高中生物实验改良的苯酚品红溶液将染色体染成什么颜色

用台盼蓝染色，死细胞会被染成蓝色，而活细胞不着色，从而判断细胞死活

死细胞的鉴别一般通过DNA结合染料排除，利用死细胞膜通透性增大、不破膜的情况下DNA染料即可进入的特点区分出死细胞，但所用染料浓度、时间远远低于细胞周期所用的浓度，并且不需要固定。

常用的核酸结合死活鉴别染料包括：

碘化丙啶（propidium iodide，PI）

4'，6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐（4',6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride，DAPI）

7-氨基 - 放线菌素D（7-amino-actinomycin D ，7-AAD）

DRAQ7

SYTOX

不过对于一些胞内抗原（细胞因子、转录因子），由于需要固定、破膜，所以上述染料中，除了一些胺类染料（如Live/Dead、Ghost等）和新型蒽醌类染料CyTRAK Orange外，其它染料不再适合此类标本的细胞死活鉴别。

这里，只向大家讲解一下用PI、7-AAD、DAPI的染色方法，其它商品化死活染料请按照说明书操作：

1. 用0.5ml 1×PBS重悬细胞。

2. 加入PI或DAPI或7-AAD，终浓度分别为PI（5 µg/ml）、DAPI（500-1000 ng/ml）、7-AAD（2.5 µM）

3. 加入上述染料后，尽快上机，一般不要超过5分钟（有些厂家说明书写着10分钟，可能与浓度有关，可按照说明书操作）。

PI检测通道：使用488 nm激发，用610/20 BP收集

DAPI检测通道：最好用355nm激发，用440/40BP收集；也可以用405nm激发，450/50BP收集

7-AAD检测通道：用488nm激发，用670/14BP收集

下图是用PI检测细胞死活的结果图：

1、细胞死亡：细胞死亡作为生物体的一种常见现象，在动物细胞中有三种方式：凋亡（apoptosis），自噬（autophagy）和坏死（necrosis）。前两种类型属于细胞程序性死亡（programmed cell death，PCD）。细胞坏死是细胞在遭受极度刺激时引起的细胞死亡，以细胞质膜的破裂为特征，造成内含物的炎性泄露，是一种非正常死亡。细胞的PCD是细胞的一种“主动性”死亡行为，从形态上和功能上都与细胞坏死有很大的不同。

2、植物中细胞程序性死亡（PCD）：目前可依据液泡膜破裂后，是否在细胞质中发生快速降解将PCD分为两个大类。第一类为自溶性（autolytic）PCD，与液泡中的水解酶的释放有关，在液泡破裂后，导致细胞质的快速清除。第二种为非自溶PCD，（non-autolytic），即液泡膜破裂但是没有出现快速的细胞质的清除。目前鉴定细胞的PCD类型，还是以细胞形态学为主。

3、动植物细胞凋亡标准：动物：凋亡：凋亡小体，或者在细胞表面的水泡，感染病原体后在其他细胞中的降解。自噬：自噬小体，自溶酶体，和小的促进细胞溶解的液泡数目的增加坏死：没有上面的定义的标准。植物：自溶：植物膜破裂之后对细胞质的快速清理。非自溶：没有对细胞质的快速清理。其他：染色质浓缩细胞核破裂自我标记信号自食信号细胞膨胀，细胞器膨胀，质膜破裂染色质浓缩。液泡体积增加（细胞质体积减小）需要Ca2+的内流，细胞质皱缩，细胞器膨胀，小泡增多但体积不增加。

准备材料：洋葱、培养皿、蒸馏水、广口瓶、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜、载玻片、盖玻片、卡诺氏液、改良苯酚品红染液、体积分数为15%的盐酸溶液、体积分数为95%的酒精溶液。 

一、培养根尖。将洋葱放入装满蒸馏水的广口瓶中，洋葱底部接触水

二、低温诱导。放入冰箱，将整个装置放入冰箱的低温室（4℃）内，诱导培养36小时

三、固定细胞形态。剪去诱导处理的根尖约0.5-1cm，放入卡诺氏液中浸泡0.5-1小时，以固定细胞的形态

四、用体积分数为15%的盐酸溶液、体积分数为95%的酒精溶液冲洗2次

五、将处理好的根尖放在玻片上

六、滴改良苯酚品红染液，着色3-5分钟

七、制片完成后，将玻片放入显微镜下观察

八、在显微镜下可以观察到，染色体数目加倍，低温可以诱导植物细胞中的染色体数目加倍

对于实验观察没区别，两者的作用效果是一样的。

醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。

在“观察植物细胞有丝分裂”（即“观察根尖分生区组织细胞”）时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。

改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。

扩展资料：

1、作为染色剂必须具备两个条件：一是具有颜色；二是要与被染组织间有亲和力。染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的，产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染色剂的染色性质。

2、染色质(体)容易被碱性染料染成深色。实验中对染色质(体)进行染色，须使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染色剂，这些染色剂是以龙胆紫或醋酸洋红溶解于醋酸溶液中制得，配制后的龙胆紫溶液pH值约小于7(呈酸性)。

3、改良苯酚品红染液配法顺序如下： 原液A：取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中，此液可以长期保存。原液B：取A液10毫升加入90毫升5%苯酚(即石炭酸)水溶液中(2周内使用)。原液C：取B液55毫升加入6毫升的冰醋酸和6毫升38%的甲醛(可长期保存)。

