关爱和缓解透析的痛苦(六):重视高磷血症
高磷血症在尿毒症继发性甲旁亢和骨外钙化发病机制中具有重要作用,尿毒症透析患者应积极防治高磷血症。
磷的主要来源是饮食,控制饮食中磷的摄入对预防和治疗高磷血症非常重要。限制磷摄入的措施包括:适当限制摄入蛋白质的总量,但不可过度限制蛋白质的摄入,以免导致营养不良;选择磷吸收率低、磷/蛋白质比值低的食物(最经济的食物是鸡蛋白);限制含磷的食物添加剂和某些高磷食物的摄入(比如味道鲜美的油炸食品、海鲜、味精鸡精、高汤、坚果等)。建议限制饮食磷摄入(800 1000mg/天)。
高钙血症与骨外钙化关系密切,建议每日元素钙总量不超过2000mg。对于没有接受活性维生素D及其类似物治疗、或低钙血症、或正在接受西那卡塞治疗的患者,其钙的摄入量可稍高。此外,可以通过调整透析方案控制高钙和高磷血症,以减少骨外钙化风险。
存在继发性甲旁亢的透析患者,如无低钙血症,建议使用钙离子浓度为1.25mmol/L的血液或腹膜透析液。血液透析患者可以通过增加透析频率和透析时间,以更有效地清除血磷,从而降低PTH水平或提高药物治疗SHPT的效果。
高磷血症是继发性甲旁亢始动、进展和对药物治疗抵抗的重要因素,药物治疗继发性甲旁亢应首先从高磷血症的治疗入手。
高磷血症的治疗除饮食控制和调整透析方案外,还包括磷结合剂的使用。磷结合剂又包括含钙(碳酸钙、醋酸钙等)和非含钙的磷结合剂(碳酸司维拉姆、碳酸镧等)。磷结合剂可在消化道内结合食物中的可吸收磷,使之变为不可吸收磷通过粪便排出体外。因此所有磷结合剂的服用均需遵循与餐同服的原则,对于碳酸钙、碳酸镧等可以咀嚼的药物还需要嚼碎服用,目的是使磷结合剂在消化道内充分与食物混合,以增加其磷结合效果。
对于存在高钙血症、骨外钙化和低转换性骨病的患者,应注意避免使用含钙的磷结合剂。鉴于含铝的磷结合剂具有便宜高效的特点,可考虑短期(最多4周)使用含铝磷结合剂,禁止反复长期使用含铝磷结合剂。
对于合并继发性甲旁亢的高磷血症,如果血钙不低,一般首选盐酸西那卡塞。盐酸西那卡塞可以在降低PTH的同时,促进骨骼重吸收血液中的磷和钙,间接起到降磷降钙效果。
总之,高磷血症是继发性甲旁亢、异位钙化等透析慢性并发症的起源病因和罪魁祸首之一。一定要重视这个看似简单却十分顽固的家伙。
南京医科大学第一附属医院(江苏省人民医院)肾内科 杨光
小木虫上找到的
1,水溶性蛋白,ph对活性影响小时,完全可以,直接用生理当量的NaCl就可以了,既简单又节约成本;
2、磷酸-三乙胺缓冲液 取磷酸约4ml与三乙胺约7ml,加50%甲醇稀释至1000ml,用磷酸调节pH值至3.2,即得。
磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠38.0g,与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml,加水至1000ml,摇匀。乙液:取磷酸
氢二钠71.63g,加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合,摇匀,即
得。
磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至2.5,用水
稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH
值至5.0,即得。
磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000
ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml,用
水稀释至100ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水
使溶解成400ml,即得。
磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L
氢氧化钠溶液调节pH值至6.8;另取胰酶10g,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释
至1000ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶
液118ml,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.0) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml,用
水稀释至100ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.2) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液
35ml,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.3) 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成
1000ml,调节pH值至7.3,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取磷酸二氢钾1.36g, 加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml,用
水稀释至200ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.6) 取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加
0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml,再加水稀释至200ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液:取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解,并稀释至500ml。
乙液:取磷酸二氢钠2.76g,加水溶解,并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml
混合,摇匀,即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.8~8.0) 取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g,加水使溶解
成1000ml,即得。
PBS缓冲液
称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS-T缓冲液
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)
PBS-T缓冲液
取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。现用现配。
PBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,具体试剂一般也有不同的比例配方,在针对性上就有了更好的效果。
PH 7.6 7.4 7.2 7.0
H2O 1000 1000 1000 1000
NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5
Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2
NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4
一天2-5次更换腹膜透析液是规律的. 6天停一天是不正确的说法.是不可行的.谢谢
今天我讲演的题目是《血液透析常见问题解惑》,其目的就是将日常临床工作中我们经常遇到的问题分为几个方面做一统一的答复,以加深各位病友对透析治疗的认识,最终目的是延长存活时间,提高生活质量,乃至最终的回归社会的目的。
一、血液透析知识篇
1. 血液透析是怎么回事?
血液透析是利用透析器等体外循环装置进行的。透析进将病人的血液与含有一定化学成分的透析液同时引入透析器中,隔着半透膜进行透析,以排除代谢产物、净化血液和补充必要的物质,从而起到人工肾脏的作用。
主要原理:弥散(图片)+对流(图片)
(动态图)
2. 为什么尿毒症患者要接受透析治疗?
各种原因,如慢性肾小球疾病、糖尿病、高血压、囊性肾病等导致的终末期肾损害情况下,肾脏排泄体外的各种代谢产物(如肌酐、尿素氮)及水的能力逐渐下降,就会导致临床上一系列的临床症状,如高血压、水肿、恶心、呕吐等等。血液透析相当于帮助肾脏将完成上述工作,因此,属于替代治疗手段。
打个比方,如果说正常的肾脏相当于家里雇了个保姆,24小时随时打扫屋内的卫生的话,那么,血液透析就相当于雇了个钟点工,每周来打扫2-3次。
3. 我应该选择透析呢还是肾移植呢?
