邻甲苯胺法本法中用冷水冷却的目的是什么

1.本法不需要除去蛋白质，邻甲苯胺试剂只与糖醛起反应，不与血中其他还原物质起反应。故测定值较Folin-吴宪法为低。

2.显色反应与水的含量有关，故应使标准管和测定管的含水量一致。

3.温度对显色反应有明显影响，煮沸时间和温度应准确控制。

4.显色后颜色不稳定，室温每放置1分钟，颜色降低0.15％。

5.邻甲苯胺试剂中冰醋酸浓度很高，使用不当容易损坏比色仪器。

6.邻甲苯胺是致癌剂，测定过程中应小心使用。

：实验 23&24 胰岛素和肾上腺素 对家兔血糖浓度的影响 掌握血糖 (blood sugar) 的测定方法及 激素 (hormone) 对血糖浓度的影响。 了解血糖测定的临床意义。 实验目的与要求 机体的血糖水平受多种激素的调节而维持稳定 影响血糖的激素分为两类： 降低血糖的激素：胰岛素 (insulin) 升高血糖的激素：肾上腺素 (adrenaline) 、胰升糖素、 糖皮质激素和生长激素 血浆 (plasma) ：全血经抗凝处理后得到的液体成分， 含有凝血因子、纤维蛋白原等 血清 (serum) ：全血凝固后析出的液体， 不含纤维蛋白原 血 样 实 验 原 理 620 nm 测定待测血样的吸光度 (A) 与同样处理的葡萄糖标准溶液比较 ( 标准管法 ) 即可求得血样中葡萄糖的含量。 酸性、加热 -3 H 2 O 羟甲基糠醛 邻甲苯胺 醛亚胺（蓝色） 葡萄糖 (glucose) 邻甲苯胺法测定血糖浓度 2 、血样的采集 1 ）心脏内取血 5ml ，加入抗凝剂（草酸钠）【胰 -1 、肾 -1 】 2 ）皮下注射 胰岛素 0.5ml/kg （ 2U/kg ）， 1 小时后 1% 肾上腺素 0.4ml/kg ，半小时后 3 ）心脏内取血 5ml ，加入抗凝剂【胰 -2 、肾 -2 】 1 、动物的准备 家兔两只，禁食一晚。标记后，测量体重并记录。 实 验 步 骤 4 、邻甲苯胺法测定血糖浓度 1 ）取大试管，按 Page78 表格添加试剂 2 ）混匀各管，沸水浴中加热 10min 后取出，流水冷却。 3 ）用空白管校正吸光度零点，读取各管 620nm 的吸光度。

一，实验目的

掌握血糖的测定原理和方法；掌握血糖的正常范围及意义；熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。

二，实验原理

家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其；进行血糖测定。邻苯甲胺方法测定血糖浓度。

实验采取前后对照的方法，对家兔注射肾上腺素和胰岛素，并通过耳缘静脉采血，获取激素注射前后的血液样本，采用邻甲苯胺法处理样本，最终与标品比色得出结论。

1.调节血糖的激素有：胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长素和甲状腺素等。胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素，其他激素均使血糖升高。

2.肾上腺素升高血糖的机制主要作用于肝细胞膜受体，通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶，同时抑制糖原合成酶，导致肝糖原分解加速。胰岛素降低血糖的机制是：降低肝细胞cAMP水平，从而抑制肝磷酸化酶，激活糖原合成酶，促进肝糖原的合成；胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成，阻遏糖异生关键酶的合成；胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散，促进糖的利用。

3.血液中的葡萄糖，在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛（或称羟甲基糠醛）。后者在与邻甲苯胺缩合，生成蓝绿色的西夫式碱（Schiffbase）。其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。与同样处理的标准葡萄糖溶液比色，即可求得待测血液中葡萄糖的含量。

三，实验材料

1.材料：家兔两只,刀片，草酸钠，小烧杯。

2.试剂：①肾上腺素(1mg／lml)②胰岛素(20单位／ml)③碘酒、消毒酒精④饱和硼酸溶液⑤邻甲苯胺-硼酸⑥5％ 三氯醋酸溶液⑦饱和苯甲酸溶液⑧标准葡萄糖贮存液⑨标准葡萄糖应用液

四，实验方法

1.取健康正常家兔一只，实验前饥饿14~16h左右，称体重。

2.耳缘静脉采血。小刀刮去耳缘的毛，用酒精棉球擦拭使其充血，再用干棉球擦干。 刀片划开耳缘静脉，使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中，注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。采集完毕后干棉球压迫血管止血。

3.给家兔注射肾上腺素（0.5mg/只），半小时后同样方法采得血液。

4.缓缓放入洁净试管内，加5%三氯醋酸3.6ml，同时摇动使之充分混匀。3000rpm离心5min，制得无蛋白血滤液（上清液）。

5.取四支试管，分别加入2.5ml邻甲苯胺试剂。并向试管1加入1ml蒸馏水，试管2加入1ml标准葡萄糖应用液，试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液，试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。

