为什么邻甲苯胺法测得的血糖值比GOD
1.本法不需要除去蛋白质,邻甲苯胺试剂只与糖醛起反应,不与血中其他还原物质起反应。故测定值较Folin-吴宪法为低。 2.显色反应与水的含量有关,故应使标准管和测定管的含水量一致。 3.温度对显色反应有明显影响,煮沸时间和温度应准确控制。
一,实验目的掌握血糖的测定原理和方法;掌握血糖的正常范围及意义;熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。 二,实验原理家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其;进行血糖测定。邻苯甲胺方法测定血糖浓度。 实验采取前后对照的方法,对家兔注射肾上腺素和胰岛素,并通过耳缘静脉采血,获取激素注射前后的血液样本,采用邻甲苯胺法处理样本,最终与标品比色得出结论。1.调节血糖的激素有:胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长素和甲状腺素等。胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素,其他激素均使血糖升高。2.肾上腺素升高血糖的机制主要作用于肝细胞膜受体,通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶,同时抑制糖原合成酶,导致肝糖原分解加速。胰岛素降低血糖的机制是:降低肝细胞cAMP水平,从而抑制肝磷酸化酶,激活糖原合成酶,促进肝糖原的合成;胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成,阻遏糖异生关键酶的合成;胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散,促进糖的利用。3.血液中的葡萄糖,在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛(或称羟甲基糠醛)。后者在与邻甲苯胺缩合,生成蓝绿色的西夫式碱(Schiffbase)。其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。与同样处理的标准葡萄糖溶液比色,即可求得待测血液中葡萄糖的含量。三,实验材料1.材料:家兔两只,刀片,草酸钠,小烧杯。2.试剂:①肾上腺素(1mg/lml)②胰岛素(20单位/ml)③碘酒、消毒酒精④饱和硼酸溶液⑤邻甲苯胺-硼酸⑥5% 三氯醋酸溶液⑦饱和苯甲酸溶液⑧标准葡萄糖贮存液⑨标准葡萄糖应用液四,实验方法1.取健康正常家兔一只,实验前饥饿14~16h左右,称体重。2.耳缘静脉采血。小刀刮去耳缘的毛,用酒精棉球擦拭使其充血,再用干棉球擦干。 刀片划开耳缘静脉,使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中,注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。采集完毕后干棉球压迫血管止血。3.给家兔注射肾上腺素(0.5mg/只),半小时后同样方法采得血液。4.缓缓放入洁净试管内,加5%三氯醋酸3.6ml,同时摇动使之充分混匀。3000rpm离心5min,制得无蛋白血滤液(上清液)。5.取四支试管,分别加入2.5ml邻甲苯胺试剂。并向试管1加入1ml蒸馏水,试管2加入1ml标准葡萄糖应用液,试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液,试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。6.混匀后沸水加热8min,取出并用自来水冲洗试管使之冷却。而后置于722型分光光度计630nm比色,空白管校正零点。7.表加试剂如下表:ml空白管标准管待测管甲(药前)待测管乙(药后)蒸馏水1.0―--标准葡萄糖应用液(1mg/ml)-1.0--无蛋白血滤液(药前)--1.0-无蛋白血滤液(药后)---1.0邻甲苯胺试剂2.52.52.52.5同理,对家兔进行肾上腺素注射(剂量为5单位/公斤体重)并进行上述步骤,最终得出结果。五,实验结果据试验,在注射胰岛素实验中,家兔重量为2.95公斤,依照比例注射15单位的胰岛素。在注射肾上腺激素的实验中,家兔重量为2.90公斤,注射1mg的肾上腺激素。