苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在若降解苯酚的微生物．某工厂产生的废水中含有苯酚，为了
（1）选择分解苯酚的菌的培养基是以苯酚为唯一碳源的培养基；苯酚是唯一的碳源，当苯酚消耗尽时，菌株因缺少碳源而不能继续繁殖，所以②中不同浓度的碳源A影响细菌数量；一般采用稀释涂布平板法来测定②中活菌数目．
（2）④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤培养基的中加入苯酚作为碳源；使用释涂布平板法或平板划线法可以在⑥上获得单菌落．采用固体平板培养细菌时要倒置培养，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基．
（3）取5支洁净培养瓶→分别加入相同培养基加等量的苯酚，→分别接种5种等量的来自不同菌株的菌种→在相同的适宜条件下培养相同时间→再检测这5支瓶内培养基的苯酚的含量，从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小．
（4）从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵：a．实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和和消毒；
b．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；
c．为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
d．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．
故答案为：
（1）苯酚 A 平板菌落计数（活菌计数或菌落计数）
（2）④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚为唯一碳源 平板分离（稀释涂布平板或平板划线分离） 避免培养过程产生的水分影响微生物的生长
（3）用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量
（4）培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作
农药有很多种，其机理也是大相径庭的，所以没有一个菌种可以降解所有的农药。
你要先确定你要降解的农药的种类。
一般的方法是：
1、确认农药的作用机理及其分子式。
2、选择培养基：选择多种培养基，适用于细菌的、酵母的、霉菌的等等，其中加入一定量的农药，一般浓度为30~300ppm。或者直接以农药作为营养物质之一配制无机培养基。
3、土壤取样：从农药使用较频繁的区域土壤或活性污泥中取样。
4、培养：将样品接种到上述培养基中，持续培养。并在一定周期后继续传代培养并富集。而且最好是在传代过程中，逐渐增加农药的浓度。
5、纯化：将传了数代的菌种，划线接种到对应的含农药的平板培养基上。然后挑取单菌落，接到上述液体培养基中进行富集，保藏。
6、降解效能验证
7、培养基优化和培养条件优化
A.图②培养目菌株选择培养基应加入苯酚作碳源
B.要测定②细菌数量采用稀释涂布平板
C.若图④照实验则其应苯酚作唯碳源
D.使用平板划线⑥获单菌落
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答案
C
解析
试题析： 培养能降解苯酚微物培养基应苯酚作唯碳源A确稀释涂布平板用测定细菌数量B确照实验④应用培养基进行照C错误平板划线培养基表面形单菌落D确
考点： 本题考查微物培养相关知识考查考理解所知识要点握知识间内联系能力及图形提取信息能力
生物降解是指由生物催化的复杂化合物的分解过程。而在石油降解中微生物首先通过自身的代谢产生分解酶，裂解重质的烃类和原油，降低石油的粘度。
另外在其生长繁殖过程中，能产生诸如溶剂、酸类、气体、表面活性剂和生物聚合物等有效化合物利于驱油，然后由其他的微生物进一步的氧化分解成为小分子而达到降解的目的。
注意事项：
海洋中最主要的降解细菌属于：无色杆菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、节杆菌属、芽孢杆菌属、黄杆菌属、棒杆菌属、微杆菌属、微球菌属、假单胞菌属以及放线菌属、诺卡氏菌属。在大多海洋环境中，上述这些细菌是主要降解菌。
在真菌中，金色担子菌属、假丝酵母属、红酵母属和掷孢酵母属是最普遍的海洋石油烃降解菌。一些丝状真菌如曲霉属、毛霉属、镰刀霉属和青霉属也应被归入海洋降解菌中。土壤中主要的降解菌除了上面提到的细菌种类外，还包括分枝杆菌属以及大量丝状真菌。曲霉属和青霉属某些种在海洋和土壤两种环境中都有分布。木霉属和被孢霉属某些种是土壤降解菌。