6.混匀后沸水加热8min，取出并用自来水冲洗试管使之冷却。而后置于722型分光光度计630nm比色，空白管校正零点。

7.表加试剂如下表：

ml

空白管

标准管

待测管甲（药前）

待测管乙（药后）

蒸馏水

1.0

―

－

－

标准葡萄糖应用液（1mg/ml）

－

1.0

－

－

无蛋白血滤液（药前）

－

－

1.0

－

无蛋白血滤液（药后）

－

－

－

1.0

邻甲苯胺试剂

2.5

2.5

2.5

2.5

同理，对家兔进行肾上腺素注射（剂量为5单位/公斤体重）并进行上述步骤，最终得出结果。

五，实验结果

据试验，在注射胰岛素实验中，家兔重量为2.95公斤，依照比例注射15单位的胰岛素。在注射肾上腺激素的实验中，家兔重量为2.90公斤，注射1mg的肾上腺激素。

血糖测定：（葡萄糖标准液浓度为5.50mmol/L）

空白管

标准管

注 射胰岛素前

注射 胰岛素后

注射肾上腺激素前

注射肾上腺激素后

血清/ml

-

-

0.02

0.02

0.02

0.02

葡萄糖标准液/ml

-

0.02

-

-

-

-

生理盐水/ml

0.02

-

-

-

-

-

酶酚混合液/ml

1.5

1.5

1.5

1.5

1.5

1.5

曝光值

0

0.135

0.363

0.116

0.315

0.508

由此得出：

注射胰岛素前血糖浓度为14.79mmol/L。

注射胰岛素后血糖浓度为4.73 mmol/L。

注射肾上腺激素前血糖浓度为12.83 mmol/L。

注射肾上腺激素后血糖浓度为20.70 mmol/L。

得出结论：注射胰岛素可有效的降低血糖。2．注射肾上腺素能使血糖上升。

六，讨论

实验中要注意如下问题：

1.采血及注射激素时，应尽量使家兔保持安静。家兔不安静的情况下，肾上腺素分泌增多，血糖浓度升高，对实验结果有影响。

2.采血后要及时分离出血浆，避免溶血。溶血时红细胞内糖类扩散到血浆中，会对实验结果有影响。

3.采血量要准确，不能采得太少不够实验需要的血量，也不能采得太多伤及家兔。

4.由于血细胞不断从血浆摄取葡萄糖加以利用，因此, 采血后及时进行检测，否则血糖浓度将逐渐降低。

干化学葡萄糖氧化酶法：特异强、价廉、方法简单，是目前国内首选的测定血糖方法。其正常值：空腹全血为3.5-5.3毫摩尔/升（55-95毫克/分升），血浆为3.9-5.1毫摩尔/升（70-110毫克/分升）。 

干化学邻甲苯胺法：结果较可靠，由于血中绝大部分非糖物质及抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下来，因而不易出现假性过高或过低。其正常值：空腹全血为3.3-5.5毫摩尔/升（50-100毫克/分升），血浆为3.9-5.4毫摩尔/升（70-115毫克/分升）。

扩展资料：

血糖的来源包括：

①食物消化、吸收；

②肝内储存的糖元分解；

③脂肪和蛋白质的转化。血糖的去路包括：

①氧化转变为能量；

②转化为糖原储存于肝脏、肾脏和肌肉中；

③转变为脂肪和蛋白质等其他营养成分加以储存。胰岛是体内调节血糖的血糖浓度的主要器官，肝脏储存肝糖元。此外，血糖浓度还受神经、内分泌激素的调节。

参考资料来源：百度百科-血糖

参考资料来源：百度百科-测血糖

环境中苯胺类化合物及其分析方法概述

李刚!绍兴市环境保护监测站绍兴"#$%%%&

叶明立!浙江大学化学系杭州"#%%$'&

摘要本文简单介绍苯胺类化合物的特性及危害(并对其分析方法和进展作了概述)

关键词环境苯胺类化合物分析方法

*+,--./0102345*2060278.4735/07985-:5,2.2.6 74@5902A2B

C0/52-724

DEFGHI!JKLMNOPQRPSOTMPUVPWLXYMPOWMTOPQJWLWOMP(JKLMNOPQZ[\]]]&

^_'EHIaE!bVcLTWUVPWMdeKVUOfWTg(hKViOLPQjPOSVTfOWg(kLPQlKMmZ[]]\n&

*o94/.>4pqErsGs_tutE_vawEHxtyz{|_rxq_|qGtG|x_tErxE|ryvGHEaEH_|y}sy{HzGHzEx~rqG!Gtz"pq_}_xqyzr