血糖测定:(葡萄糖标准液浓度为5.50mmol/L)空白管标准管注 射胰岛素前注射 胰岛素后注射肾上腺激素前注射肾上腺激素后血清/ml--0.020.020.020.02葡萄糖标准液/ml-0.02----生理盐水/ml0.02-----酶酚混合液/ml1.51.51.51.51.51.5曝光值00.1350.3630.1160.3150.508由此得出:注射胰岛素前血糖浓度为14.79mmol/L。注射胰岛素后血糖浓度为4.73 mmol/L。注射肾上腺激素前血糖浓度为12.83 mmol/L。注射肾上腺激素后血糖浓度为20.70 mmol/L。得出结论:注射胰岛素可有效的降低血糖。2.注射肾上腺素能使血糖上升。六,讨论实验中要注意如下问题:1.采血及注射激素时,应尽量使家兔保持安静。家兔不安静的情况下,肾上腺素分泌增多,血糖浓度升高,对实验结果有影响。2.采血后要及时分离出血浆,避免溶血。溶血时红细胞内糖类扩散到血浆中,会对实验结果有影响。3.采血量要准确,不能采得太少不够实验需要的血量,也不能采得太多伤及家兔。4.由于血细胞不断从血浆摄取葡萄糖加以利用,因此, 采血后及时进行检测,否则血糖浓度将逐渐降低。
干化学葡萄糖氧化酶法:特异强、价廉、方法简单,是目前国内首选的测定血糖方法。其正常值:空腹全血为3.5-5.3毫摩尔/升(55-95毫克/分升),血浆为3.9-5.1毫摩尔/升(70-110毫克/分升)。
干化学邻甲苯胺法:结果较可靠,由于血中绝大部分非糖物质及抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下来,因而不易出现假性过高或过低。其正常值:空腹全血为3.3-5.5毫摩尔/升(50-100毫克/分升),血浆为3.9-5.4毫摩尔/升(70-115毫克/分升)。
扩展资料:
血糖的来源包括:
①食物消化、吸收;
②肝内储存的糖元分解;
③脂肪和蛋白质的转化。血糖的去路包括:
①氧化转变为能量;
②转化为糖原储存于肝脏、肾脏和肌肉中;
③转变为脂肪和蛋白质等其他营养成分加以储存。胰岛是体内调节血糖的血糖浓度的主要器官,肝脏储存肝糖元。此外,血糖浓度还受神经、内分泌激素的调节。
参考资料来源:百度百科-血糖
参考资料来源:百度百科-测血糖
正常人空腹血糖(FBG)参考值:葡萄糖氧化酶法:3.9~6.1mmoi/L
邻甲苯胺法:3.9~6.4mmoi/L
糖尿病患者的空腹血糖参考值:
轻度糖尿病:7.0~8.4mmol/L,
中度糖尿病:8.4~11.1mmol/L,
重度糖尿病:大于11.1mmol/L。
正常人血糖的参考值是:
空腹血糖:3.9--6.2mmoL/L
餐后一小时:7.8--9.0mmoL/L
餐后两小时:3.9-7.8mmol/L
①:一般空腹全血血糖为3.9~6.1毫摩尔/升(70~110毫克/分升),血浆血糖为3.9~6.9毫摩尔/升(70~125毫克/分升)。
②:空腹全血血糖≥6.7毫摩尔/升(120毫克/分升)、血浆血糖≥7.8毫摩尔/升(140毫克/分升),2次重复测定可诊断为糖尿病。
③:当空腹全血血糖在5.6毫摩尔/升(100毫克/分升)以上,血浆血糖在6.4毫摩尔/升(115毫克/分升)以上,应做糖耐量试验。
④当空腹全血血糖超过11.1毫摩尔/升(200毫克/分升)时,表示胰岛素分泌极少或缺乏。因此,空腹血糖显著增高时,不必进行其它检查,即可诊断为糖尿病。
餐后血糖正常值
① 餐后1小时:血糖6.7-9.4毫摩/升。最多也不超过11.1mmol/L(200mg/dl)
② 餐后2小时:血糖≤7.8毫摩/升。
③餐后3小时:第三小时后恢复正常,各次尿糖均为阴性
孕妇血糖正常值
①孕妇空腹不超过5.1mmol/L
②孕妇餐后1小时:餐后1小时血糖值一般用于检测孕妇糖尿病检测中,权威数据表明孕妇餐后1小时不得超过10.0mmol/L才是血糖的正常水平
③孕妇餐后2小时:餐后正常血糖值一般规定不得超过11.1mmol/L,而孕妇餐后2小时正常血糖值规定不得超过8.5mmol/L。
通过对血糖正常值的检测,了解血糖标准值有助于您提高做好糖尿病防治。
望采纳,谢谢
糖尿病的诊断主要是通过血糖测定来判断,正常人空腹血糖(FBG)参考值:葡萄糖氧化酶法:3.9~6.1mmoi/L 邻甲苯胺法:3.9~6.4mmoi/L
糖尿病患者的空腹血糖参考值:轻度糖尿病:7.0~8.4mmol/L,中度糖尿病:8.4~11.1mmol/L,重度糖尿病:大于11.1mmol/L。