用10%乙酸除去蛋白质的原理
用10%乙酸除去蛋白质的原理：乙酸会使蛋白质变性沉淀，然后通过离心分离蛋白质。没变性的蛋白质在溶液里具有一定的溶解度，但是乙酸加入到溶液之后使蛋白质变性，溶解度变小，蛋白质蜷缩成团，然后聚集，最后沉淀，通过离心取上清液就可以去除蛋白质。
乳清蛋白（wheyprotein）被称为蛋白之王，是从牛奶中提取的一种蛋白质。因此， 变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响，改变其分子内部结构和性 蛋白质变性 质的作用。一般认为蛋白质的二级结构和三级结构有了改变或遭到破坏。
简介
乙酸在自然界分布很广，例如在水果或者植物油中，但是主要以酯的形式存在。在动物的组织内、排泄物和血液中以游离酸的形式存在。许多微生物都可以通过发酵将不同的有机物转化为乙酸。
乙酸是醋的主要成分，而醋几乎贯穿了整个人类文明史。乙酸发酵细菌（醋酸杆菌）能在世界的每个角落发现，每个民族在酿酒的时候，不可避免的会发现醋——它是这些酒精饮料暴露于空气后的自然产物。如中国就有杜康的儿子黑塔因酿酒时间过长得到醋的说法。
有机溶剂沉淀蛋白质
可与水混合的有机溶剂，如酒精、甲醇、丙酮等，对水的亲和力很大，能破坏蛋白质颗粒的水化膜，在等电点时使蛋白质沉淀。在常温下，有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性。例如酒精消毒灭菌就是如此，但若在低温条件下，则变性进行较缓慢，可用于分离制备各种血浆蛋白质。
我不是很懂，不过因为乙酸对水的亲和力也很大，所以应该也会引起聚沉
不过一般直接用盐析就行了，如Na2SO4
最普通的解释：没变性的蛋白质在溶液里具有一定的溶解度，但是乙酸加入到溶液之后使蛋白质变性，溶解度变小，蛋白质蜷缩成团，然后聚集，最后沉淀，通过离心取上清液就可以去除蛋白质。
三氯乙酸沉淀蛋白质不可逆。
三氯乙酸在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐，作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变，暴露出较多的疏水性基团，使之聚集沉淀。
三氯乙酸用作化学试剂、蛋白质沉淀及色谱分析试剂；三磷酸腺苷、细胞色素丙和胎盘脂多糖提取剂和农药除草剂；是杀虫剂毒死蜱的中间体，也是医药中间体；是医药上的除疣剂和收敛剂。
三氯乙酸沉淀蛋白方法：
加1/4体积的 TCA+DOC于蛋白质组分（置1.5-ml聚丙烯微量离心管中），至TCA的终浓度为20%（w/v），震荡混合，冰上解育20~30 min。
微型离心机，室温离心15 min。沉淀物如可见，为粘稠的带黄褐色的胶状物。用一精细的巴氏吸管吸出上清。努力除去尽可能多的上清。如取100ul样品进行沉淀，沉淀物将是可见的。
加3倍体积原样品体积的丙酮（室温），样品在室温下静置约10min，使TCA+DOC溶于丙酮。
室温离心15min，其时，沉淀物的大小和物理特性类似于一点灰尘。约10ug或更多一点的蛋白质即可看见。有时，会得到白色的盐类（如KCl等）沉淀物。
用极精细的巴氏吸管移去上清。沉淀物置冰上干燥10 min(敞开1.5-ml离心管的盖)。干燥的沉淀物可长时间（>1 个月）地保存于-20℃。
1、凯氏定氮法
准备4个50mL凯氏烧瓶并标号，想1、2号烧瓶中加入定量的蛋白质样品，另外两个烧瓶作为对照，在每个烧瓶中加入硫酸钾-硫酸铜混合物，再加入浓硫酸，将4个烧瓶放到消化架上进行消化。
消化完毕后进行蒸馏，全部蒸馏完毕后用标准盐酸滴定各烧瓶中收集的氨量，直至指示剂混合液由绿色变回淡紫红色，即为滴定终点，结算出蛋白质含量。
2、双缩脲法
双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法，硫铵不干扰显色， Cu2+与蛋白质的肽键，以及酪氨酸残基络合，形成紫蓝色络合物，此物在540nm波长处有最大吸收。
利用标准蛋白溶液和双缩脲试剂绘制标准曲线，将待测血清与硫酸钠在待测试管中混合，并只加入硫酸钠不含血清的试管作对照，将两支试管加入等量的双缩脲试剂，混合后于37℃环境中放置10分钟，在540nm波长进行比色，以对照管调零，读取吸光度值，标准曲线上直接查出蛋白质含量。
3、酚试剂法
取6支试管标号，前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，不加标准蛋白溶液，每支试管液体总量加入蒸馏水补足而保持一致，混合均匀，在室温下放置30分钟，以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。
4、紫外吸收法
大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收，这是由于蛋白质中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在，可用于测定0.1～0.5mg/mL含量的蛋白质溶液。
取9支试管分别标号，前8支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，1号试管不加标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，而不加标准蛋白溶液，每支试管液体总量通过加入蒸馏水补足而保持一致，将液体混合均匀，在280nm波长处进行比色，记录吸光度值。
5、考马斯亮蓝法
Bradford浓染液的配制：将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇，加入100ml85%的磷酸，用蒸馏水补充至200ml，此染液放4℃至少6个月保持稳定。
标准曲线蛋白质样本的准备：尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品，测定抗体，可用纯化的抗体作为标准。待测样本是未知的，也可用抗体作为标准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之间绘制标准曲线。
将待测样本溶于缓冲溶液中，该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同(最好用PBS)。按1：4用蒸馏水稀释浓染料结合溶液，出现沉淀，过滤除去。
每个样本加5ml稀释的染料结合溶液，作用5～30min。染液与蛋白质结合后，将由红色变为蓝色，在595nm波长下测定其吸光度。注意，显色反应不得超过30min。根据标准曲线计算待测样本的浓度。
参考资料来源：百度百科-蛋白质测定
参考资料来源：百度百科-考马斯亮蓝法
乙酸锌沉淀蛋白质原理为乙酸锌可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出。
蛋白质分子聚集而从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。由于水化层和双电层的存在，蛋白质溶液是一种稳定的胶体溶液。如果向蛋白质溶液中加入某种电解质，以破坏其颗粒表面的双电层或调节溶液的pH，使其达到等电点，蛋白质颗粒因失去电荷变得不稳定而将沉淀析出。
乙酸锌是一种无机物，为有光泽的六面体鳞片或片晶体，有乙酸气味，由氧化锌与乙酸作用而得。一般用于制锌盐、也用作媒染剂、木材防腐剂、试剂等。
乙酸锌有光泽的六面体鳞片或片晶体，有乙酸气味。溶于水和乙醇。在100℃失去结晶水，熔点237度。一般由氧化锌与乙酸作用而得。
以上内容参考：百度百科-乙酸锌