血液透析同属于尿毒症的替代治疗手段,但各有利弊。
(表格:透析与肾移植的优缺点)
具体到每个患者,两种替代治疗手段都是可以考虑的。但要综合如下一些因素考虑:
年龄,一般而言,年龄较轻的患者做肾移植可能更为合适;
回归社会的需求,回归社会需求较强烈的,做肾移植更为合适;
原发病情况,若原发疾病为糖尿病,由于肾移植后会使用糖皮质激素治疗,对血糖控制不太有利,因此不太主张肾移植;
经济情况,若经济情况不佳,不太主张肾移植。
4. 血液透析能够维持多长时间?
这是患者经常提问的问题。目前国内很多好的透析单位,透析维持30年以上的患者已经有很多病例了,透析20年左右的患者更是大有人在。我院目前透析患者中,10年以上的也有几例了。从理论上分析,只要尿毒症的各种并发症处理的比较好,长期透析维持生命,乃至有一个比较好的生活质量是完全可以达到的目标。2006年,我在南京军区总医院进修期间,季大玺主任曾经有一句话:上帝如果给了你100岁的寿命,我们血液净化医务人员有责任不让你在99岁之前死掉。当然,这需要各位患者能够更好的按照医务人员的指导进行治疗。
5. 我应该透几次合适?
一般来说,规律、充分的血液透析应该至少3次/周,对于部分尿量比较多、一般情况良好、血压控制良好的患者,可2次/周或5次/2周。
6. 我应该脱多少水?
这个问题涉及到了“干体重”的概念。透析患者的干体重指的是体内没有多余的水分同时又不缺水的体重。干体重不是一成不变的,可随病情变化发生改变。我们临床上更多的情况是过高估计干体重,脱水量往往定的不够。但也有饮食改善之后,干体重升高的情况,这种情况下,还按照原来的体重脱水的话,就显得有点过了。可能会出现一些不适症状,如透析后乏力、食欲减退等等。
对于每周三次的患者,每次体重的增长一般是干体重的5-7%,比如,60公斤的患者,体重上涨不能超过3-4kg。如果高于这个数字,说明体重上涨过快,饮水控制不佳,容易出现各种并发症。更为简单的计算是每天不能涨水超过1kg。
7. 血液透析后是不是尿量越来越少?
不一定。只要临床情况允许,很多尿量足够的患者(周主任称之为“干巴性尿毒症”),在透析中可以不脱水或者很少量的脱水,这种情况下,尿量一般不会出现减少的情况。但是,如果随着病情的加重,尿量也有可能逐渐减少的,这种情况下,就需要考虑开始进行脱水治疗了。
8. 我还有尿,为什么还要脱水?
部分患者尿量还比较多,但是合并有其他不适,如不能控制的高血压、睡眠欠佳、呼吸困难甚至咳嗽等等。这都提示虽然有尿,但是尿量不足以把体内多余的水分都排除出去。因此也需要适当脱水。实际上,这种情况就是属于过高估计干体重的情况。(举例)
9. 血液透析滤过和血液灌流是怎么回事?
在前面,我们提到了,血液透析最主要的清除模式是弥散,而对流是血液滤过的模式。我们通常所说的“血滤”其实指的是“血液透析滤过”,就是把弥散和对流两种方式结合起来,以更好地清除中大分子的物质。因此比单纯血液透析具有更充分的清除。秦皇岛的医保政策是每个月可以报销一次血液透析滤过治疗的费用,因此,广大患者可以考虑每月做一次血滤。
血液灌流指的是在透析过程中串联一个灌流器。这个灌流器中的成分是树脂成分,其作用是吸附。这与防毒面具中活性炭的作用有些类似。血液通过灌流器时,其中的一些中大分子的毒素可以被吸附掉。灌流器有饱和问题,因此,一般进行2个小时就不能继续做了,再做也没有过多的好处。早期灌流的应用主要是药物和毒物中毒,但目前我们在临床上也间断的进行血液灌流治疗,其目的是这一治疗对继发性甲旁亢、瘙痒、脑病等等具有一定的治疗作用。
血液灌流的弊端在于容易过敏及凝血,因此需要必要的抗过敏和抗凝治疗。
二、血液透析并发症篇
1. 血压高控制不下来怎么办?
尿毒症患者,尤其是血液透析患者的高血压主要有两方面因素:一是容量因素,就是说体内水分过多导致的;另一方面是RAS系统活跃导致的。因此,尿毒症患者的高血压应该主要从这两方面入手。首先就是控制体重。很多患者认为自己还有尿,就不想脱水,前一段我们的一个患者就是这种情况,在一段时间之内,体重没怎么涨,但是血压却控制不下来了,给我打电话。我说,先试着脱点水,果然,2次透析之后,体重也就下来1kg左右,血压立马控制良好了。
当然,如果容量因素排除掉之后,就应该考虑是RAS系统激活的因素了。在这方面,有两大类药物,ACEI类和ARB类药物,就是洛汀新或者代文这一类的药物,对于RAS系统是有阻断作用的。如果没有透析,肾功能不全的患者一般是不敢使用这两大类药物的,但是,进入透析状态之后,是可以使用的。除了降压之外,这些药物还具有改善心肌功能的作用。
除此之外,交感神经兴奋也是尿毒症患者高血压的致病因素。因此,可以使用β受体阻滞剂类,如倍他乐克、心得安等等。使用这些药物要注意观察心率的变化,若心率太慢,就需要停用了。此外,如果合并有哮喘,则也不能使用。
2. 透析中低血压怎么办?
首先是明确病因。一般透析中低血压最常见的原因是脱水量定的过多导致的。如果再合并有心功能差,则更容易出现低血压。低血压的危害还是比较严重的,包括容易出现心脑供血不足,动静脉内瘘闭塞以及外周血管病变加重等等。
预防措施:严格控制干体重,重新评估干体重,适当延长透析时间,增加透析次数,调整透析液的钠离子浓度,补充肉碱(左卡尼汀)。
长期低血压的患者可服用盐酸米多君治疗。
3. 透完析后鼻子、牙龈、皮肤出血怎么回事?
一般情况下,这说明抗凝剂的用量过多了,需要重新评估抗凝剂的使用量。通常,我们使用的抗凝剂是肝素或者低分子肝素,所谓低分子肝素就是从肝素中提取分子量比较小的那一部分。有点相当于粗沙子和细沙子的区别。低分子肝素相对而言要比肝素更为安全,因此对于出血倾向的患者,一般会选用低分子肝素。我们现在有两种剂型,一种低分子肝素钙、一种低分子肝素钠。这两种药物整体没有太大差别,可以酌情选用。如果仍有出血倾向,则建议做凝血功能的检查,排除一些血液系统疾病的可能。
4. 透析回血时管路里有血块是怎么回事?