GHzstyIt_rrEHGHGawrEryvGHEaEH_|y}sy{HzGt_t_#E_$_z"

%7=&5/9'H#EtyH}_Hx(HEaEH_|Gx_IytE_r|y}sy{Hz(HGawxE|Ga}_xqyzr

)苯胺类化合物

苯胺类化合物为芳香胺的代表(系指苯胺分子中

的氢原子被其它功能团取代后形成的一类化合物)随

着取代基的数目和位置的不同可形成多种异构体)从

理论上讲(按照其各种取代基的不同排列组合(苯胺及

其衍生物有上百种(工业上常用的苯胺类化合物也达

数十种为多)这类化合物通常是高沸点的液体(或熔点

不高的固体(常见的苯胺等因氧化而带色)它们具有特

殊的气味(毒性很大(其中有些能通过皮肤迅速地被人

体吸收(或对人体具有致癌作用)苯胺类化合物一般均

难溶于水(而易溶于有机溶剂)

苯胺类化合物属于极性分子(由于其氮原子上有

一对孤电子(易与质子发生反应生成盐(因此具有碱

性)其中伯胺和仲胺能形成分子间氢键)

苯胺及其衍生物可以通过吸入*食入或透过皮肤

吸收而导致中毒(能通过形成高铁血红蛋白(造成人体

血液系统损害(可直接作用于肝细胞(引起中毒性肝损

害)这类化合物进入机体后易通过血脑屏障而与大量

类脂质的神经系统发生作用(引起神经系统的损害)此

外(其中一些苯胺衍生物还具有致癌和致突变的作

用+#,)

苯胺及其衍生物广泛应用于许多工业环节或成为

许多生产过程的产物+#,)这类化合物也是工业环境中

构成有毒有害废水的重要成分)苯胺类化合物除广泛

地应用于化工*印染和制药等工业生产外(还是合成药

物*染料*杀虫剂*高分子材料*炸药等的重要原料之

一)如$(-B二硝基苯胺*邻茴香胺*二乙基苯胺*二甲

基苯胺*邻甲苯胺*对硝基苯胺*邻氯对硝基苯胺*间苯

二胺以及苯胺等是染料生产的重要原料(且用量大)

.苯胺类化合物测定方法

./)色谱分析法

由于取代剂的种类复杂多样(苯胺及其衍生物是

一类理化性质差异很大的化合物的总和(对于苯胺尖

化合物的测定(报道最多的是用高效液相色谱和气相

色谱)

F_}}Gty+$,用'_t|01#'2Eu_tDE|qtyrsu_t3sB

#'柱!$4|}5-}}&(以4}ya6D水杨酸戊胺!庚胺*辛

胺&作流动相(于$#%H}($"%H}用27D1分离并检测

了脂族和芳族化合物(检测限低至%/#5#%89}I6D:

陈建村+",用经典的纸色谱技术对染料中的联苯胺类化

合物分离*富集*检测(此方法实用*方便*可靠(且分析

周期短)yHysr0tE+-,用薄层板检测邻苯二胺(用G<

第$$卷第-期增刊仪器仪表学报$%%#年'月

!三氯甲基"苯并咪唑作选择性显色指示剂#具有操作

简便$灵敏度和选择性都好的优点%&'(()(*+,-./0研

究了相关食品中生物胺的离子相互作用%并用反相高

效液相色谱分离法测定酪胺$组胺$12苯乙胺$色胺和

全体氨基酸345'6'(.70采用了预用联置柱技术和二极

管阵列液相色谱检测分析工业废水#实现了自动检测

芳香族化合物#极性芳胺类化合物和其他极性碱这一

自动检测体系的最优化%赵淑莉.80用胶束毛细管电泳

分析技术#采用9':-@//AB高效毛

细管电泳仪%=>-@二级阵列检测器#对废水中苯胺

类化合物进行测定#检测限可达==C级#此法克服了

色谱法分析时间长$试剂耗量大$操作繁杂的缺点#结

果令人满意%

DED分光光度法

目前苯胺废水的测定常采用F水和废水监测分析

方法G!第三版".H0中萘乙二胺偶氮光度法进行测定#苯

胺类化合物在酸性条件下与亚硝酸盐重氮化#再与盐

酸萘乙二胺偶合#生成紫红色染料#根据波长在

/I/(<处的吸收进行定量%本方法的检出浓度为

BEBJL#适用于测定受芳香族伯胺类化合物污染的

地面水和染料制药等系统的工业废水%该方法在测定

过程中#试样的MN值调节困难#且先调节MN值后定

容#试样MN值易失控#给分析结果带来一定影响%惠

学香.O0对此测定方法加以改进P以BEB1L稀硫酸

代替稀释水#先定容#再调节MN#取得了较好效果%

卢瑞仁.AB0则用改进的蒸馏偶氮比色法测定了苯

胺类化合物#该法于水样中用4)QN调至碱性#加一

粒锌蒸馏#检测限为BEBHRBEHSK>L%文献.AA0用铁

!T"和AEAB菲罗啉二种分光光度法测定了苯胺$邻$

间和对甲苯二胺#联苯胺%

痕量苯胺的测定受仪器限制均需预富集.A10%水样

预处理方法主要包括液U液萃取法和吸附萃取法#冯旭

东.AJ0提出了V萃取置换W的概念#对苯胺和间氯苯胺的

稀溶液进行了溶剂萃取和络合萃取的研究#对影响有

机溶剂和络合溶剂萃取分配系数的因素进行了讨论%

袁存光.AI0以4)-AB为氧化显色剂#亚硝基铁氰

化钠为催化剂测定了污水中的苯胺#测定的结果与经

典的萘乙二胺重氮2偶合分光光度法结果一致%袁存

光.A/0用XY2AOBA紫外可见分光光度机快速测定污

水中的酚类和苯胺类#曾鸽鸽等.A70用神经网络与紫外

光度法结合同时测定了苯酚$苯胺$),萘胺$间二硝基

及对乙氧基苯甲醛混合体系%范华昀.A80将苯胺重氮化

合后与甲萘酚进成偶氮染料化合物#在MNZA1EJ的

甘氨酸$氯化钠$氢氧化钠缓冲介质中#用偏最小二乘

计算分光光度法同时测定了[U萘胺$间二硝基苯胺$

苯胺$1#IU二甲氨基苯甲醛混合物并获得满意结果%

+)\]5(+, ,则在非水介质中用溴化AJU羟基苊并.A1

R70喹嗪作新的荧光指示剂#并将其沉积在光学纤维

中作荧光传感器测定了低浓度苯胺%王伦.AH0则采用了

三维荧光光谱法连续测定了苯胺$二苯胺和4U甲基苯

胺#该法使用X\5]*(^UABB作为增敏剂#其18B倍的酚

类#1JB倍的苯均不干扰#检测限依次为PAEB_AB'8

L#H,B_AB'OL#AEB_AB'8L#应用于工

业排污水样品的分析#结果满意%李耀群.AO0报道了使

用可变角同步荥光分析法同时测定苯酚和苯胺的方

法#该法与通常的固定波长同步荧光法相比较.1B0#使

分析的灵敏度和选择性均得到提高%

DEa电化学分析法

b*KK.1A0用流动注射伏安法在线溴量测定了苯酚$

苯胺$阿斯匹林和异烟肼#获得满意结果3b*KK.110还用

玻璃碳电极监测重氮化后的剩余硝酸盐#从而间接地

流动注射伏安法测定了芳香胺3韦进宝.1J0则利用了苯

胺与4)4Q

1

的重氨盐与亚硫酸钠的甲醛反应产物#

在'BE81c!cd,d-@"处产生导数极谱波#建立了苯极

谱测定新方法#并研究了反应机理#该法克服了导数示

波极谱法测定时操作繁琐#酚类干扰严重的缺陷#并获

得满意结果3高甲友.1I0观察到在氨水U氯化铵介质中#

HU羟基喹啉与苯胺重氮盐偶合生成的偶氮化合物在滴

汞电极上于BE8Ic处产生灵敏的导数极谱波#检测限

为BEBHRAEIBL建立单扫描极示波谱法测定苯胺

新方法#适用于污水中痕量苯胺的分析%朴元哲等

到.1/0制定了采用玻碳电极在BEALe-L中#同时

测定间硝基苯胺$邻氯苯胺$邻苯二胺的伏安分析方

法#检测限分别为AEB_AB'8L#AEB_AB'8L#

1EB_AB'HL%尹斌.17R180讨论了循环扫描伏安法#

恒电流及电位测定苯胺时对其它电化学的聚合因素#

并验证了聚苯胺膜电极上计时电流法及计时库仑理

论%尽管示波极谱与伏安法测定芳胺类物质时有报道#

但未找到选择性好#操作简便#稳定性#重现性都好可

作为经典的分析方法#这主要与芳胺物质本身的电化

学性质有关%关于电化学分析苯胺类物质的方法研究#

我国分析工作者作了大量的工作#并深入讨论了苯胺

类化合物的电化学聚合性质#杨周生.1H0则研究了超微

电极上恒电位苯胺的电化学聚合作用%

a结束语

除色谱法$分光光度法$电化学分析法#其它分析

H71仪器仪表学报第11卷

手段用于苯胺类化合物的分析亦有报道!随着色谱"

电化学#色质联用#流注"色谱"计算机联用等新仪

器#新技术不断开发#应用!苯胺类化合物的测定将更

加快捷#精确$

参考文献

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