pH1.2盐酸缓冲液怎么配置

Tris-HCl缓冲液的配制方法：

Tris：三羟甲基氨基甲烷

三羟甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl)aminomethane，一般简称为Tris）是一种有机化合物，其分子式为(HOCH2)3CNH2。Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。例如，在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到Tris。由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应

Tris为弱碱，在室温（25℃下，它的pKa为8.1；根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。

Tris碱的水溶液pH在10.5左右，一般加入盐酸以调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液。但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。

由于Tris缓冲液为弱碱性溶液，DNA在这样的溶液中会被去质子化，从而提高其溶解性。人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸，则获得“TAE缓冲液”（Tris/Acetate/EDTA），而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”（Tris/Borate/EDTA）。这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。

用途：有机合成中间体。在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的PH值。在凝胶中也起到稳定PH的作用，只不过是Tris-HCl缓冲体系。

Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫（C.

elegans核纤层蛋白lamin）的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外，Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。

1

M

Tris-HCl

(pH7.4，7.6，8.0)

组份浓度

1

M

Tris-HCl

配制量

1L

配制方法：

1.称量121.1

g

Tris置于l

L烧杯中。

2.加入约800

ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3.按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值。

pH值

浓HCl

7.4

约70

ml

7.6

约60

ml

8.0

约42ml

4.将溶液定容至1

L。

5.高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

1.5

M

Tris-HCl

(pH8.8)

组份浓度

1.5

MTris-HCl

配制量

1

L

配制方法

1.称量181.7

g

Tris置于1

L烧杯中。

2.加入约800

ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3.用浓HCl调节pH值至8.8。

4.将溶液定容至1

L。

5.高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

TE即Tris-EDTA

buffer（10mM

Tris，1mM

EDTA，pH7.4

pH7.6

pH8.0）。

常用分子生物学试剂，用于DNA的溶解等。

配制1

0×TE

Buffer

(pH7.4,

7.6，8.0)

组份浓度：

100

mM

Tris-HCl，10

mM

EDTA

配制量：

1

L

配制方法：

1.

量取下列溶液，置于l

L烧杯中。

1

M

Tris-HCl

Buffer(pH7.4，7.6，8.0)

100

ml

500

mM

EDTA(pH8.0)

20

ml

2.向烧杯中加入约800

ml的去离子水，均匀混合。

3.将溶液定容至1

L后，高温高压灭菌。

4.室温保存。

Tris-

盐酸

缓冲液

(ph7.4)

需要Tris121×0.01=1.21克

需要HCl36.5×0.01/6=0.06克，如果使用的是1%的盐酸那么需要盐酸的质量是1克

即1.21克纯净的Tris和1克1%的盐酸加水到900毫升。

在上述配制的

溶液

中加

分析纯

蔗糖

324×0.25=85.5克，再加水定容至1升，即可配制出所要求

缓冲溶液

。

缓冲溶液的配制：

缓冲溶液是无机化学及分析化学中的重要概念，分析测试中，在络合滴定和分光光度法等许多反应里都要求溶液的pH值保持在一个范围内，以保证指示剂的变色和显色剂的显色等。

这些条件都是通过加入一定量的缓冲溶液达到的，所以缓冲溶液是分析测试中经常需要的一种试剂。

(一)甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)

X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至200毫升。

甘氨酸分子量=75.07。

0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。

(二)邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)

X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾+Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至20毫升。

邻苯二甲酸氢钾分子量=204.23。0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。

(三)磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液

Na2HPO4分子量=141.980.2 mol/L溶液为28.40 g/L。

Na2HPO4·2H2O分子量=178.050.2 mol/L溶液为35.61 g/L。

Na2HPO4·12H2O分子量=358.220.2 mol/L溶液为71.64 g/L。

C6H8O7·H2O分子量=210.140.1 mol/L溶液为21.01 g/L。

(四)柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液

① 使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

配置方法：50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与 X 毫升0.1M盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。

pH (25℃)X (mL)

7.10 45.7

7.20 44.7

7.30 43.4

7.40 42.0

7.50 40.3

7.60 38.5

7.70 36.6

7.80 34.5

7.90 32.0

8.00 29.2

8.10 26.2

8.20 22.9

8.30 19.9

8.40 17.2

8.50 14.7

8.60 12.4

8.70 10.3

8.80 8.5

8.90 7.0