这说明抗凝剂使用量不足。应该适当增加抗凝剂的用量,做到抗凝治疗的个体化。
5. 我透析中经常抽筋是怎么回事?
主要原因 血透过程中肌肉痉挛的确切病因尚不清楚 , 但是与以下几方面关系密切。1.不恰当的除水,除水速度过快,除水量过大,以及低于基础体重的除水;2.电解质异常,如低纳透析液,此外,血透时代谢性酸中毒及时得到纠正,游离钙减少,肌肉兴奋性增强;3.低血压;4.营养状况欠佳,不能耐受脱水。预防措施和紧急处理:1.及时变换体位,避免寒冷刺激,减低肌肉兴奋性。2.减慢除水量,降低血流量。3.局部热敷、局部按摩。4. 若血压正常,下肢抽搐可以令患者坐起,两足平放着地。5.补液,如生理盐水。6.高渗液10%NaCI注射或50%葡萄糖注射。7. 透析液制作时, 注意 Na+ 、 Ca2+ 的浓度。
三、血液透析护理篇
1. 为什么要在脖子上插管?
人体自身血管不能满足透析的需要,所以在没有动静脉内瘘或者其他血管通路的情况下,应该进行中心静脉导管的置管。首选位置颈内静脉,其他选择包括锁骨下静脉和股静脉。
2. 为什么我的插管有时流量不够?
中心静脉导管在体内置管时间,颈内静脉一般不超过1个月,股静脉一般不超过1周。但是实际上,由于其他血液通路尚未建立起来等因素,往往置管时间会延长。这就增加了导管合并问题的可能。而带有cuff的导管,即我们所谓的“长期管”也有可能在其近心端出现管腔内的血栓形成以及纤维蛋白壳。在这种情况下,流量往往不足,可以使用尿激酶溶栓治疗,一般情况下会有效,但如果仍不能纠正,就得考虑更换导管了。
3. 插管患者透析过程中发烧、寒战怎么办?
中心静脉导管相关感染是比较常见的合并症。如果透析中出现发烧、寒战、高热等症状,则高度提示已经出现了中心静脉导管的感染(CRBSI)。处理原则:1、进行血培养+药敏试验,明确感染的细菌及敏感药物;2、实验性的使用抗生素治疗,据统计,CRBSI中至少60-70%是金黄色葡萄球菌感染,因此,可实验性的使用一些针对金葡菌敏感的抗生素;3、抗生素封管;4、必要时更换导管或拔管。
4. 我的瘘做完已经一个月了,为什么还不能用?
动静脉内瘘术后有一段时间的成熟期,这段时间对于每个患者而言长短不一。K-DOQI指南的建议是内瘘术后至少3个月之后再使用;但由于我们的患者做瘘时间过晚,因此,一般的建议是至少1个月之后使用,但是这1个月的时间是一个平均数,并非所有的患者术后1个月都能使用。常见的影响因素包括女性、糖尿病、高脂血症等等,若静脉过细,则术后有可能很长时间都不能进行穿刺。术后可以通过扎止血带后握拳动作进行锻炼,以促进内瘘的成熟。
5. 做完瘘在家要注意些什么?
1)、术后3日可进行局部锻炼,促使瘘管成熟。方法:手握橡皮握力圈,每日3-4次,每次10分钟;也可用手、止血带或血压袖带在吻合口上方(如上臂),轻轻加压至静脉中度扩张,每15-20分钟松开一次,每天可重复3次。
2)、术后5-7日内,应保持术侧肢体干净,避免潮湿,以防伤口感染;若发现有渗血不止、疼痛难忍时,立即与医生联系,及时处理。
3)、教会患者学会判断内瘘是否通畅的方法,即将非手术手触摸术侧的静脉处,若扪及震颤,或听到血管杂音,则提示通畅。否则,应立即和医生联系,及时再通。
4)、内瘘术后早期,应尽量穿袖口宽松内衣,抬高术侧肢体,促进血液回流,减轻肢体肿胀。避免患侧肢体受压,不要穿紧袖衣服、不可带手表、不可测血压不可负重,不能用内瘘静脉注射或输液。
6. 我的做瘘部位为什么会起一个大包?(图)
长期透析的患者往往在动静脉内瘘所在的血管处会鼓起一个大包,这种情况叫做假性动脉瘤形成,是长期反复在同一部位穿刺刺激血管造成的。假性动脉瘤的形成有利有弊,但弊大于利。唯一的好处是穿刺时成功率很高,疼痛感较轻。但有可能造成出血或者感染的并发症。假性动脉瘤重在预防,如护士穿刺时应避免反复同一个针眼进针,应该采用纽扣式或绳梯式穿刺法,在几个针眼轮流穿刺。如果已经形成了假性动脉瘤,如果没有特殊不适,无需特殊处理;如果局部疼痛,可使用护腕局部加压处理;若出现感染或者其他严重的并发症,则需要手术处理。
四、血液透析饮食篇
1. 血液透析患者的饮食应该注意些什么?
首先要重视液体量的控制,不仅仅是水要控制,汤、粥、饮料等等都要控制,这样才不至于透析器件体重增长过多;钾的摄入要控制,严重的高血钾是可能导致心脏停跳的,这是非常严重的并发症;长期透析的患者还得重视限制磷的摄入;高血压的患者的控制盐的摄入。
2. 我应该喝多少水?
原则上每天总的饮水量应该是尿量+500ml。比如,24小时尿量1000ml左右,则每天的饮水量可以控制在1500ml左右,但要注意,这个数字是包括了各种饮料、汤、奶等等。
3. 高钾的食物有哪些?
饮料类:咖啡、茶、运动饮料、果汁、鸡精;
中药类:人参、枸杞、冬虫夏草等;
水果类:香蕉、橘子、草莓、哈密瓜、梨、柿子、菠萝、火龙果、苹果、桂圆、荔枝、板栗等;
蔬菜类:香菇、空心菜、菠菜、榨菜、笋干、紫菜、木耳等。
蔬菜在烹调前用水焯一下能够降低钾的含量。
4. 高磷的食物有哪些?
