酶切后的DNA可直接乙醇沉淀吗
可以，但是最好使用醋酸铵，也可以不加，回收效率可能会低一点，操作步骤：
方法一：
将忆确定的回收产物溶液于加有300 µL TE缓冲液的灭菌的1.5 mL Eppendorf管中。
加入等体积酚-氯仿-异戊醇，摇晃均匀。
12000 rpm离心5 min。
小心将水相移到另一1.5 mL Eppendorf管中，加入2.5~3倍体积（780 µL即可）预冷无水乙醇，以及10%水相体积的3 M NaAC（pH 5.2）。
置液氮3 min，取出后可置于－20℃放几min。小心防止管子爆裂。
12000 rpm离心10 min。
迅速弃上清，一般在管底会有针尖大小的沉淀物，小心用无水乙醇清洗后置于恒温器上干燥（55℃）5~10 min至无乙醇气味，再加入20 µL ddH2O溶解。
取20 µL电泳定量后－20℃储存备用。
方法二：
先把乙醇-20度预冷，酶切完后加入2倍体积的无水乙醇，-20度放置10min以上，12000rpm离心10min，管底出现白色沉淀，倒掉上清，换用70%乙醇重复一次，再用水溶解白色沉淀既可，损失率蛮大，回收率只有40%，或者更低。
乙醇沉淀的过程： 加入等体积的100%冷乙醇，加入1/10体积的NaAC(3M,pH5.2)后上下颠倒混匀， -20度30分钟，12000转4℃离心10分钟。倒掉上清，加入70%的冷乙醇，轻轻混匀，12000转4℃离心10分钟；倒掉上清，放在室温中干燥，标准是闻不到乙醇的味道，切记不要干燥过头。加入适当体积水或者TE缓冲液溶解。
1. 1/10 体积的乙酸钠（3 mol/L ，PH=5.2）充分混匀
2. 2 倍体积冰预冷的无水乙醇，混匀，- 20℃ 15~30 分钟；
3. 12,000 g X 10 min，弃上清；
4. 再加1ml 70％乙醇，12000g X 1 分钟，弃上清；
5. 挥发至干；
6. 加 ddH2O 或TE溶解 DNA 沉淀。
如果没有试剂盒也可以用等体积酚氯仿抽提，再加入十分之一体积3M
NaAc（pH5.2），2.5倍体积无水乙醇，－20度沉淀过夜，12000rmp离心后用70％乙醇洗涤后加TE溶解。
提取液中加入等体积预冷的5mol/L
Licl
充分混匀，1000rpm
4℃离心15min，取上清。
加等体积异丙醇，混匀，室温放置10min，10000rpm
4℃离心15min。
弃上清，纯点加入70%乙醇洗涤一次，沉淀风干10~15min。
500ul，含RNA酶的TE（pH8.0）溶解沉淀，室温放置30min。（将质粒RNaesA混合物用酚：氯仿抽提一次，然后用氯仿抽提一次）
用2.5倍体积无水乙醇沉淀质粒，风干10min。
加1ml灭菌水溶解沉淀，加500ul
PEG-MgCl2溶液，充分混合，室温10min，12000rpm
4℃离心15min。
用70%乙醇重悬沉淀，12000rpm
4℃离心15min。
弃上清，沉淀用70%乙醇处理一次，最后将质粒，溶于500ulTE（pH8.0）中，取1ul质粒DNA，100倍稀释后测OD260，计算DNA的浓度，其余封装，-20℃保存备用。