染色液：取C液10-20毫升，加入90-80毫升45%醋酸和1.5克山梨醇。放置2周后使用，染色效果显著，可普遍用于植物组织的压片法和涂片法，使用2-3年不变质。

山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用。如果没有山梨醇，也能染色，但效果稍差。改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸洋红染色液的染色效果是相同的。而且用改良苯酚品红染色液还能提高工效，简易节约的优点。

4、在涂抹法与压碎法中，醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在煮沸的45%醋酸中加洋红使之饱和，再加入微量的铁离子，便使醋酸洋红材料在为醋酸固定的同时，洋红将核或染色体染成红色。PH呈酸性。

参考资料来源：百度百科-龙胆紫溶液

参考资料来源：百度百科-苯酚品红染液

参考资料来源：百度百科-醋酸洋红

卡宝染色解决方案目录

也被称为改良苯酚品红改良苯酚品红。

被称为前三种涂料，相映成染色液的制备方法。原液A：以：碱性品红克（长期保存）溶解在100毫升70％乙醇中。库存溶液B：采取原液A10ml，加入90ml的5％石炭酸水溶液（限2周）。原液C：取原液B45ml，冰乙酸和福尔马林（37％甲醛），6毫升（长期保存）。染色溶液：涂料C10??20ml中，90毫升加45％醋酸和80多个山梨醇1.8克，配成的10％至20％的苯酚品红溶液，一般两个星期后着色能力显著增强。淡染或延长染色浓度为2?10％的可用的，防污染色液的浓度可以根据需要改变，可使用的浓度为30％，然后45％的乙酸的分离。 （山梨糖醇辅助剂稳定的染色解决方案，而山梨糖醇也略差，但着色效果。）

作用原理

该解决方案的优势，方便醋酸洋红染色，但也Schiff试剂的优势，核和染色体染色，染色效果可靠。该解决方案是适用于各种大小的动物和植物的染色体染色体和减数分裂染色体，具备相当雄厚的染色性能，室温保存两年不变质。随着卡诺的解决方案通过类似的。

改良苯酚品红染液：是近年来观察植物染色体时新使用的比较理想的染色剂,优点较多,使用方便.配法顺序如下：原液A：取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中,此液可以长期保存.原液B：取A液10毫升加入90毫升5%苯酚(即石炭酸...

改良苯酚溶液是碱性品红的70%酒精溶液（常称A液），加入9倍体积的5%苯酚（B液），之后加入冰醋酸和甲醛（C液），再与醋酸和山梨醇配，放置2周。

是用于观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。

相较于以前用的醋酸洋红染液，他不需要花大量时间煮沸配置随配染液，实验程序大幅简化，成本降低。

卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid or carnoys

fixative）适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖,花药压片及子房石蜡切片等.有极快的渗透力。

根尖材料固定15—20min即可。

花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h。

染色后多用于观察植物根尖细胞分裂状态。

改良苯酚品红，又称卡宝染色液（Carbol fuchsin），又称改良石炭酸品红，

此液适于动植物各种大小的染色体、体细胞染色体和减数分裂染色体，并具有相当牢固的染色性能，保存性好，室温下两年不变质。

本品与卡诺氏液作用相似。

望采纳~~

植物染色体制片技术是植物细胞遗传学、染色体工程、植物细胞生物学、植物细胞分类学和物种生物学等众多学科的基本实验技术。植物染色体的研究由于和植物遗传育种工作的结合而获得良好的发展。因此，植物染色体的技术在这些研究工作中具有特别重要的意义[1-3]。Belling(1921)提出染色体压片技术后，植物压片已成为植物染色体研究中广泛应用的常规技术[1]。但是由于植物细胞有很坚实的细胞壁，染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上。陈瑞阳(1982)提出了植物染色体标本制备的酶解去壁低渗法。本文以韭兰为材料，对植物染色体常规压片，去壁低渗法制片技术、染色效果进行了比较，以期在不同的材料及条件下选择适宜的染色体制片技术，从而获得较好的效果。

1 材料与方法

1.1 供试材料 试验用植株由校园内采集。

1.2 根尖制片

1.2.1 常规压片 通常是在早上9-10点采集葱兰的根然后在室温下放入0.1％秋水仙素溶液中进行预处理处理8 h。然后就在常温把材料放在卡诺氏固定液下固定10m，接下来就在1 mol／L盐酸溶液中解离到松软刚合适为止。最后是用蒸馏水将葱兰根冲洗干净，这样前处理就结束。处理完后就可以用醋酸洋红染色或改良苯酚品红染色[4]。压片/涂片后选取典型的染色体，在40倍物镜及油镜下显微照相。

1.2.2 去壁低渗法 去壁低渗法也是把材料放0.1％秋水仙素溶液中进行预处理处理8 h。然后前低渗即是将根尖放在0.075 tool／L KCI低渗液中，在20～25℃条件下处理0.5h。接下来就是最关键的去壁，倒去KCI溶液，加入2.5％混合酶液，在25～30℃温度下处理2～5 h左右。去壁后要进行后低渗，使细胞完全胀，即是用20～30℃蒸馏水慢慢冲洗2～3次后，再将根尖放在0.075 tool／L KCI低渗液中处理。

醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在“观察植物细胞有丝分裂”（即“观察根尖分生区组织细胞”）时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。

改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。而且用改良苯酚品红染色液还能提高工效，简易节约的优点。

可以说没区别，化学本质不同，但是作用效果是一样的。