海鲜类:虾、河蟹、海蟹、鲍鱼等;
坚果类:核桃、杏仁、花生、开心果、芝麻、葵花籽、腰果、松仁、莲子等;
内脏类:肝、腰子、心管、肥肠等;
主食类:糙米、麦片、全麦面包、薏仁等;
豆类:黄豆、红豆、绿豆、蚕豆、豆腐等;
奶制品:奶粉(低磷奶粉除外)、乳酪、鲜奶、炼乳;
其他:可乐、巧克力、茶、蛋黄、碳酸饮料、卵磷脂、花粉等。
5. 那我到底能吃些什么?
蛋白质:每天每公斤体重1-1.2克,尽量选择优质蛋白如牛奶、鸡蛋、瘦肉、鱼肉等;如60公斤体重,每天摄入量为60-70g左右,也就是300g的瘦肉的量。(若两个鸡蛋,则第二个不要吃蛋黄)。(感谢热心网友提出的异议,蛋白量这里我错了。)
脂肪和热量:脂肪热量含量非常高,透析患者应适当限制脂肪的摄入,热量主要靠糖类来满足。建议使用植物油,不饱和脂肪酸的含量较高。
糖类:热量的主要来源,如果没有糖尿病,50%的热量应该由糖类满足,主要来源包括:谷类、面食(馒头)、面包、米饭、糖块等等;
钠:每天摄入量1-2克,高血压患者应更加严格,来源包括食用盐、腌制食品、罐头食品、洋快餐等等。
北方普遍口重,因此建议在家烹调时建议最后放盐,或者分出一份来单独放盐。
6. 为什么开同、碳酸钙、醋酸钙要就着饭吃?
服用钙剂(开同中也含有钙的成分)的主要目的是结合食物中的磷,以控制高磷血症。如前所述,几乎所有的食物中都含有磷,事实上,只要有蛋白,就有磷的成分,因此,在吃饭时服用上述药物,能够最大限度的将食物中的磷结合掉一部分,可减轻高磷血症的程度。
五、血液透析药物篇
1. 降压药
如前所述,透析患者降压治疗首先是要达到真正的干体重,把容量因素控制好。在此基础之上,如果血压仍然控制不佳,则需要服用一些降压药物。我们的患者对几种常见的降压药了解不太多,下面就分别介绍一下:
1) 拜新同(伲福达)
医保乙类药,尿毒症慢性病本可报销。是钙离子拮抗剂类降压药,与心痛定成分相同,降压机理是调节心血管系统的扩张程度。副作用是浮肿。
2) 氨氯地平
另一种钙拮抗剂,长效药物,降压效果强于硝苯地平。有的患者说了,我吃了一堆降压药,咋还降不下来呢?我一问,都吃什么了?说:氨氯地平、拜新同、伲福达、心痛定。我说,你这好比去饭店点菜,来一个炒花生米、煮花生米、醋泡花生米,看起来是好几样菜,但实际上都是同一种。这几个药都是一家子,出去打架都是一个招式,再怎么加量也不好使。怎么办?别点花生米了,再拍个黄瓜啥的吧!
3) 代文(缬沙坦)
血管紧张素受体拮抗剂,作用是抑制血管紧张素受体的活性。类似药物:科素亚、厄贝沙坦等;
4) 洛汀新(贝那普利)
血管紧张素II转换酶抑制剂,作用是抑制血管紧张素II转换酶的作用。这两种药物都是RAS系统的阻断剂,针对透析患者高血压另外一个重要机理的用药。洛汀新的副作用是咳嗽和高血钾。
5) 倍他乐克
β受体阻断剂。作用是降压和降低心率。副作用:心率过缓,哮喘等等。
6) 特拉唑嗪
α受体阻断剂。降压效果比较明显。还可抑制前列腺增生的程度。副作用:体位性低血压。因此晚上服用。
2. 纠正贫血药物
纠正贫血的目标值:110g/L。
1) 促红素(环尔博、怡宝)
我们临床上很多患者的贫血纠正不是很理想,首先需要考虑的是EPO的用量不够。最近很多患者每次打环尔博的量加倍了之后,血色素上升的速度很快。当然,如果加量之后,还不能很好的纠正,则要考虑其他的因素了,如是否存在出血、感染以及更为罕见的抗促红素抗体的形成等等。
2) 铁剂(乳酸亚铁、蔗糖铁)
透析患者首选还是静脉铁。我们现在面临的问题是静脉铁补充过多,一查血清铁,都高的不得了,这种情况会增加感染的风险。因此,一般来讲,透析患者蔗糖铁的用量是每1-2周使用一支即可。在发生感染的情况下,不能使用铁剂。
3) 叶酸
这也是合成血红蛋白的组成成分,可常规吃一点,但由于食物中叶酸含量十分丰富,不吃问题也不大。
4) 生血宁
这是最近一个公司的产品,是叶绿素的提取物,据说有类似于促红素的效果。但是是自费药,价格比较昂贵,如果经济情况不佳就不主张用了。
3. 防治钙磷代谢紊乱和继发性甲旁亢的药物
这部分内容刚才卞维静主任已经讲的非常详细了,就不多讲了。
1) 醋酸钙和碳酸钙
主要用于结合食物中的磷。但要防止高钙血症。
2) 氢氧化铝
也是磷结合剂。可短期内应用。
3) 骨化三醇
根据不同的PTH水平给予不同的用量。
4. 抗凝剂
1) 肝素
最为常用的抗凝剂。其应用应个体化,即首剂加维持量。在透析结束前1小时停用。不良反应包括:过敏、血小板减少、过度出血、高脂血症等等。
2) 低分子肝素
由肝素降解而来,抗凝效果更好,副作用更少,价格较昂贵,尚未列入医保。
3) 阿加曲班
当发生血小板减少时,首先需要考虑肝素诱发的血小板减少症(HIT)。这种情况下,不能继续使用肝素或者低分子肝素抗凝。阿加曲班是一种凝血酶III的是一种凝血酶III的抑制剂,是比较理想的抗凝剂。但价格昂贵,自费药物。注意监测肝功能。
5. 纠正酸中毒
1) 碳酸氢钠
我们目前的透析模式是碳酸盐透析,在透析中就已经能够很好的纠正酸中毒了。但是由于透析是一个间断的过程,在不透析的日子里,往往还是存在比较严重的酸中毒的。因此,目前主流观点是主张服用碳酸氢钠来纠正酸中毒的。
6. 其他
1) 左卡尼汀
左旋肉碱是脂肪代谢产生能量所必须的载体物质,如果说能量相当于大同产的煤,那么肉碱就如同从线粒体内开出的火车。肉碱的最初应用是用于先天性肉碱缺乏症的患者,这些患者由于肉碱缺乏,会出现肌无力、心肌病、肝功能紊乱等症状,感染风险增加。透析过程中,游离的肉碱70%被清除出去,因此,有可能会导致一些疲乏、肌肉无力等症状,补充肉碱可能会对部分患者有所帮助,如降低心肌病变发生率,改善食欲、预防低血压等等。但目前也有相反的观点,认为输入左卡尼汀益处不大。加之此药为自费药,因此患者可结合自身的经济情况酌情使用。
xiǎo sū dá
2 英文参考saleratus
Sodium bicarbonate,edible
