。乙醇浓度：一般来说乙醇浓度多少，与目标蛋白的分子量有关：比如8%，可沉淀纤维蛋白原，20%可沉淀球蛋白，40%可沉淀白蛋白等等，当然，乙醇浓度与溶液pH值配合使用。加入乙醇不能过快，防止局部过浓。要边加边摇动。 否则，共沉多！或者局部变性。

5。溶液温度：必须低温，乙醇反应是个放热反应，如果温度高，可引起蛋白质变性，不可逆的变形。

这五变参数，要综合，动态的调整，可达到精确分离蛋白质的作用。