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流式细胞胞固定破膜单用70%无水已醇吗

结实的咖啡
踏实的日记本
2022-12-30 20:38:06

流式细胞胞固定破膜单用70%无水已醇吗

最佳答案
无限的紫菜
搞怪的音响
2026-04-11 20:03:51

这个方法只限于用作PI单染的细胞周期实验,而且最好固定时间不超过半小时。固定如果不能立刻检测,建议更换溶液为PBS和10%BSA。细胞置于酒精时间过长,会出现大量碎片,影响实验结果。

如果要使用抗体染胞内抗原,这个方法不好用。建议使用多聚甲醛加去垢剂来固定来透膜。

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忧心的日记本
明亮的电脑
2026-04-11 20:03:51

根据你所购买的试剂盒而定,一般是先用70%乙醇先固定,然后加RNA酶和PI,半个小时左右上机检测就可以了.需要注意的就是加酒精固定的时候要用四度预冷的酒精,缓慢的加,边加边晃动细胞,避免细胞黏连在一起. (1)细胞培养 取对数生长期的细胞,按1X10。

靓丽的路灯
健忘的月饼
2026-04-11 20:03:51
乙醇对组织细胞的处理既有固定作用又有脱水作用,乙醇借沉淀作用使蛋白质变性,固定组织以80%~95%浓度为好

冰醋酸:5%水溶液可作固定用。不能沉淀白蛋白,但能沉淀核蛋白。渗透性强,固定快,能使红细胞膨胀而破碎,常与其它液体配合使用。

幽默的宝贝
拼搏的老虎
2026-04-11 20:03:51
因为无论用哪种方法提取,沉淀DNA时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和DNA分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与DNA结合形成DNA-阳离子盐溶于溶液中,再用无水乙醇可以将DNA-阳离子盐沉淀下来,但这样一来,DNA中就含有较多的盐离子,这势必会影响下一步实验的进行,所以要用70%乙醇洗涤DNA沉淀(因为在70%乙醇里DNA是不溶的,而盐离子却可溶),用无水乙醇则达不到这个目的!OK?