3 小苏打药典标准3.1 品名3.1.1 中文名小苏打
3.1.2 汉语拼音Tansuanqingna
3.1.3 英文名
Sodium Bicarbonate
3.2 分子式与分子量NaHCO3 84.01
3.3 含量或效价规定本品含NaHCO3应为99.5%~100.5%(供注射、血液透析用),或不得少于99.0%(供口服用)。
3.4 性状本品为白色结晶性粉末;无臭,味咸;在潮湿空气中即缓缓分解;水溶液放置稍久,或振摇,或加热,堿性即增强。
本品在水中溶解,在乙醇中不溶。
3.5 鉴别本品的水溶液显钠盐与碳酸氢盐的鉴别反应(2010年版药典二部附录Ⅲ)。
3.6 检查3.6.1 堿度取本品0.20g,加水20ml使溶解,依法测定(2010年版药典二部附录Ⅵ H),pH值应不高于8.6。
3.6.2 溶液的澄清度取本品1.0g,加水20ml溶解后,溶液应澄清(供注射、血液透析用);或与2号浊度标准液(2010年版药典二部附录Ⅸ B)比较,不得更浓(供口服用)。
3.6.3 氯化物取本品1.5g(供注射、血液透析用)或0.15g(供口服用),加水溶解使成25ml,滴加硝酸使成微酸性后,置水浴中加热除尽二氧化碳,放冷,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅷ A),与标准氯化钠溶液3.0ml制成的对照液比较,不得更浓[0.002%(供注射、血液透析用)或0.02%(供口服用)]。
3.6.4 硫酸盐取本品3.0g(供注射、血液透析用)或0.50g(供口服用),加水溶解使成40ml,滴加盐酸使成微酸性后,置水浴中加热以除尽二氧化碳,放冷,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅷ B),与标准硫酸钾溶液1.5ml制成的对照液比较,不得更浓[0.005%(供注射、血液透析用)或0.03%(供口服用)]。
3.6.5 铵盐取本品1.0g,加氢氧化钠试液10ml,加热,发生的蒸气遇湿润的红色石蕊试纸不得变蓝色。
3.6.6 干燥失重取本品4.0g,置硅胶干燥器中干燥4小时,减失重量不得过0.25%(2010年版药典二部附录Ⅷ L)。
3.6.7 铝盐取本品1.0g(供血液透析用)两份,分别置100ml聚乙烯量瓶中,小心加入硝酸4ml,超声处理30分钟使溶解,一份用水稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另一份中加标准铝溶液[精密量取铝单元素标准溶液适量,用水定量稀释制成每1ml中含铝(Al)1μg的溶液]2.0ml,用水稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。以4%硝酸溶液为空白。照原子吸收分光光度法(2010年版药典二部附录Ⅳ D第二法),在309.8nm的波长处分别测定,应符合规定(0.0002%)。
3.6.8 铜盐取本品1.0g(供血液透析用)两份,分别置100ml聚乙烯量瓶中,小心加入硝酸4ml,超声处理30分钟使溶解,一份用水稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另一份中加标准铜溶液[精密量取铜单元素标准溶液适量,用水定量稀释制成每1ml中含铜(Cu)1μg的溶液]1.0ml,用水稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。以4%硝酸溶液为空白。照原子吸收分光光度法(2010年版药典二部附录Ⅳ D第二法),在324.8nm的波长处分别测定,应符合规定(0.0001%)。
3.6.9 钙盐取本品1.0g,加新沸过的冷水50ml溶解后,加氨试液1ml与草酸铵试液2ml,摇匀,放置1小时;如发生浑浊,与标准钙溶液(精密称取碳酸钙0.125g,置500ml量瓶中,加水5ml与盐酸0.5ml的混合液使溶解,并用水稀释至刻度,摇匀,每1ml相当于0.1mg的Ca)1.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.01%(供注射、血液透析用)]。
3.6.10 铁盐取本品3.0g(供注射、血液透析用)或1.0g(供口服用),加水适量溶解后,加稀硝酸使成微酸性,煮沸1分钟,放冷,用水稀释制成25ml,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅷ G),与标准铁溶液1.5ml制成的对照液比较,不得更深[0.0005%(供注射、血液透析用)或0.0015%(供口服用)]。
3.6.11 重金属取本品4.0g,加稀盐酸19ml与水5ml后,煮沸5分钟,放冷,加酚酞指示液1滴,并滴加氨试液至溶液显粉红色,放冷,加醋酸盐缓冲液(pH 3.5) 2ml与水适量使成25ml,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅷ H第一法),含重金属不得过百万分之五。
3.6.12 砷盐取本品1.0g,加水23ml溶解后,加盐酸5ml,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅷ J第一法),应符合规定(0.0002%)。
3.7 含量测定取本品约1g,精密称定,加水50ml使溶解,加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴,用盐酸滴定液(0.5mol/L)滴定至溶液由绿色转变为紫红色,煮沸2分钟,冷却至室温,继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。每1ml盐酸滴定液(0.5mol/L)相当于42.00mg的NaHCO3。
3.8 类别抗酸药。
3.9 贮藏密封,在干燥处保存。