（2）分析题图可知，I 所示细胞有中心体，无细胞壁和叶绿体，因此I 所示的是动物细胞而不是高植物细胞；若I是一种嗅觉细胞，它只拥有一种类型的气味受体，根本原因是基因的选择表达，转录形成了推断的mRNA导致翻译形成特定的蛋白质．
（3）图1中②是线粒体，⑥是叶绿体，线粒体通过内膜向内凹陷形成脊增大膜面积，叶绿体增大膜面积的方式是由类囊体膜垛叠形成基粒；线粒体分内膜、外膜，叶绿体有内膜、外膜、类囊体膜．
（4）由干细胞形成多个卵细胞的过程，必须经过细胞的有丝分裂和减数分裂过程；若图1中I细胞是胰腺细胞，则结构③内质网所起的主要作用的是：内质网内与核膜相连，外与细胞膜相连起联系整个细胞、将细胞分出许多小空间，并与蛋白质的加工、运输有关．
（5）致癌因子有物理致癌因子，化学致癌因子，生物致癌因子，引起图1中I所示细胞代表的生物产生肿瘤的生物致癌因子是图1中6类生命形态中的Ⅴ病毒．
（6）图2中A是光合作用的光反应阶段，B是有氧呼吸的第三阶段，除了产生图中所示的物质外，同时还能产生ATP．
（7）本实验的目的是筛选降解利用苯酚的细菌菌株，实验所用的培养基应是以苯酚为唯一碳源的培养基，图3，②中的培养基中应加入苯酚作为碳源；③的作用是对菌种进行分离、鉴定、计数或保藏．
（8）若④是对照组，⑤是实验组，由于⑤中培养基中苯酚为唯一碳源微生物在⑤中生长，④培养基中没有加入苯酚做碳源，在④中不生长；分离菌种获得单菌落常用的接种方法是稀释涂布平板法或平板划线法；采用固体平板培养细菌时，培养基冷却后形成的水珠滴落在培养基上会污染培养基，所以要将培养皿倒置培养．
（9）本实验的目的是比较不同菌株降解苯酚能力的大小，因此实验的自变量是不同的菌株，苯酚的起始浓度是无关变量，因此实验的思路是：同样浓度的苯酚培养液培养不同菌株，一定时间后测定培养液中苯酚的含量．
（10）蓝细菌属于原核生物，显著的特点是没有成型的细胞核；由于蓝细菌是自养生物，因此，图4中①过程培养基的成分包括水、无机盐；此外还需要的条件适宜温度和
光照等．
（11）本实验的实验目的是用某种细菌限制蓝细菌的数量，根据实验目的设计实验步骤，图4中⑤实验组在每个培养皿中做三个重复实验，可采取的做法是在每个培养皿中选择三个不同的位置，各滴加等量的菌液；在每个培养皿中选择三个不同的位置，各滴加等量的不含溶藻细菌的溶藻细菌培养液．
（12）发现培养皿中出现褪色空斑，说明．
故答案应为：
（1）核酸
（2）有中心体，无细胞壁和叶绿体 基因的选择表达
（3）增加膜面积的方式、膜的种类
（4）有丝分裂和减数 将细胞分出许多小空间，并与蛋白质的加工、运输有关
（5）Ⅴ病毒
（6）ATP
（7）苯酚 分离、鉴定（计数、保藏）
（8）④培养基中没有加入苯酚做碳源，⑤培养基中苯酚为唯一碳源 稀释涂布平板法或平板划线法 防止培养基冷却后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基
（9）同样浓度的苯酚培养液培养不同菌株，一定时间后测定培养液中苯酚的含量
（10）没有成型的细胞核 水、无机盐 光照
（11）在每个培养皿中选择三个不同的位置，各滴加等量的菌液；在每个培养皿中选择三个不同的位置，各滴加等量的不含溶藻细菌的溶藻细菌培养液
（12）蓝细菌被溶藻细菌裂解
将40%左右的氢氧化钾溶液与苯酚加入反应锅中混合，于100℃搅拌0.5h，至酚钾液的游离碱为0.3-1.2%。加热，进行常压脱水，至内温为140℃时改为减压脱水，在10.6kPa压力下蒸水约0.5-1h，直至内温达170℃以上。加入溶剂苯酚共沸脱水，至200℃（2.67kPa）结束脱水，得酚钾与酚的复合盐。将制备的上述复合盐继续加热至220-230℃，通入净化无水的二氧化碳，压力维持在0.5MPa，反应2.5h，降温至200℃补加苯酚，保温搅拌30min，然后减压回收苯酚至尽。再通入二氧化碳进行第二次羧化，约需2h。羧化结束后，回收苯酚，冷却至180℃以下，加水溶解，即得羧化液（对羟基苯甲酸二钾盐）。将硫酸逐渐加入羧化液中，于70℃以下中和至pH为6.7。冷却过滤除去硫酸钾，所得粗品滤饼用水重结晶、活性炭脱色，即得含量99%以上的对羟基苯甲酸。对羟基苯甲酸二钾盐也可由水杨酸二钾盐转位得到。因此工业上也可由水杨酸经成盐、转位、中和得到对羟基苯甲酸，但成本较高。另外，生产糖精时的副产物对甲苯磺酰氯，经氨化、氧化、酸析、碱熔、再酸析也可获得该品。该法收率较低，成本较高，而且糖精副产物中往往夹带有毒的杂质邻磺酰胺基甲苯。
其他方法：天然存在于桔梗科植物半边莲[Lobelia chinensis Lour. (L. radicans Thunb)]全草，杜鹃科植物白花杜鹃[Rhododendron mucronatum G. Don]，小花杜鹃[R. micranthum Turcz.]的叶等植物中。
可由水杨酸钾加热制取，或由对氨基苯酚经重氮化及桑德迈尔反应(Sandmeyer’s reaction)制备。