3.10 制剂(1)小苏打片 (2)小苏打注射液
3.11 版本《中华人民共和国药典》2010年版
4 小苏打说明书4.1 药品名称小苏打
4.2 英文名称Sodium Bicarbonate
4.3 小苏打的别名重碳酸钠;碳酸氢钠;酸式碳酸钠;重曹;烷堿;焙堿;Bicarbonate Sodium
4.4 分类循环系统药物 >心肺复苏及抗休克药物
4.5 剂型1.片剂:每片0.3g,0.5g;
2.注射剂:0.5g(10ml),5g(100ml),12.5g(250ml)。
4.6 小苏打的药理作用小苏打为抗酸药。系弱堿,其抗酸作用快、弱而短暂,遇酸发生中和反应。口服吸收或静脉输注后,能直接增加机体的堿贮备。当用于防治代谢性酸中毒时,在体内发生反应。二氧化化碳由肺排出体外,Na 留在体内或以钠盐的某些形式随尿排出体外。正常人服用后,由于增加HCO3的排泄而起堿化尿液的作用。小苏打中含钠27.38%,1g NaHCO3相当11.9mmol(11.9 mEq)的钠。
1.小苏打作为吸收性抗酸药,口服后能迅速中和胃酸,减弱或缓解胃酸对溃疡面的 *** 和侵蚀作用。
2.静脉输注能直接增加机体的堿储备,使体内氢离子浓度降低。
3.以其溶液冲洗 *** 或坐浴,使 *** 呈堿性,可抑制真菌繁殖。
4.3%溶液有软化耵聍作用。
4.7 小苏打的药代动力学碳酸氢小苏打口服后易从胃肠道吸收,15min内发挥作用,持续1~2h,于3~4h内由尿中排泄。静脉滴注小苏打注射剂能较快地发挥作用。
4.8 小苏打的适应证口服主要用于胃酸过多症,堿化尿液(可防止服用磺胺类药物后的尿结晶或尿闭),提高氨基糖苷类等抗生素治疗泌尿道感染的疗效,促进尿酸排泄,有利于尿酸结石的防治。亦可促进弱酸性药物的排泄,故可用做这些药物中毒时的辅助治疗剂。静脉滴注用于严重代谢性酸中毒的治疗,也用于高钾血症、各种原因引起的伴有酸中毒症状的休克、早期脑栓塞以及严重哮喘持续状态经其他药物治疗无效者。一定浓度的溶液用做生物堿、汞、铁及有机磷酸酯类药物(美曲膦酯除外)中毒后的洗胃液。4%溶液冲洗 *** 或坐浴,治疗真菌性 *** 炎,5%溶液滴耳以软化耵聍等。
4.9 小苏打的禁忌证1.严重溃疡病患者禁用。
2.充血性心力衰竭和肾衰竭的酸中毒者不宜使用小苏打。
3.由于迅速的堿化作用,对低钙血症患者可能会产生阵发性抽搐,而对缺钾患者则可能产生低钾血症。对这些患者应避免静脉给予小苏打。
4.勿长期以小苏打治疗。由于呕吐、胃肠抽液、应用利尿剂而致大量氯离子丧失者,以及心脏病、高血压、肾功能不良、消化性溃疡患者禁用。
4.10 注意事项1.(1)少尿或无尿(因能增加钠负荷)时;(2)钠潴留并有水肿时,如肝硬化、充血性心力衰竭、肾功能不全、妊娠高血压综合征;(3)高血压(因钠负荷增加可能加重原发性高血压);(4)孕妇。
2.药物对儿童的影响:6岁以下儿童使用制酸剂应慎重,因小儿对症状的主诉不清楚,易延误病情。
3.药物对哺乳的影响:小苏打可经乳汁分泌,但对婴儿的影响尚无资料。
4.药物对检验值或诊断的影响:对胃酸分泌试验或血、尿pH测定结果有明显影响。
5.用药前后及用药时应当检查或监测:(1)动脉血气分析或二氧化化碳结合化碳结合力;(2)测定血清碳酸氢根离子浓度及血清钠、钾、氯、钙浓度:(3)肾功能;(4)尿pH值。
6.口服小苏打后1~2h内不宜服用任何药物。
7.小苏打疗程不易过长,以免发生代谢性堿中毒和钠大量潴留。
8.治疗轻至中度代谢性酸中毒时,宜口服给药;而治疗重度代谢性酸中毒(如严重肾脏病、循环衰竭、心肺复苏、体外循环及严重的原发性乳酸性酸中毒、糖尿病酮症酸中酮症酸中毒等)时,则应静脉内用药。
9.小苏打在治疗溃疡病时常与其他堿性药物合用,也常与解痉药合用。
10.因小苏打所致的腹胀、腹痛会影响疾病诊断,故阑尾炎或有类似症状而未确诊者及消化道出血原因不明者,不作口服用药。
11.口服用药还应注意下列问题:(1)小苏打制酸作用迅速、强烈而短暂;(2)成人每天最大用量,60岁以下者为16.6g(200mmol钠),60岁以上者为8.3g(100mmo1钠);(3)除非特殊原因,否则作制酸药应用最大剂量时一般不超过2周;(4)用作制酸药,应于餐后1~3h及睡前服用。
12.下列情况不作静脉内用药:(1)代谢性或呼吸性堿中毒;(2)呕吐或持续胃肠引流;(3)低钙血症。
13.静脉用药还应注意下列问题:(1)静脉应用的浓度范围为1.5%(等渗)~8.4%;(2)应从小剂量开始,根据血pH值、碳酸氢根浓度变化决定追加剂量;(3)短时期大量静脉输注可致严重堿中毒、低钾血症和低钙血症。当高渗溶液用量超过每分钟10ml时,可导致高钠血症、脑脊液压力下降甚至颅内出血,此在新生儿及2岁以下小儿更易发生。故以5%浓度的溶液输注时,速度不能超过每分钟8mmol钠。但在心肺复苏时,因存在致命的酸中毒,应快速静脉输注。
14.由于可能产生沉淀或分解反应,小苏打不宜与重酒石酸间羟胺、四环素、庆大霉霉素、肾上腺素、多巴酚丁胺、苯妥英钠、钙盐等同瓶静脉滴注。
4.11 小苏打的不良反应嗳气、胃扩张、肠胃胀气。代谢方面反应有:代谢性堿中毒、电解质失衡钠潴留(肺水肿)、低钙血症(手足搐搦)、低钾血症。新生儿快速静脉滴注可致高钠血症、脑脊液压力降低、颅内出血。其他可有:奶堿综合征,静脉滴注外渗可致严重的组织损伤,还有脱水、肾结石或结晶、损害肾功能等。在注射部位有药液溢出,会引起化学性蜂窝织炎。
4.12 小苏打的用法用量1.作为抗酸剂,成人于饭前口服0.5~1g,每天3次。
2.纠正酸中毒,可用5%注射剂,成人每次100~200ml,小儿5ml/kg,静脉输注。
3.治疗真菌性 *** 炎可用4%溶液 *** 冲洗或坐浴。
4.软化耵聍可用3%溶液滴耳,每天3~4次。
5.与磺胺药合用堿化尿液时可与磺胺药等量同服。
4.13 药物相互作用1.小苏打能显著提高磺胺类药及乙酰化代谢产物的溶解度,避免或减少磺胺结晶的形成。
2.小苏打可增加左旋多巴的口服吸收率。
3.与氨基糖苷类药物合用时可因尿pH值升高,而使氨基糖苷类药物药效增强。
4.与肾上腺皮质激素(尤其是具有较强盐皮质激素作用者)、促肾上腺皮质激素、雄激素合用时,易发生高钠血症和水肿。
5.与苯丙胺、奎尼丁合用,使后两者经肾脏排泄减少,易蓄积中毒。
6.小苏打可使尿液堿化,影响肾脏对麻黄堿的排泄,故合用时后者剂量应减小。
7.与排钾利尿药合用,增加发生低氯性堿中毒的危险性。
8.与含钙药物合用,可致乳堿综合征。
9.与抗凝药(如华法林和M-胆堿酯酶药等)或H2受体拮抗剂(如西咪替丁、雷尼替丁等)合用,后二者的吸收减少。
10.与胃蛋白酶合剂、维生素C等酸性药物合用可降低各自疗效,故不宜合用。
11.与抗毒蕈堿药合用时,后者的吸收减少,疗效减弱。
12.与口服四环素同用时,可因胃液pH值升高,而致四环素吸收减少。
13.小苏打可减少口服铁剂的吸收,故两药服用时间应尽量分开。
14.小苏打可增加肾脏对弱酸性药物(如苯巴比妥、水杨酸制剂等)的排泄,从而降低了后者的血清浓度。
15.钠负荷增加使肾脏排泄锂增多,故小苏打与锂制剂合用时,锂制剂的用量应酌情调整。
16.小苏打堿化尿液后能抑制乌洛托品转化成甲醛,从而抑制其治疗作用,故不宜与乌洛托品合用。
17.小苏打与大量牛奶或奶制品同时服用,可产生乳-堿综合征。
4.14 专家点评
蛋白质的分离纯化方法很多,主要有:
(一)根据蛋白质溶解度不同的分离方法
1、蛋白质的盐析
中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析,将大量盐加到蛋白质溶液中,高浓度的盐离子(如硫酸铵的SO4和NH4)有很强的水化力,可夺取蛋白质分子的水化层,使之“失水”,于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出。盐析时若溶液pH在蛋白质等电点则效果更好。由于各种蛋白质分子颗粒大小、亲水程度不同,故盐析所需的盐浓度也不一样,因此调节混合蛋白质溶液中的中性盐浓度可使各种蛋白质分段沉淀。
影响盐析的因素有:(1)温度:除对温度敏感的蛋白质在低温(4度)操作外,一般可在室温中进行。一般温度低蛋白质溶介度降低。但有的蛋白质(如血红蛋白、肌红蛋白、清蛋白)在较高的温度(25度)比0度时溶解度低,更容易盐析。(2)pH值:大多数蛋白质在等电点时在浓盐溶液中的溶介度最低。(3)蛋白质浓度:蛋白质浓度高时,欲分离的蛋白质常常夹杂着其他蛋白质地一起沉淀出来(共沉现象)。因此在盐析前血清要加等量生理盐水稀释,使蛋白质含量在2.5-3.0%。
蛋白质盐析常用的中性盐,主要有硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、氯化钠、磷酸钠等。
其中应用最多的硫酸铵,它的优点是温度系数小而溶解度大(25度时饱和溶液为4.1M,即767克/升;0度时饱和溶解度为3.9M,即676克/升),在这一溶解度范围内,许多蛋白质和酶都可以盐析出来;另外硫酸铵分段盐析效果也比其他盐好,不易引起蛋白质变性。硫酸铵溶液的pH常在4.5-5.5之间,当用其他pH值进行盐析时,需用硫酸或氨水调节。
蛋白质在用盐析沉淀分离后,需要将蛋白质中的盐除去,常用的办法是透析,即把蛋白质溶液装入秀析袋内(常用的是玻璃纸),用缓冲液进行透析,并不断的更换缓冲液,因透析所需时间较长,所以最好在低温中进行。此外也可用葡萄糖凝胶G-25或G-50过柱的办法除盐,所用的时间就比较短。
2、等电点沉淀法
蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小,因而溶解度也最小,各种蛋白质的等电点有差别,可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀,但此法很少单独使用,可与盐析法结合用。
3、低温有机溶剂沉淀法
用与水可混溶的有机溶剂,甲醇,乙醇或丙酮,可使多数蛋白质溶解度降低并析出,此法分辨力比盐析高,但蛋白质较易变性,应在低温下进行。
(二)根据蛋白质分子大小的差别的分离方法
1、透析与超滤
透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。
超滤法是利用高压力或离心力,强使水和其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质留在膜上,可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质。
2、凝胶过滤法
也称分子排阻层析或分子筛层析,这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶(Sephadex
ged)和琼脂糖凝胶(agarose gel)。
(三)根据蛋白质带电性质进行分离
蛋白质在不同pH环境中带电性质和电荷数量不同,可将其分开。
1、电泳法
各种蛋白质在同一pH条件下,因分子量和电荷数量不同而在电场中的迁移率不同而得以分开。值得重视的是等电聚焦电泳,这是利用一种两性电解质作为载体,电泳时两性电解质形成一个由正极到负极逐渐增加的pH梯度,当带一定电荷的蛋白质在其中泳动时,到达各自等电点的pH位置就停止,此法可用于分析和制备各种蛋白质。
2、离子交换层析法
离子交换剂有阳离子交换剂(如:羧甲基纤维素;CM-纤维素)和阴离子交换剂(二乙氨基乙基纤维素;DEAE?FONT
FACE="宋体"
LANG="ZH-CN">纤维素),当被分离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时,带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂上,随后用改变pH或离子强度办法将吸附的蛋白质洗脱下来。(详见层析技术章)
(四)根据配体特异性的分离方法-亲和色谱法
亲和层析法(aflinity
chromatography)是分离蛋白质的一种极为有效的方法,它经常只需经过一步处理即可使某种待提纯的蛋白质从很复杂的蛋白质混合物中分离出来,而且纯度很高。这种方法是根据某些蛋白质与另一种称为配体(Ligand)的分子能特异而非共价地结合。其基本原理:蛋白质在组织或细胞中是以复杂的混合物形式存在,每种类型的细胞都含有上千种不同的蛋白质,因此蛋白质的分离(Separation),提纯(Purification)
和鉴定(Characterization)是生物化学中的重要的一部分,至今还没的单独或一套现成的方法能移把任何一种蛋白质从复杂的混合蛋白质中提取出来,因此往往采取几种方法联合使用。
细胞的破碎
1、高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。
2、玻璃匀浆器匀浆:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。
3、超声波处理法:用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用于微生物材料,用大肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,在1KG至10KG频率下处理10-15分钟,此法的缺点是在处理过程会产生大量的热,应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。
4、反复冻融法:将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。
5、化学处理法:有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好。
无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。
浓缩、干燥及保存
一、样品的浓缩
生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀,为了保存和鉴定的目的,往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的:
1、减压加温蒸发浓缩
通过降低液面压力使液体沸点降低,减压的真空度愈高,液体沸点降得愈低,蒸发愈快,此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。
2、空气流动蒸发浓缩
空气的流动可使液体加速蒸发,铺成薄层的溶液,表面不断通过空气流;或将生物大分子溶液装入透析袋内置于冷室,用电扇对准吹风,使透过膜外的溶剂不沁蒸发,而达到浓缩目的,此法浓缩速度慢,不适于大量溶液的浓缩。
3、冰冻法
生物大分子在低温结成冰,盐类及生物大分子不进入冰内而留在液相中,操作时先将待浓缩的溶液冷却使之变成固体,然后缓慢地融解,利用溶剂与溶质融点介点的差别而达到除去大部分溶剂的目的。如蛋白质和酶的盐溶液用此法浓缩时,不含蛋白质和酶的纯冰结晶浮于液面,蛋白质和酶则集中于下层溶液中,移去上层冰块,可得蛋白质和酶的浓缩液。
4、吸收法
通过吸收剂直接收除去溶液中溶液分子使之浓缩。所用的吸收剂必需与溶液不起化学反应,对生物大分子不吸附,易与溶液分开。常用的吸收剂有聚乙二醇,聚乙稀吡咯酮、蔗糖和凝胶等,使用聚乙二醇吸收剂时,先将生物大分子溶液装入半透膜的袋里,外加聚乙二醇复盖置于4度下,袋内溶剂渗出即被聚乙二醇迅速吸去,聚乙二醇被水饱和后要更换新的直至达到所需要的体积。
5、超滤法
超滤法是使用一种特别的薄膜对溶液中各种溶质分子进行选择性过滤的方法,不液体在一定压力下(氮气压或真空泵压)通过膜时,溶剂和小分子透过,大分子受阻保留,这是近年来发展起来的新方法,最适于生物大分子尤其是蛋白质和酶的浓缩或脱盐,并具有成本低,操作方便,条件温和,能较好地保持生物大分子的活性,回收率高等优点。应用超滤法关键在于膜的选择,不同类型和规格的膜,水的流速,分子量截止值(即大体上能被膜保留分子最小分子量值)等参数均不同,必须根据工作需要来选用。另外,超滤装置形式,溶质成份及性质、溶液浓度等都对超滤效果的一定影响。Diaflo
超滤膜的分子量截留值:
膜名称分子量截留值孔的大的平均直径
XM-300300,000140
XM-200100,00055
XM-5050,00030
PM-30 30,00022
UM-2020,00018
PM-1010,00015
UM-21,00012
UM05500 10
用上面的超滤膜制成空心的纤维管,将很多根这样的管拢成一束,管的两端与低离子强度的缓冲液相连,使缓冲液不断地在管中流动。然后将纤维管浸入待透析的蛋白质溶液中。当缓冲液流过纤维管时,则小分子很易透过膜而扩散,大分子则不能。这就是纤维过滤秀析法,由于透析面积增大,因而使透析时间缩短10倍。
现象:
1、胶体凝聚,变成沉淀,盐酸相当于电解质,使胶体凝聚;
2、沉淀溶解,氢氧化铁与盐酸反应,生成氯化铁和水;
胶体粒子吸附溶液中的离子而带电,当吸附了正离子时,胶体粒子荷正电,吸附了负离子则荷负电。不同情况下胶体粒子容易吸附何种离子,与被吸附离子的本性及胶体粒子表面结构有关。
扩展资料:
胶体的应用:
1、农业生产:土壤的保肥作用.土壤里许多物质如粘土腐殖质等常以胶体形式存在。
2、医疗卫生:血液透析,血清纸上电泳利用电泳分离各种氨基酸和蛋白质。医学上越来越多地利用高度分散的胶体来检验或治疗疾病,如胶态磁流体治癌术是将磁性物质制成胶体粒子,作为药物的载体,在磁场作用下将药物送到病灶,从而提高疗效。
3、日常生活:制豆腐、豆浆、牛奶和粥的原理(胶体的聚沉),明矾净水。
参考资料来源:百度百科-氢氧化铁胶体
参考资料来源:百度百科-胶体